经鼻移植人诱导性多能干细胞来源的小胶质细胞至小鼠脑内

取一只已喂食含抑制剂饮食的麻醉小鼠。

在脑组织中，该抑制剂可选择性地清除小胶质细胞。

将透明质酸酶溶液涂抹于两侧鼻孔。

将小鼠短暂置于仰卧位，以防止溶液流出。

透明质酸酶可分解鼻黏膜的细胞外基质，使细胞松散，从而增强组织渗透性。

将诱导多能干细胞来源的人小胶质细胞或iPSMG细胞悬液注入一个鼻孔。

将小鼠置于仰卧位，然后将悬液注入另一侧鼻孔。

重复给药数次。

iPSMG细胞穿透鼻黏膜，沿嗅觉通路到达脑部，从而绕过血脑屏障。

让小鼠恢复。

麻醉小鼠，并定期通过鼻内途径给予移植培养基。

培养基中的生长因子支持移植的iPSMG细胞在小鼠脑内的生长和存活。

为进行经鼻移植，需先用含有PLX的饲料喂养雄性小鼠七天。第七天结束时，停止给予含PLX饲料，改为正常饲料喂养。在经鼻移植iPSMG前一小时，使用10 µL移液器枪头，向每侧鼻孔内各滴加2.5 µL PBS配制的透明质酸酶，共两次，以增加鼻黏膜通透性。

在应用透明质酸酶后，将小鼠置于仰卧位。在iPSMG经鼻移植前10分钟，给予2.5 µL透明质酸酶。使用10 µL移液器吸头将2.5 µL细胞悬液注入小鼠一侧鼻孔。在向另一侧鼻孔给予细胞悬液前，将小鼠保持仰卧位5分钟。

将细胞悬液分四次给予，每只动物总注射体积为20微升。停止PLX喂养48小时后，在同一批小鼠上重复给予透明质酸酶和细胞悬液。对于细胞因子的给药，使用10微升移液器吸头将2.5微升移植培养基注入小鼠的一个鼻孔中。