评估酸性后处理在脑缺血小鼠模型中的神经保护作用

取一只已麻醉的小鼠，将其大脑中动脉插入单丝线以诱导闭塞。

这会阻断流向大脑的血液，引发局灶性缺血。

闭塞限制了氧气和葡萄糖的供应，导致ATP耗竭和神经元去极化。

去极化的神经元会释放过量的谷氨酸，后者与突触后受体结合，导致大量钙离子内流。

细胞内钙离子浓度升高会破坏线粒体功能并促进活性氧（ROS）的产生，从而引发神经元损伤。

重新麻醉小鼠。

重新切开切口并移除单丝线以实现再灌注。

突然重新供氧会导致功能障碍的线粒体产生过量活性氧，从而加重神经元损伤。

为减轻此现象，可在再灌注开始后，使小鼠暴露于高二氧化碳气体混合物中以进行酸性后处理（acidic postconditioning, APC）。

这会增加脑内的质子浓度，抑制受体，减少钙离子内流，并防止钙介导的兴奋性毒性。

此外，APC 可稳定线粒体并抑制活性氧（ROS）的产生，从而提供神经保护作用。

阻塞开始后55分钟，用异氟烷重新麻醉动物，并按之前的方法摆好体位。然后打开颈部切口，重新暴露颈总动脉。阻塞期结束后，使用眼科镊子轻轻拉出栓线以实现再灌注。随后通过收紧结扎线，将临时缝线转为永久性结扎。对于酸中毒处理，将鼻罩吸入的气体改为20%二氧化碳、20%氧气和60%氮气，持续5分钟。使用间断外科缝线关闭切口后，将小鼠置于30°C的加热笼中，直至其恢复意识。