由人类神经干细胞生成皮层锥体神经元

在培养板中，用带正电荷的聚合物多聚鸟氨酸包被盖玻片，并进行孵育。

多聚鸟氨酸形成一种网状层，有助于带负电荷的细胞黏附在盖玻片上。

移除溶液，并用缓冲盐溶液洗涤盖玻片，以去除未结合的多聚鸟氨酸。

加入含有细胞外基质蛋白层粘连蛋白的溶液，并进行孵育。

层粘连蛋白在多聚鸟氨酸包被的盖玻片上形成基质，增强细胞贴附。

弃去溶液，取少量悬浮于无生长因子培养基中的神经干细胞。

以缓慢旋转的方式将此低密度培养物加入已准备好的盖玻片上，以均匀分散细胞。

最初，生长因子剥夺会促进细胞分裂。

随着时间的推移，干细胞分化为具有长突起的神经元

最终，神经元会在其突起上产生类似脊柱的结构，例如大脑皮层的锥体神经元。

为制备神经元培养物，将玻璃盖玻片放入六孔培养板中，并加入多聚鸟氨酸。在超净工作台中孵育过夜。次日，使用DPBS洗涤盖玻片三次，并加入层粘连蛋白。在超净工作台中孵育至少10小时。

制备含有以下组分的培养基。然后用该培养基以每平方厘米50,000个细胞的密度接种并分装神经干细胞（NSCs），采用缓慢旋转吹打的方式移液，以减少细胞聚集成团。