清醒大鼠运动皮层的经颅电刺激

从一只麻醉的老鼠开始，其头骨中嵌入了螺钉。

大鼠有一个胸部植入的对电极，皮下隧道电缆固定在其中一个颅骨嵌入的螺钉周围。

将电缆焊接到连接器上。

经颅脑电刺激或 tES 电极插座粘在运动皮层上方的颅骨上。

用胶水密封组件，然后用牙科水泥固定。

重新定位皮肤，让大鼠恢复。

生理盐水填充插座。

拧紧包含刺激电极的 tES 电极盖。

刺激装置连接到连接器。

老鼠放在允许自由活动的笼子里。

启动阳极刺激，在运动皮层中产生电场，实现电压门控离子通道打开、正离子流入和神经元去极化。

这增强了突触活性，触发 ATP 释放，从而激活小胶质细胞，这对免疫反应至关重要。

神经元和小胶质细胞的激活凸显了 tES 的神经治疗潜力。

首先用手术刀刮掉骨膜，即颅骨上的结缔组织，到两侧，然后用棉签彻底擦拭。用斗牛犬夹固定切口四个角的结缔组织，并让它们横向悬挂以保持手术区域开放。

接下来，用棉签涂抹 0.9% 的生理盐水清洁骨表面和组织。然后用3%的双氧水清洁骨面。当骨膜的任何残留物变得可见时，使用棉签清除它们。由于固定螺钉会提高设置附着力，因此请选择适合螺钉尺寸的钻头。用手钻预钻，然后用骨钻轻轻垂直按压，在两个不同的骨板上放置两个钻孔。

了对电极，如本视频所示，在右后顶骨上钻第三个孔，以便将来固定隧道电缆。将塑料螺钉放入毛刺孔中并拧紧，直到感觉到第一次摩擦。然后再进行三个 180 度螺丝转动。

使用镊子检查螺钉的稳定性，如果不够紧，再转 1 圈。打开烙铁并预热约 5 分钟。将离开组织隧道的电缆枕头缠绕在右顶叶螺钉上，然后将其剪断，在缠绕后面留下大约 1 厘米的电缆。

用手术刀小心地剥去电缆末端的绝缘层，然后用氰基丙烯酸胶将缠绕的电缆固定在螺钉和骨头上。接下来，将少量无铅锡焊料涂在连接器和对电极电缆的裸线上，通过将两个预先分类的部件短暂压在一起来连接两者，同时触摸焊头，直到锡焊料熔化。

立即取下烙铁头，以避免电缆金属过度加热并导致随后的组织损坏。为了刺激运动皮层，请使用直径为 4 毫米的插座。拿起带有弯曲锯齿状尖端镊子的定制 tES 电极插座，并在插座的底部边缘涂上一层薄薄的氰基丙烯酸胶。

窝内内缘应直接终止于矢状缝线，尾部内缘应终止于前裂缝高度。然后将插座短暂压在骨头上，直到胶水变硬。并使用灯确保插座区域内的骨头上没有任何反光胶。

插座就位且未来的刺激区域没有胶水后，用一小滴氰基丙烯酸胶将插座的侧缘密封到邻近组织，以避免可能导致该位置电流分流的流体桥。然后用氰基丙烯酸胶覆盖所有螺丝。

接下来，将两种组分牙科丙烯酸水泥混合在小硅管或玻璃中。一旦它变得粘稠，就用牙铲将其涂抹，将牙槽的剩余边界密封到骨头上。最后，用牙科丙烯酸水泥覆盖整个颅骨螺钉、对电极电缆和最多三分之一的牙槽。覆盖所有骨头并且水泥硬化后，取下斗牛犬夹并重新定位皮肤。

首先用 0.9% 的盐水填充 tES 电极插座的一半并去除气泡。在阴极 tDCS 会话之前，检查氯化。如果需要，对银-氯化银电极重新氯化。在阳极 tDCS 会议之前，用砂纸去除先前刺激中可能存在的多余氯化银沉积物，以在刺激过程中保持良好的导电性。然后拧入 tES 电极盖。

电缆连接到头部的两个连接器。然后，将啮齿动物放入实验笼中，电缆连接到笼子上方的转环上，以便自由移动。打开刺激器并调整刺激参数。最后，刺激结束后，断开电缆，拧下头部的电极盖，用棉签清洁并擦干插座。