人体胰腺的收集协议
May 23rd, 2012
该视频演示了加工成多种存储格式的人类胰腺的解剖过程。解剖方向，保持整个胰腺地区允许区域胰岛成分和密度的定义。
该程序的总体目标是以保持解剖方向的方式解剖人类胰腺。这是通过从胰腺中取出十二指肠和脾脏，然后从胰腺中清除多余的脂肪和血管来实现的。第二步是用蓝色墨水涂刷前表面，用黑色墨水涂刷后表面。
接下来，胰腺分为三个区域。然后将每个区域横向切成均匀的板条，并放置在石蜡盒、OCT 模具上，或进一步切碎并放入小瓶中。最终，从胰腺的所有三个区域收集样本，同时保持正确的解剖方向以供将来分析。
这种方法可以帮助解决 1 型糖尿病研究中的关键问题，例如 β 细胞质量或功能丧失的机制，以及免疫细胞攻击的性质。胰腺处理方法的视觉演示至关重要，因为保持胰腺的体内方向需要注意细节。演示该程序的是我实验室的组织技术专家 Linda Snyder 和生物科学家 Emily Montgomery。
首先准备该程序所需的所有材料。首先，用供体标识符、样品类型、等分试样编号和任何其他信息标记将容纳石蜡块的盒。接下来，以相同的方式标记 OCT 模具。
切下足够的铝箔片以包裹每个 OCT 块并将它们放在一边以备后用。准备储存新鲜和冷冻样品所需的所有样品瓶。稍后添加 RNA，并在适当时添加 RPMI 培养基。
接下来，准备工作区域，将解剖板、消毒器械和手术所需的所有其他用品放在生物安全罩和台面上。按使用顺序排列所有包埋盒和 OCT 模具。附近。通过添加足够的 isop 戊烷以覆盖聚苯乙烯泡沫塑料盒底部的干冰来创建一个冷冻浴。
要开始解剖，请切除十二指肠和脾脏。从一端开始分离十二指肠和胰腺，一直持续到完全分离。脾脏连接松散，很容易从脂肪和胰腺中取出。
接下来，使用钝器和锐器解剖的组合清洁胰腺中的外来脂肪血管和神经。将脂肪和淋巴结放在一边，以便稍后处理。清洁后，将胰腺放在铺有纸巾的解剖板上。
保持胰腺的正确方向是该程序最困难的一个方面。为了确保成功，前后表面涂有不同颜色的墨水。将棉签涂抹器蘸上蓝色墨水，将墨水涂抹在胰腺的前表面，吸干多余的部分。
接下来，将新的涂抹器蘸上黑色墨水，然后将其涂抹在胰腺的后表面。将胰腺恢复到正常方向。胰腺前表面朝上，现在可以将胰腺切成三部分。
首先，切开头部和身体之间的连接处。接下来，将剩余部分分成大致相等的部分，以分离身体和尾巴，记录胰腺每个区域的重量。从 head 部分开始。
通过横向切割将每个区域分成大约 0.5 厘米的部分，类似于切割一条面包。胰腺的每个区域切片后，去除头部区域的最后一部分，即头体连接部分，并将其放在单独的解剖板上。将此切片切成小块，并将碎片均匀地分给带 RNA 和不带 RNA 的标记冷冻管。
稍后，将样品瓶冷冻。遵循标准程序。对 body tail junction 部分重复此过程。
收集碎状样品后，将所有横向切片向右倾斜。将删除每个区域的交替部分。对于石蜡和 OCT 块，删除石蜡封闭的第一部分。
如果某个部分太大，请将其切成两半。将包埋盒标记为 A 和 B.如果工件仍然太大，则垂直于前一次切割切割每个部分，然后按顺时针方向标记包埋盒 A 到 D。如图所示，放置包埋盒，使标签位于左侧。
接下来，将纸巾放入盒中并盖上盖子。将盒转移到含有中性缓冲福尔金的容器中。在每个区域内按顺序对块进行编号，从 OCT 块的最中间部分开始。
将一层薄薄的 OCT 培养基倒入预先标记的模具中 在引入组织之前，用 OCT 培养基覆盖组织，并快速冷冻样品以备后用，返回到之前放置的组织中。通过修剪掉淋巴结包膜周围的脂肪和结缔组织来分离胰腺淋巴结。将淋巴结放入含有 DMEF 的无菌培养皿中，将大淋巴结切成不大于 0.5 厘米的块。
分离出胰腺淋巴结后，将组织分装在准备好的小瓶和透析盒之间进行进一步处理。完成淋巴结后，将脾脏切碎并以类似的方式储存。要处理十二指肠，请使用湿润的纱布垫将粘膜上的粘液擦干净，剪掉粘膜，然后将其切成几段。
如前所述分割粘膜样本。使用该程序，收集胰腺每个区域的代表性样品，如图所示。头部、身体和尾部区域的重量大致相等。
观看此视频后，您应该对如何将人胰腺加工成不同的样品类型有很好的了解，特别是保持方向的能力，以及如何将淋巴结与胰周脂肪分离。
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概述
此视频展示了一种解剖程序，用于将人体胰腺处理成多种储存格式，同时保持解剖学方向。该方法允许定义局部胰岛组成和密度。
关键研究组成部分
科学领域
- 神经科学
- 生物学
- 人体解剖学
背景
- 胰腺对代谢功能至关重要。
- 了解胰岛组成对糖尿病研究很重要。
- 保持解剖学方向对于准确分析至关重要。
- 解剖技术的有效性可能有所不同。
研究目的
- 解剖人体胰腺同时保持解剖结构。
- 便于从不同的胰腺区域收集样本。
- 为未来的胰岛组成和密度分析做准备。
使用的方法
- 从胰腺中移除十二指肠和脾脏。
- 清除胰腺中的多余脂肪和血管。
- 用墨水为前表面和后表面上色以便定向。
- 将胰腺分为三个区域并切成片。
主要结果
- 从所有三个胰腺区域成功收集样本。
- 整个程序中保持了解剖学方向。
- 该方法允许对胰岛组成进行详细分析。
- 利用多种储存格式用于未来研究。
结论
- 该解剖程序对于保持胰腺解剖结构是有效的。
- 这种方法可以增强胰岛的研究。
- 未来的研究可以在此技术的基础上进行代谢分析。
常见问题
Executive Industry Relevance
Standardized human pancreas dissection and sampling protocols are critical for generating reproducible, anatomically precise biospecimens that underpin diabetes and metabolic disease research. This protocol enables consistent regional sampling, supporting high-confidence target validation and mechanistic studies across discovery and translational pipelines. Enterprise-wide adoption of such standardized workflows reduces biological ambiguity and enhances cross-study comparability for portfolio decision-making.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables systematic interrogation of regional islet cell heterogeneity for mechanistic de-risking.
- Supports functional target validation by preserving anatomical context in biospecimens.
- Facilitates hypothesis-driven studies on beta cell loss and immune cell infiltration in type 1 diabetes.
Screening & Assay Development
- Provides validated, orientation-maintained tissue blocks for downstream histological and molecular assays.
- Ensures reproducibility and standardization in sample preparation for quantitative analysis.
- Enables scalable preparation of paraffin, OCT, and snap-frozen samples for multi-platform screening.
Translational & Preclinical Research
- Aligns biospecimen collection with disease-relevant anatomical regions for translational biomarker studies.
- Supports continuity from human tissue analysis to preclinical model validation.
- Reduces risk of sampling bias in studies linking human pathology to therapeutic hypotheses.
Pipeline & Workflow Integration
This protocol integrates at the interface of biospecimen acquisition and downstream molecular, cellular, and histological analyses, supporting workflows from early discovery through translational research.
- Discovery Biology: Enables robust hypothesis testing on islet cell composition and immune infiltration by region.
- Screening: Delivers reproducible, orientation-maintained samples for assay development and validation.
- Analytics: Supports quantitative comparison of regional differences in islet density and cell type distribution.
- Translational Research: Provides anatomically precise samples for biomarker alignment and preclinical model correlation.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable, standardized protocol for multi-study and multi-site biospecimen generation.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in diabetes research.
- Operational Value: Drives standardization, reproducibility, and scalability in human tissue processing.
- Strategic Value: Improves go/no-go decisions and capital efficiency by enabling high-quality, comparable datasets.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of diabetes and metabolic disease programs.
Implementation Considerations
- Requires expertise in anatomical dissection and biospecimen handling.
- Needs access to histology, cryopreservation, and molecular analysis infrastructure.
- Demands rigorous cross-team standardization for labeling, orientation, and sample tracking.
- Must be adaptable to variations in donor anatomy and tissue quality.
- Dependent on strict adherence to protocol to avoid loss of anatomical context.
