在脊髓延髓肌萎缩症小鼠模型中注射重组腺相关病毒载体

从一只受限制的脊髓延髓肌萎缩症（SBMA）小鼠模型开始。

清洁其尾部并进行加温以扩张血管。

脊髓延髓肌萎缩症（SBMA）由突变的雄激素受体（AR）基因引起，该基因产生突变的AR mRNA。

该mRNA在运动神经元中合成毒性蛋白，干扰信号传导，导致肌肉无力。

接下来，取一支含有重组腺相关病毒（AAV）载体的注射器，该载体质粒编码治疗性微小RNA。

将针头插入尾静脉并注射溶液。

现在，施加压力以止血，然后将小鼠放回笼中。

一旦进入循环系统，病毒载体即可到达控制肌肉功能的运动神经元。

病毒通过内吞作用进入细胞，释放质粒。

该质粒可产生与突变型AR mRNA序列互补的成熟microRNA。

这些 microRNA 与 AR mRNA 结合，触发其降解。

这可以抑制毒性蛋白的积累，并有助于改善神经肌肉功能。

将AAV microRNA质粒储备液分装为100至200微升的等份，每毫升含有10至100万亿个病毒基因组。接着，取其中一份加入注射器中，并连接27至30号针头。

现在，使用标准的小鼠固定器将小鼠固定，使其尾巴暴露。然后用70%酒精清洁尾巴，并在尾巴下方放置温热垫约30秒，以促进血管扩张。接着，在尾巴远端部位，将针头斜面向上、以约15度的浅角度插入尾静脉。

然后注射病毒，并在拔出针头前等待几秒钟。拔出针头后，用两根手指施加适度压力以止住出血。随后将动物放回其饲养笼中。