通过荧光激活细胞分选法从秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中分离神经元

取自转基因生物获得的细胞悬液 秀丽隐杆线虫 培养基中的蠕虫.

该悬液含有来自多种组织的细胞，包括来自神经系统的神经元。

这些转基因蠕虫被设计用于表达一种与囊泡跨膜转运蛋白结合的荧光蛋白。该转运蛋白存在于携带神经递质乙酰胆碱的突触囊泡上，分布于全身的胆碱能神经元中。

离心细胞悬液并弃去上清液。将细胞重悬于新鲜培养基中，用于荧光激活细胞分选（FACS）。

使用FACS分析细胞悬液。经荧光标记的胆碱能神经元在适当波长的光照射下会发出荧光，从而将其与其他未标记细胞区分开来。

将分离的神经元转移至多孔板中。在加湿孵育箱中孵育细胞，以维持湿度水平。

将分离的细胞悬液在 10,000 × g、4 摄氏度条件下离心 5 分钟。弃去上清液，并将沉淀的细胞重悬于添加了补充物的 L-15 培养基中，细胞密度不超过每毫升 600 万个细胞，以避免流式细胞仪过载。随后，使用具备分选功能的流式细胞仪，根据 GFP 阳性表达对细胞进行分选。

GFP阴性细胞可作为非细胞类型特异性分析的对照。随后，将分离的细胞接种至无菌六孔板的各孔中。将该六孔板放入塑料容器内，在容器中加入湿润的擦拭纸或软纸巾以增加湿度，并于20摄氏度条件下孵育。