制备幼鼠脑的上丘-丘脑皮层切片

将幼鼠的大脑置于载玻片上，使其背侧朝上。

修剪大脑前部，并将其重新放置在已形成的平面上。

将脑切片的背侧表面和中线对齐。以一定角度进行切割，以对齐相连的听觉中脑和前脑结构。这些结构包括下丘（IC）、内侧膝状体（MGB）、丘脑网状核（TRN）和听觉皮层（AC）。

将角度切割的脑表面用琼脂块固定在振动切片机的样本台上，确保后脑部分支撑在较薄的琼脂块上。

将样本架转移至振动切片机中，并加入缓冲液以防止组织损伤。

开始切片以定位IC、MGB、TRN和AC。

取出包含连接区域的脑片，称为上丘-丘脑-皮层切片，并将该脑片转移至孵育室中，以维持组织活性。

为准备切片的切割阶段，切取一块约1立方厘米的3%琼脂，用作脑组织的挡块；另取一块1.5厘米×1.5毫米×3毫米的琼脂作为隆起支撑下丘。

接下来，使用氰基丙烯酸酯胶水将挡板粘接到载物台上，然后将挡板右侧的凸起部分粘接，使其与挡板形成80度夹角。在一张标有两条相互垂直的线以及一条从左上到右下与水平方向成17度角的斜线的载玻片上，将脑组织背侧朝上放置于两条线的交点处。

使用剃刀切去脑部头端 2 至 4 毫米，以形成一个平坦的表面。接着，将脑部尾端朝上放置在新形成的平坦表面上。使脑的背侧表面与载玻片上标记的水平线对齐，脑的中线与垂直线对齐。然后，将剃刀与17度线对齐。将剃刀倾斜30度角，以双斜切方式切除右侧皮层约3毫米。

将脑组织安装到振动切片机载物台上时，取一小片滤纸置于脑腹侧，使其长轴方向与中线垂直。小心地将少量氰基丙烯酸酯粘合剂涂抹于挡块前方及凸起左侧的区域。随后，将脑组织双对角切割的一侧放置于胶水上，使脑的尾部及后脑部分支撑在凸起上，脑的右侧紧贴挡块。

在此步骤中，迅速将切片台放入振动切片机内，向切片台中加入切割液。接着，将刀片与脑组织顶部对齐，从脑组织顶部切除1至1.5毫米。然后，在逐步深入的过程中，继续切取并移除厚度为300至500微米的切片。

当下丘脑、内侧膝状体和外侧膝状核均可见时，齿状回应呈C形，且结构应保持对齐。获取约两片厚度为600微米的切片。这些即为下丘脑-丘脑-皮层切片。随后，将其转移至32摄氏度的保存室中。