通过颈内动脉灌注将物质靶向递送至小鼠脑部

0 次观看3:42 分钟 • June 17th, 2025

取一只已麻醉的小鼠,暴露其颈总动脉(CCA),该动脉分叉为颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。

紧密缝合远端颈外动脉,在分叉附近打一松结,然后夹闭颈总动脉和颈内动脉以阻断血流。

切开ECA,然后插入连接至含有待测物质注射器的毛细管。

将毛细管推进至分叉处与颈总动脉夹之间,然后通过收紧近端的颈外动脉结来固定。

移除颈内动脉夹,输注物质以实现向脑部的靶向递送,同时绕过体循环。

该物质穿过血脑屏障,到达脑实质。

暴露颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)后,使用镊子将一段1厘米长的尼龙缝合线置于颈外动脉下方,然后再放置第二段1厘米长的缝合线。随后,在ECA尽可能高的位置打一个永久结。

在颈总动脉分叉上方的颈外动脉尽可能低的位置,打一个较松的可拆除结。然后使用血管夹在尽可能低的位置夹闭颈总动脉,并夹闭颈内动脉。

在颈外动脉上做小切口之前,应妥善闭合颈内动脉,以防止出血。

现在,使用显微解剖弹簧剪在两条结扎线之间的颈外动脉上做一个2毫米的切口。

保持切口小很重要,因为较大的切口会导致待输注物质泄漏。

将一段6英寸长的毛细管连接到装有250微升待输注物质的结核菌素注射器上,组装输注系统。然后将毛细管末端轻轻插入颈外动脉(ECA)的切口内,继续推进毛细管末端,直至其到达颈总动脉(CCA)夹与分叉处之间的中点位置。

固定住下位ECA结扎线。确认结扎松紧适度,既能保证毛细血管通畅,又可防止渗漏。随后,移除ICA上的夹子。轻柔地推动注射器活塞,以大约每秒10 µL的速度注入物质。

注入测试物质后,将夹子重新放回颈内动脉(ICA)。轻轻移除毛细管,然后完全结扎远端颈外动脉(ECA)的结。移除颈内动脉(ICA)和颈总动脉(CCA)上的夹子。随后移除牵开器或组织钩以及垫枕。

用无菌生理盐水清洁待缝合区域,然后使用尼龙缝线关闭切口。给予动物经批准的抗炎药和镇痛药以减轻术后不适后,将动物置于带有加热垫的笼子中至少一小时,并监测其恢复情况。