使用石英微针进行啮齿类动物脑部微注射

0 次观看2:58 分钟 • August 7th, 2025

取一根带有定制孔洞的石英微针,将其连接至装有水的注射器,并与微泵相连以控制输送速率。

取一只已固定并麻醉的大鼠,暴露注射部位。

放置微针,并在其下方放置一层石蜡膜。将一滴注射溶液滴加在膜上。

回抽水分以形成气泡,然后降低微针以吸取溶液。

让液滴形成,确保通道清晰。

使用锋利的针头刺穿脑膜。

以较低的递送速度插入微针,以防止组织碎片进入针内。

定位后,再稍微深入一些。停止推注并再次抬高,以避免反流。

以较高速度开始注射。针头上的孔可确保注入的溶液得到最佳分布。

在拔出针头前留出足够时间,以促进扩散。

剪下一小块塑料石蜡膜,将其放置在颅骨上。使用10微升移液器,在塑料石蜡膜上滴加一滴待注射溶液。停止泵的运行。轻微回拉泵的推杆,通过轻轻拉动显微注射器的活塞,在毛细管内形成一个小气泡。

将针尖降低至液滴处。通过非常缓慢地拉动显微注射器的活塞来吸取样品,避免产生任何气泡。将泵的推杆重新置于与活塞接触的位置,并以0.3微升每分钟的流速启动泵。

然后等待液滴形成后再进行下一步操作。随后,将流速降低至 0.1 微升每分钟。使用不锈钢斜面针头切开硬脑膜,并缓慢下放针头以进入脑组织。当到达目标位置后,再继续下降 0.1 毫米,然后停止泵送。

将体视显微镜臂升高0.1毫米,然后以0.3微升/分钟的流速重新启动泵。随后,启动计时器并开始注射。注射过程中监测气泡的移动。结束时,停止泵运行,并等待五分钟,然后缓慢撤出针头。