评估大气压等离子体处理对葡萄糖剥夺神经母细胞瘤细胞的影响

取一培养有多神经节细胞的多孔板，其中含有培养基。

用无葡萄糖的神经元培养基替换孔中的培养基，以诱导氧化应激。

将培养皿置于等离子体射流喷嘴下方，保持最佳距离以实现均匀暴露。

使用低剂量的基于氦气的常压等离子体射流（APPJ）处理选定的孔，该射流可产生可控水平的活性氧和氮物种。

孵育细胞，以促进应激反应通路的激活以及APPJ处理孔中抗氧化酶的上调。

葡萄糖剥夺条件下，未经处理的孔中的细胞会遭受进一步的氧化性细胞损伤。

加入细胞活力检测试剂并孵育。活细胞将试剂还原为有色产物。

使用微孔板读数仪测量颜色强度。

经APPJ处理的孔中由于细胞活力较高而表现出更强的颜色强度，而未处理的孔颜色强度较低，证实了APPJ在葡萄糖剥夺条件下具有神经保护作用。

调节石英管喷嘴与96孔板放置平台之间的距离至三厘米，以确保等离子体束能够接触到培养基表面。处理前，将每孔中的培养基更换为不含葡萄糖的RPMI 1640培养基。随后，将培养板置于常压等离子体射流喷嘴下方，分别对不同孔中的细胞进行0、1、2、4、8和12秒的处理。

处理后，将细胞在37摄氏度的细胞培养箱中孵育1小时，随后向每孔加入10微升Cell Counting Kit 8溶液。然后，在37摄氏度下继续孵育4小时。最后，使用酶标仪在450纳米波长下测定吸光度。