靶向siRNA递送至神经元以沉默朊蛋白的脂质体复合物应用

从一种小干扰RNA开始，该RNA可抑制朊病毒蛋白的表达，这种蛋白与神经退行性朊病毒疾病相关。

加入阳离子脂质体悬液。

带负电荷的 siRNA 会结合到带正电荷的脂质体表面。

介绍 RVG-9r 肽，一种与多聚精氨酸尾部相连的狂犬病毒糖蛋白。

精氨酸残基促进 RVG-9r-siRNA 的结合。

将脂质体-siRNA-多肽复合物注射到麻醉小鼠的尾静脉中。

LSPC 通过血液流动并到达大脑。

RVG-9r 肽可结合内皮细胞上的烟碱型乙酰胆碱受体，触发受体介导的跨血脑屏障转胞吞作用。

在脑内，RVG-9r 会结合神经元上的乙酰胆碱受体，促进 LSPC 的内吞作用及 siRNA 的释放。

RNA诱导的沉默复合体与siRNA结合。

passenger链解离，而引导链结合并切割PrP mRNA，从而阻止翻译并降低PrP的表达。

取20 µL的4 nmol脂质体悬液加入到200 µL的20 µmol/L siRNA储备液中，室温孵育10分钟。然后向siRNA-脂质体溶液中加入80 µL的500 µmol/L RVG-9r靶向肽储备液，室温孵育10分钟。

使用氧气中2%至3%的异氟烷麻醉小鼠后，用眼膏覆盖小鼠的眼睛，并通过脚趾夹捏测试确认麻醉状态。只有在无反应时方可继续操作。在维持麻醉状态下，将小鼠仰卧或侧卧放置，以便接触尾静脉。

用70%乙醇擦拭小鼠尾部，然后使用26号胰岛素注射器向尾静脉注射300 µL LSPCs或PALETS。从远端开始注射，如果静脉塌陷或破裂，则向近端移动。将小鼠置于洁净的笼子中，直至其能够维持胸卧位。