从小鼠脑中制备倾斜的杏仁核脑片

取一个浸没在冰冻缓冲液中的小鼠大脑。

去除小脑，并修剪包含内侧前额叶皮层（mPFC）的前部组织。

将组织附着在已粘接到振动切片机样品台上的斜面琼脂块上。

附加额外的琼脂块以在切片过程中提供稳定性。将载物台放入已充满充氧冰浴缓冲液的振动切片机切割室中。

生成包含杏仁核的倾斜切片，该区域可响应恐惧刺激，并接收来自内侧前额叶皮层（mPFC）的神经元投射，这些投射在杏仁核内形成突触连接并调节其活性。

倾斜的切片暴露了投射区域，从而可以研究内侧前额叶皮层（mPFC）与杏仁核之间的功能连接。

将切片切成两半，放入含有充氧人工脑脊液的孵育 chamber 中，在室温下稳定组织。

将切片在生理温度下孵育，以恢复组织，用于后续检测。

使用解剖刀切除小脑。随后分离包含内侧前额叶皮层的脑前部区域。使用冷却装置将切割室中充满冰冻的切割液，并维持在 4 摄氏度。对溶液进行氧合。

用滤纸将脑组织吸干。将已切成35度斜面的4%琼脂块粘附于振动切片机的切片台上，并将脑组织的后部粘附于该琼脂块上。在脑组织琼脂块的前后两侧各粘附一块额外的琼脂块，以增强切片过程中的稳定性。

将带有组织的切片台放入切片室中，并确保其完全浸没。开始制备急性脑片。将每一片脑片切成两半，并转移至含有充氧人工脑脊液（ACSF）的界面式孵育室中，于室温下保存。在完成急性杏仁核脑片的制备后，将界面式孵育室置于36摄氏度的水浴中，使脑片恢复35至45分钟。