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在合适的发育阶段取受精的母鸡蛋。
切开外壳以接触胚胎。
找到并解剖头部，然后将其转移到含有冷冻磷酸盐缓冲液的培养皿中。
去除眼睛和下巴。
将皮肤与颅骨表面分开。
接下来，切割并去除颅骨。
清除周围的结缔组织以暴露大脑。
分离前脑。
然后，将小脑与后脑和血管分离。
将小脑转移到冷冻的盐缓冲液中。
胚胎小脑含有一层快速分裂的神经元祖细胞，这使得它对神经发生研究很有价值。
将小脑放在组织切碎机的平台上。
去除多余的缓冲液并切片小脑。
在切片上放冷冻的盐缓冲液。
将小脑切片转移到含有冷冻盐缓冲液的培养皿中。
在显微镜下，分离各个切片以进行进一步分析。
首先，将受精的棕色鸡蛋放入 38 摄氏度的鸡蛋孵化器中，直到它们达到胚胎第 14 天。在胚胎第 14 天，在鸡蛋上切一个口以暴露胚胎，并在卵中将雏鸡胚胎斩首。将头部放入含有冰冷PBS的培养皿中。
在解剖显微镜下，使用标准镊子在每只眼睛后面切开一个切口，一直穿过组织，然后切除眼睛和上颌。然后，在咽部做第二个切口以去除下颌。接下来，使用标准镊子剥离头骨表面的皮肤，将其去除。然后，去除额骨和顶骨，露出大脑。
从腹侧，去除咽软骨和辅助间充质。然后，将大脑背侧朝上放置，小心地去除后脑背侧的间充质，注意不要损坏软脑膜。接下来，在中脑和后脑之间的组织中做一个切口，以分离后脑，包括小脑。在小脑的外侧交界处和后脑的鼻翼板处一直切开组织。切除整个小脑，注意在整个解剖过程中保持软脑膜的完整性。
最后，去除正在形成的脉络丛，并将解剖的小脑移入冰冷的HBSS中。使用抹刀或 3 毫升巴斯德移液器将整个小脑转移到组织切碎机的无菌平台上，切掉尖端以扩大孔径。使用移液器去除多余的液体。
将组织切碎机的切割速度设置为其最大值的 50%。然后，以所需的方向切割小脑，厚度为300微米。使用3毫升巴斯德移液器，将切片的小脑覆盖在冷HBSS中。
然后，使用带有切割尖端的 3 毫升巴斯德移液器，将 HBSS 和切片转移到含有 20 毫升冰冷 HBSS 的 60 毫米培养皿中。将培养皿放在解剖显微镜下，用光纤光源照射。然后，使用制表钳分离脑组织的各个切片。
