从小鼠脑中制备暴露杏仁核区域的冠状脑切片

0 次观看2:05 分钟 • July 8th, 2025

取小鼠脑组织置于冰上冷缓冲液中,去除包含小脑的后部以及包含内侧前额叶皮层(mPFC)的前部。

中部包含处理恐惧和焦虑等情绪的杏仁核区域。

将脑组织切片移至滤纸上,以去除多余的缓冲液。

将其粘附到载物台上,并在切片后方固定一块琼脂块,以防止切片在切片过程中移动。

将此样本置于装有冰冻缓冲液的振动切片机切割室中。

切割组织以获得薄的冠状脑切片。

这暴露了杏仁核区域,其中包含杏仁核神经元之间的突触连接以及调节杏仁核反应的内侧前额叶皮层(mPFC)神经元的投射。

将切片切成两半,每半包含一个杏仁核区域。

接下来,将它们转移至含有充氧人工脑脊液的界面式切片孵育室中。

在生理温度下回收切片,以维持神经元的活性。

获取脑组织后,使用解剖刀切除小脑及脑内部结构,然后将脑的中段部分如前所述置于冰冷的切割液中冷却。用滤纸吸干脑组织,再将其黏附至振动切片机的载物台上。

再次,在脑组织后方固定一块额外的琼脂以增加切片时的稳定性。将切片阶段放入盛有4°C切割液的切片室后,对杏仁核区域进行320微米厚的冠状切片。将切片一分为二,并像之前一样收集到界面切片室中。