果蝇幼虫脑组织外植体的解剖与封片

0 次观看2:21 分钟 • July 8th, 2025

从培养皿中生理盐水溶液内的果蝇(Drosophila)幼虫开始。该溶液可防止幼虫脱水。

在解剖显微镜下,找到幼虫前端具有口钩的部分。

前端包含眼盘和中枢神经系统(CNS),后者由脑叶和腹神经索组成。

用镊子夹住幼虫的后端,再用另一把镊子拉住前端,以挤出内部器官。

移除肠道及附着的肌肉,以分离与眼盘相连的中枢神经系统。

为了安装脑组织外植体,将提取的组织转移至载玻片上由石蜡圈围成的生理盐水溶液内。

确保外植体的背侧朝上,并用盖玻片封固组织。脑外植体已准备好进行分析。

在解剖显微镜下,使用一对5号标准尖头解剖镊子固定幼虫样本,同时用另一对镊子小心分离出幼虫 Drosophila 的脑组织,保留眼原基、脑叶及腹神经索。随后去除附着的肌肉,以尽量减少成像过程中样本的移动。当所有脑组织采集完毕后,用真空脂在载玻片上绘制一个方形腔室,并向其中加入20 µL 外部生理盐水溶液。

用镊子将脑组织转移至样品室中,并在显微镜下调整脑组织的位置,使其背侧朝上。用玻璃盖玻片覆盖样品室,并轻轻按压盖玻片,以减少成像过程中样品的漂移。