累进比率响应小鼠可口的高脂肪和高糖食品

本报告详细说明来衡量高脂肪食物的小鼠的奖赏效应的协议，采用累进比例操作性条件反射的任务。

以下实验的目的是使用渐进式强化比率计划在食物驱动任务中训练和测试小鼠。这是通过首先将小鼠限制在 Ad Liam 食物摄入量的 60% 至 70% 以稳定降低体重 5% 至 10% 来实现的。为了增强对食物驱动的杠杆按压行为的获得，然后使用自动塑形程序训练小鼠以固定比例杠杆按压以获得高脂肪、高糖的食物奖励。

然后，Miser 训练以更复杂的强化时间表对食物做出反应，包括固定比率 5，最后是渐进比率任务，该任务为食物的奖励效果提供了可靠的衡量标准。接下来，在渐进比率方案中稳定表现后，这些小鼠要么剥夺食物 12 至 24 小时，要么腹膜内注射网状剂，以验证渐进比例强化方案中食物驱动行为的改变。该实验的结果表明，食物剥夺会增加食物动机行为，而 retic 激素瘦素的给药会降低高脂肪和高糖食物奖励的食物动机行为。

上层条件反射任务提供了一种有用的方法来评估不同刺激和行为的奖励和激励效果。渐进比率任务是一种经过充分验证的强化计划，已广泛用于评估滥用药物和自然奖励（如食物）的奖励效果，尽管更常用于红色研究 随着基因工程小鼠模型的不断壮大，渐进比率歌剧任务在小鼠中的应用变得越来越重要。特别是，在肥胖研究中使用小鼠模型，并认识到可口、热量丰富的食物的奖励作用显着导致暴饮暴食和肥胖，这强调了测量小鼠食物奖励的必要性。

在这里，我们解释和讨论了用于训练和测试小鼠以渐进比例进行肝脏压榨以获得可口的高脂肪、高糖食物的方法 在开始之前。该协议确保所有涉及使用动物的程序都已获得机构动物护理的批准。在使用委员会中，如果需要，建议在光暗循环的暗相中进行测试。

使小鼠适应反向光暗周期 7 到 10 天。此时，在这 10 天的适应期之后，小鼠可以随意获得标准的食物和水。小鼠单独饲养并通过提供 60% 至 70% 的自由食物摄入量来限制食物，直到它们达到自由摄食体重的 90% 至 95%。

这有助于获得每天对小鼠进行休假新闻响应称重。当体重减轻 5% 到 10% 时，调整分配的每日食物以稳定下半身体重，在第一次训练前三天剩余的训练期间，将家笼中的小鼠运送到测试室，然后一次将每只小鼠从笼子中取出一只， 并握住鼠标 2 到 3 分钟。处理后，将鼠标放回家笼，在训练开始前一天连续三天让小鼠适应房间和处理。

将 10 至 15 个高脂肪高糖颗粒放入家笼中，以防止食物的潜在影响。新恐惧症对作性能，这里使用了 20 毫克高脂肪、高糖、无尘的精确食品颗粒，其中含有 49% 的杀手牛脂肪。每个小鼠作室都位于一个带有通风风扇的隔音室内。

鼠标作室配备了两个超轻的可伸缩杠杆，位于食物容器的两侧。刺激灯位于每个杠杆的上方，笼子顶部有一盏室内灯。上诉分配器位于分庭外。

腔室通过智能控制接口柜连接到装有 Med PC four 软件的 PC 计算机。将小鼠引入作腔。初始训练范式包括一个固定比率的强化计划，其中单个杠杆按压将食物颗粒输送到容器中。

只有一个杠杆被指定为激活并触发食物奖励的交付。左右杠杆的分配在小鼠之间是平衡的。训练还需要一个成型程序，将压碎的食物颗粒放在杠杆上以增强杠杆的压制行为。

在这个初始训练期间，一个活跃的杠杆反应会触发食物奖励的交付，并且在杠杆按下和食物交付之间没有延迟。一旦小鼠学会了按压杠杆 5 秒钟，就会启动超时，在此期间额外的按压不会导致颗粒的输送。超时时间允许小鼠食用颗粒。

如有必要，在按下活动控制杆的超时时间后，可以使用更长的超时时间。再次，导致每个食物颗粒的固定比例 1 5 秒释放。暂停训练持续 1 小时或已交付 50 颗子丸时。

歌剧和训练持续 7 到 10 天，直到获得食物维持歌剧和反应小鼠对主动与非活跃杠杆表现出等于或大于 3 比 1 的区分力，并且每次获得等于或大于 20 个奖励。连续 3 个会话被视为已达到客户获取标准。在 7 到 10 天期间未达到获得标准的小鼠需要接受额外的 5 到 7 天的进一步训练。

当到第 5 个训练日没有进展时，将小鼠排除在测试之外。重要的是要记住，作性获得受损可能是某些药物和遗传干预的结果，因此应记录在案。在连续三个疗程获得等于或大于 20 个颗粒之后，时间表已增加到 FR 5 T oh 5 秒协议，其中五个主动的休假压力机触发食物颗粒的交付。

FR 5 T oh 5 秒时间表的训练持续大约三到五天，直到反应稳定。然后，大师按照强化的渐进比率时间表进行训练。PR 测试期间的响应比率表可以根据 Richardson 和 Roberts 计算，其中 R 等于已经获得的食物奖励数量加 1。

因此，获得食物奖励所需的响应数量遵循以下顺序：1、2、4、6、9、12、15、20、25、32、40、50、62、77、95 等。最终完成的比率是 break point。PR 会话在任何 10 分钟内最多持续 1 小时未按下控制杆。

导致会话终止。当在一小时的会话中获得的奖励数量至少连续三天偏差不超过 20% 以验证食物维持在 PR 任务中的作响应时，强化 PR 计划的表现被认为是稳定的，在已知调节食物奖励的作后断点响应被评估。一个相对容易进行的测试是食物剥夺，这会增加老鼠对食物的动机状态，从而增加断点。

首先在 ad liberton 喂养期间对小鼠进行 PR 任务测试，直到在最后一个基线日后的第二天达到稳定的基线性能。将食物从家笼中取出，然后在禁食开始后 12 至 24 小时在 PR 任务中测试小鼠，或者为了研究对断点阈值的相反影响，可以测试外周给药 antic 激素。瘦素 PR 检测是在 1 天 IP 注射 PBS 后进行，然后在第二天注射每公斤瘦素 5 毫克后进行。

素在 PR 测试前 1 小时注射，如图所示。禁食增加了食物的奖励效果 禁食 24 小时，在小鼠的渐进强化比率时间表上显着增加断点，如图所示。瘦素降低了小鼠的食物奖励，因为外周瘦素给药降低了断点反应阈值在尝试此程序时，重要的是要记住，通过定期训练和通过实施食物限制方案增加小鼠的动机状态，可以显着增强食物维持作反应的获取。

此外，确保小鼠在转向更复杂的计划之前在一个强化计划中表现出相对稳定的反应是最大限度地减少测试期间可变性能的关键。肥胖和肥胖相关疾病是一个日益严重的问题，这增加了识别相关分子和神经通路的紧迫性。渐进比率表是衡量神经生物学、遗传学或药理学作对食物奖励效果影响的宝贵工具。