小鼠脑内侧丘脑-前扣带皮层切片的制备

从一只断头的小鼠开始。去除皮肤以暴露颅骨，打开颅骨以获取脑组织。

去除嗅球并切断所有神经连接，将脑组织取出并置于冰冻的含氧人工脑脊液（aCSF）中。

取出脑组织，在每一半上做两个垂直切口，以暴露其内部解剖结构。

制作两个斜切面以分离包含丘脑内侧-前扣带皮层（MT-ACC）通路的脑区。丘脑内侧（MT）是丘脑的一部分，起中继站的作用 通过 延伸至额叶皮层前扣带皮层的神经元投射

使用粘合剂将脑组织固定在倾斜的载板上，进行切割以展开脑组织并暴露通路，然后将其附着于振动切片机的样品台。

将脑片置于振动切片机中，加入缓冲液，并制备包含 MT-ACC 通路的脑片。

将脑片置于持续流动的含氧人工脑脊液（aCSF）中，以维持其活性。

暴露动物的颅骨，并剔除残留的肌肉组织。接着使用咬骨钳剥离颅骨的背侧表面，并修剪两侧部分。随后，使用刮匙沿脑腹侧表面切断嗅球及神经连接，再将脑组织取出。

迅速将脑组织转移至装有冰冷含氧人工脑脊液（ACSF）的烧杯中。为制备包含丘脑-前扣带皮层（MT-ACC）通路的脑片，在每侧半球距中线外侧2毫米处进行矢状切面切割，以暴露皮层下解剖结构。

然后，在纹状体中沿可见的纤维束平行方向做一个倾斜的横切。第二个倾斜横切从小脑与视觉皮层的连接处开始，延伸至前连合与视束之间中点处，该路径位于丘脑扣带通路的腹侧且与之平行。随后，使用氰基丙烯酸酯粘合剂将脑组织块固定在角度板上。

在通路转折点稍上方进行切割。随后展开切片，将其展平并粘贴到振动切片机的切片台。接着，将脑组织切成500 µm厚度的切片，并将其保存在冰上预冷的含氧人工脑脊液（ACSF）中。将一片脑组织转移至记录室，在32 °C条件下以持续灌流的含氧ACSF孵育一小时。