为什么零假设检验对MSC迁移分析很重要？

零假设检验可确保观察到的间充质干细胞向脑损伤部位迁移具有统计学显著性，而非随机分布所致，从而为神经再生研究中的靶点验证提供有力支持。

独立变量隔离如何改进鼻内给药研究？

分离诸如酶预处理或间充质干细胞标记等变量，可使研究团队将观察到的效应明确归因于递送参数，从而提高发现阶段对机制性研究结果的可信度。

在本实验方案中，定量因变量测量能够实现什么？

对标记的间充质干细胞进行定量追踪及其神经营养因子分泌的检测，可实现不同实验条件下递送效率与治疗效果的客观比较。

为什么复制要求对于跨职能协作至关重要？

重复实验可确保细胞递送和迁移结果在不同团队之间具有可重复性，从而促进多中心研发环境中可靠的数据共享与协同进展。

在实施实验方案之前需要具备哪些统计分析能力？

研究团队需要借助统计学工具来分析细胞迁移、分泌水平和髓鞘再生结果，以确保研究结果达到预设的阈值，从而支持在发现流程中做出推进决策。

小鼠创伤性脑损伤模型中的鼻内间充质干细胞递送

JoVE Encyclopedia of Experiments

神经科学

0 次观看 • 2:39 分钟 • June 17th, 2025

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从一只患有创伤性脑损伤的麻醉小鼠开始。

在损伤部位，轴突脱髓鞘和神经元损伤会引发促炎性细胞因子的释放。

固定小鼠，并通过鼻内途径递送蛋白酶。

接下来，将小鼠仰面放置一段时间，重复酶的递送操作。

蛋白水解酶可降解鼻上皮中的细胞外基质，并增强细胞通透性。

然后，通过鼻内给予标记的间充质干细胞（MSC）溶液。

将小鼠头部保持直立一段时间，以防止过早流失，并促进间充质干细胞被鼻腔组织吸收。

重复MSC递送过程。

让小鼠恢复。

促炎性细胞因子的趋化信号可引导间充质干细胞从鼻腔迁移至脑损伤部位。

在损伤部位，间充质干细胞分泌促进髓鞘再生的神经营养因子。这凸显了间充质干细胞在神经修复中的神经治疗潜力。

进行细胞递送时，在确认小鼠对脚趾夹捏无反应后，固定小鼠背部皮肤以 immobilize 头骨。将含有每微升 PBS 4 单位透明质酸酶的移液枪头以 45 度角靠近小鼠鼻孔，向每侧鼻孔内注入 3 微升透明质酸酶悬浮液。将动物面部朝上置于洁净垫上 5 分钟，随后重复该操作四次，总计给予 100 单位透明质酸酶处理。

最后一次处理后，将小鼠重新放回垫子上静置30分钟，然后如前所述固定小鼠。固定头部后，在3秒内将3微升间充质干细胞悬液缓慢滴入每侧鼻孔，保持小鼠体位不动30秒，直至液体完全消失。2分钟后，重复上述操作，最多重复3次，直至全部间充质干细胞悬液完成递送。随后将小鼠放回笼中，并持续监测直至其完全恢复卧姿。