在小鼠中诱导腓神经损伤以研究神经肌肉接头再生

将一只后肢脱毛的麻醉小鼠置于手术显微镜下。

在剃毛的腿部切开皮肤，然后切开结缔组织层以暴露下方的肌肉。

使用拉钩分离肌肉，以暴露腓总神经。

神经内含有运动神经元，其轴突末梢与肌纤维相连形成神经肌肉接头（NMJs）。

在膝关节处定位神经与腓肠肌肌腱的交汇位置。

用镊子夹住神经并施加压力以造成损伤。

半透明的损伤部位表明轴突受损，从而导致神经肌肉接头功能障碍。

确保神经的外层神经外膜完整，以引导轴突再生。

移除牵开器并重新对齐肌肉。缝合切口部位，并让小鼠恢复。

受损轴突发出的信号募集巨噬细胞以清除轴突碎片，这有助于轴突再生及神经肌肉接头的重新建立。

将小鼠置于手术板上，确认其对脚趾夹捏无反应。在固定装置内调整四肢位置，使目标后肢处于解剖学上的自然位置，膝关节轻微伸展，无内旋或外旋。

然后将动物转移至手术显微镜下，调节操作板，直至通过物镜可清晰观察到骨性膝关节以及胫前肌与腓肠肌之间的肌脊。使用手术刀和镊子，沿与腓总神经走向垂直的方向，在皮肤上做一个约三厘米长的切口。继续切开浅筋膜，暴露股二头肌和股外侧肌，随后在连接的深筋膜上做1至2厘米的切口，以分离肌肉组织。

接下来，使用机械牵开器将股二头肌向尾侧牵拉，以暴露腓总神经。沿神经向近端追踪，直至找到其与腓肠肌外侧头肌腱的交汇处。然后用精细镊子夹住神经，使镊尖与腓肠肌肌腱的外侧边界平行。持续施加集中压力5秒，以压榨损伤腓总神经。

将镊子垂直于纤维方向持握，用镊尖后方的部位夹住组织，并施加稳固而轻柔的压力，沿肌腱边缘对神经进行整齐、线性的压迫损伤。

通过手术显微镜目视检查神经，确认组织已完全压榨。损伤部位的神经将呈现半透明状。若神经已充分受损，则移除牵开器，并将肌肉复位至解剖位置。然后使用6-0丝线缝合线，以一至三针间断单纯缝合关闭切口，并将小鼠置于清洁笼盒内的加热垫上，持续监测直至其完全恢复。