建立眼病模型的玻璃体腔注射法
2007年10月1日
玻璃体内注射是视觉科学研究中用于眼部疾病或局部治疗直接给药的常用技术。本视频展示了一种使用1 ml注射器配合玻璃毛细管进行玻璃体内注射的实验方案。同时提供了有关避免大量出血和晶状体损伤的实用技巧。
您好，我是来自Guso实验室的TU。今天我将向您介绍如何进行玻璃体腔注射，以建立动物模型或阻止眼部疾病进展。以下是示意图。
用于显示红眼内注射针头的位置。将针头以45度角刺入瘢痕表面的后房。采用45度角可避免损伤晶状体。
进行玻璃体腔注射时，我们将在手术显微镜下实施眼内注射。动物将通过氯胺酮和赛拉嗪混合物实现麻醉。同时将使用局部麻醉剂和抗生素软膏。
我们使用玻璃毛细管进行注射。使用预先准备好的拉针仪来制备玻璃毛细管。然后需要去除玻璃毛细管末端非常尖锐的部分。
我们可以将其与100万支注射器连接。使用香水将连接处密封。然后通过此玻璃管，可以缓慢而平稳地吸取两微升（2 µL）注射溶液，并将红色部分置于显微镜下。
在表面滴加一滴局部麻醉剂，然后吸除多余液体。使用30 G针头穿刺巩膜。针头垂直于巩膜表面，仅针尖部分刺入。
从穿刺孔可见有部分房水渗出。轻轻推动以排出更多房水，从而获得更大的操作空间。在红眼的后房内，将玻璃体穿刺针的针尖以45度角插入玻璃体，方向朝向瘢痕表面。
尽量避免损伤晶状体。缓慢注射，切勿将气泡注入眼内。停留数秒后，将针头抽出。
然后在眼部涂抹抗生素软膏。玻璃体内注射的主要挑战是尽量减少对眼球的操作。我们需要避免眼内出血、晶状体损伤和视网膜脱离。
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概述
本视频演示了一种用于进行玻璃体内注射的实验方案，该技术在视觉科学研究中十分常见。视频提供了在操作过程中避免晶状体损伤和大出血等并发症的实用指导。
关键研究组成部分
科学领域
- 视觉科学
- 眼病研究
- 注射技术
背景
- 玻璃体内注射对于眼内疾病的局部治疗至关重要。
- 该技术常用于构建动物模型以开展研究。
- 正确的操作技术对于避免并发症至关重要。
- 注射角度在预防晶状体损伤方面起着重要作用。
研究目的
- 演示玻璃体内注射的正确操作技术。
- 提供在操作过程中降低风险的实用建议。
- 加深对眼部疾病治疗方法的理解。
使用的方法
- 使用带玻璃移液管的1 ml注射器进行注射。
- 以与瘢痕表面成45度角的方向进行注射。
- 使用视觉辅助工具标示注射部位。
- 演示避免并发症的技术方法。
主要结果
- 成功演示玻璃体内注射技术。
- 指导如何避免晶状体损伤和出血。
- 清晰展示注射过程。
- 有效传达操作技巧。
结论
- 玻璃体内注射是眼科研究中一种重要的技术。
- 正确的操作技术对于获得成功结果至关重要。
- 视觉辅助工具可增强对该操作步骤的理解与执行效果。
常见问题
行业重要性概述
玻璃体内注射可将治疗剂精确递送至玻璃体腔，有助于眼病模型的建立及局部治疗效果的评估。该技术可减少全身暴露，增强临床前研究中的靶点作用。掌握该方法可提高眼药理学和眼毒理学评价的可重复性，降低实验变异性。
生物制药研发中的战略应用
早期发现与靶点验证
- 科学价值：通过在与疾病相关的模型中进行局部化合物递送，实现对眼部靶点的功能性探究。
- 操作价值：通过将玻璃体内药物动力学与系统性干扰因素分离，支持假设验证。
筛选与检测方法开发
- 科学价值：为玻璃体内化合物的体内剂量-反应分析提供了一种标准化途径。
- 操作价值：利用玻璃移液管和1 mL注射器等易得材料，可实现注射工具的可重复制备。
转化与临床前研究
- 科学价值：支持眼用治疗药物转化模型研究中关键的药代动力学和生物分布研究。
- 操作价值：通过标准化的注射角度和注射位点选择，实现在不同实验室间稳定构建模型。
流程与工作流整合
该方法适用于从靶点验证到临床前有效性测试的眼科研究连续过程，可实现化合物直接递送至眼后段。
- 发现生物学：通过向玻璃体递送激动剂、拮抗剂或核酸，支持靶点结合验证。
- 筛选：通过提供可控且局部的给药途径，实现在体化合物筛选。
- 分析：允许定量检测眼内药物浓度及注射后生物标志物的变化。
- 转化研究：通过玻璃体内挑战建立可重复的疾病模型，连接发现研究与临床前研究。
- 企业级复用：可跨项目重复用于青光眼、视网膜变性及炎症性眼病模型。
运营与企业影响
- 科学价值：通过最大限度减少操作变异性和眼部创伤，提高预测可信度。
- 操作价值：通过标准化针头制备和注射角度，降低技术失败率。
- 战略价值：确保各研究间模型保真度一致，从而优化“推进/终止”决策。
- 项目组合影响：支持经验证的局部递送技术，推动眼部候选药物的风险调整后进入下一阶段。
实施注意事项
- 需要接受显微外科技术和眼部解剖学的培训，以避免视网膜或晶状体损伤。
- 依赖于注射显微镜、玻璃毛细管拉制仪和无菌1 mL注射器的可用性。
- 需要在不同操作团队间对针头角度（45°）、穿刺部位（上方鼻侧）和玻璃体清除操作进行标准化。
- 针对不同物种（如小鼠、大鼠）的应用需重新校准穿刺深度和注射体积。
- 受限于操作者手工技能的依赖性；由于组织差异性，自动化操作仍具挑战性。
