构建多巴胺负载型外泌体载体系统

0 次观看2:11 分钟 • August 7th, 2025

从含有外泌体悬液的离心管开始,外泌体是基于脂质的细胞外纳米囊泡。

加入磷酸盐缓冲液(PBS)至试管中,以获得均匀的外泌体分散液。

吸出外泌体溶液,并使用膜过滤器过滤以去除残留污染物。

将此过滤后的外泌体悬液转移至新的离心管中。

向外泌体悬液中加入含有多巴胺(一种神经治疗剂)的溶液,随后加入表面活性剂皂苷。

在生理温度下孵育混合物,以增强外泌体膜的通透性。

皂苷可选择性地去除外泌体膜上的膜结合胆固醇,从而在外泌体脂双层中形成孔隙。

多巴胺通过这些孔扩散进入外泌体。

随着时间推移,外泌体膜中的脂质发生重分布,孔隙闭合,从而将多巴胺包裹在外泌体内部。

接下来,将混合溶液进行超速离心,以沉淀载有多巴胺的外泌体。

移除含有游离多巴胺和皂苷的上清液。

含有载有多巴胺的外泌体的沉淀物已准备好用于进一步研究。

向之前通过超速离心收集的外泌体悬浮液中加入 3 毫升 PBS,并使用 0.22 微米滤器过滤稀释后的悬浮液以实现无菌处理。

然后将 500 µL 的灭菌外泌体悬液转移至另一根离心管中。

接下来,依次向灭菌悬液中加入 500 微升浓度为 0.5 毫克/毫升的多巴胺溶液和皂苷。孵育后,对悬液进行超速离心。