小鼠脑内脑室注射树脂毒素实现TRPV1去敏感化治疗

0 次观看 • 2:54 分钟 • August 7th, 2025

取一支装有树脂毒素(resiniferatoxin)的微量注射器,树脂毒素是TRPV1受体(在感觉神经元上表达的疼痛敏感离子通道)的高亲和力激动剂。

将针穿过金属管,使针尖露出一小段,以便精确靶向心室。

将麻醉后的小鼠置于俯卧位,并用酒精消毒其头部。固定头部以稳定颅骨。

在头皮上横向移动针头,直至其钩住矢状缝。

将针头向右移动,然后向前上方移动,钩住冠状缝。

将针头插入右侧脑室,然后缓慢注射RTX。

保持针头短暂停留以允许 RTX 扩散,然后缓慢拔出,防止回流。

RTX 与脑内感觉神经元上的 TRPV1 通道结合,引起持续的钙离子内流和长时间的神经元去极化。

这会触发磷酸化介导的TRPV1失敏,随后发生TRPV1内化及溶酶体降解,从而降低神经元对疼痛刺激的反应性。

用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠,并检查翻正反射是否消失。对于皮下给药,将RTX以每毫升20微克的浓度,按每10克体重0.1毫升的体积注射至小鼠颈部背部。对照组以相同方式注射溶剂。将一次性27号针头穿过金属套管,使针头尖端露出3至3.5毫米。

然后用手指牢固地固定住小鼠的鳞状骨。将针头在头皮上向侧方移动,找到矢状缝。当针尖钩住缝合线时,将针尖向右移动约一毫米。然后将针尖向前移动以找到冠状缝。随后,缓慢垂直插入针头。在十秒内注入RTX溶液,并在注射后继续留置十秒。接着,缓慢拔出针头,并将小鼠放回其饲养笼中。

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