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神经科学
0 次观看 • 3:31 分钟 • August 7th, 2025
取一只麻醉后的大鼠,并涂抹眼用润滑剂。
剃除目标肢体的毛发,对皮肤进行消毒,并将大鼠摆放到合适位置,以确保充分暴露目标肌肉。
提起并切开皮肤以暴露肌肉。
参考运动终板(MEP)的照片,即运动神经元轴突末梢与肌纤维形成神经肌肉接头的区域。
在暴露的肌肉上 mentally 映射 MEP 区域。
取一支含有荧光示踪剂的玻璃微量移液管。
在MEP区域沿多个点进行肌肉注射示踪剂。
去除多余的示踪剂,关闭切口,并给予镇痛药物。
注射可提高神经肌肉接头处示踪剂的可及性,促进其在轴突末梢的内吞作用。
包裹在囊泡内的示踪剂随后被逆向运输至脊髓中的运动神经元胞体。
脊髓中示踪剂标记的运动神经元的存在表明了靶向MEP递送的神经治疗潜力。
为了在运动终板处注射活体肌肉,首先使用微电极拉制仪制备带有推杆的梯度玻璃微电极。接着,在解剖显微镜下,用镊子折断微电极的尖端,使每个管腔的内径约为0.5毫米。然后,将拉制好的微电极中充满氟金染料。
现在,将眼用润滑剂涂抹于已麻醉的动物,并剃除待注射肢体的毛发。使用纱布依次交替以氯己定和70%酒精擦拭剃毛区域,共擦拭三次。然后,将动物置于干净的垫巾上,以便接触目标肌肉。当动物体位固定后,使用带齿镊子将目标肌肉上方的皮肤从下方肌肉组织处轻轻提起,并用手术剪在皮肤上做一个切口。
注意切口应足够大,以充分暴露目标肌肉,同时尽量减少对筋膜的损伤。然后,利用运动终板的照片,在脑海中将目标运动终板区域的位置和形状投射到肌肉上,并沿运动终板区域全长进行 3 至 4 次注射,每次注射 1 至 2 µL 荧光金。
最后一次注射后,轻轻擦拭肌肉以清除任何渗出液。然后使用钝头镊子将切开皮肤的两端拉近并合拢。用外科缝合夹关闭伤口,并将适量的局部麻醉剂浸润整个伤口区域。