微血管和内皮功能的无创评估

这些操作的总体目标是通过毛细血管成像无创地观察微循环，并利用毛细血管结合体积描记法评估内皮功能。首先在受试者手臂上诱导缺血后反应性充血，随后采集图像以识别所有功能上灌注的毛细血管。

然后采用体积描记法，将一个应变计缠绕在受试者前臂上，记录前臂血流量的体积描记测量结果。最终可无创地获得结果，通过毛细血管直接成像显示毛细血管密度，并通过反应性充血后应变计体积描记法评估内皮功能。该技术相较于现有方法（如视频毛细血管成像和有创体积描记法）的主要优势在于成本较低且具有无创性。

协助我演示该操作的是恶心。Fache，我实验室的研究协调员。使用体视显微镜观察第三手指背侧皮肤的甲襞毛细血管，显微镜配备250瓦卤素光纤灯照明、3.2倍物镜，并连接一个四百万像素Spot Insight黑白数码相机和一台装有Spot成像软件的笔记本电脑。在完成至少10小时过夜禁食及20分钟静坐休息后，将受试者安置于温度受控的房间内，要求其将左手抬至心脏水平，以减少活动。

让患者将左手和前臂放在显微镜底部折叠的毯子上，并用第二条覆盖的毯子松松地盖住前臂和手，以检测静息状态下灌注的毛细血管。在三分钟内连续采集一系列基线显微照片。毛细血管密度定义为每平方毫米甲襞皮肤中的毛细血管数量，计算方法为：从四张对焦最清晰且运动伪影最少的图像中获得的测量值的平均值。

为了定量功能灌注的毛细血管，通过在左上臂充气一个阻断袖带至高于收缩压40毫米汞柱，持续10分钟，以诱导闭塞后反应性充血。释放动脉阻断后立即开始采集图像，持续一分钟，以识别所有功能灌注的毛细血管。在休息10分钟以定量最大毛细血管密度后，通过将上臂袖带充气至60毫米汞柱持续60秒，诱导静脉阻断。

松开袖带后，立即开始像之前一样采集图像。根据Sivertson的方法，通过前臂血流的无创体积描记法测量，在缺血后反应性充血前后评估内皮功能。在对侧手臂上使用自动血压袖带测量收缩压、舒张压和心率。

接下来，在受试者上臂放置一个上臂阻断袖带，并使用连接至可调节静脉输液架的吊带绷带，将手臂舒适地悬吊至心脏水平。在仰卧休息10分钟后，让受试者保持坐姿，将一个已拉伸至超过其静息长度10%的汞-橡胶应变计环绕绑在前臂上，位置位于肘窝下方5厘米处。将应变计连接至一个与多普勒记录仪相连的血浆接头，以阻断手部血流。在受试者手腕处放置一个儿科用袖带，并充气至200毫米汞柱。

然后将对侧上臂袖带充气至50毫米汞柱。放气1.5秒，随后迅速重新充气，再放气以诱导缺血后充血，从而引起最大血管扩张或前臂血流（FBF max）。立即使用应变仪在30秒内连续测量四次前臂血流量。

通过计算 FBF max 与 FBF base 的比值来估算血管扩张程度。将四个 FBF max 值的平均值除以四个 FBF base 值的平均值。计算最大血管扩张时的前臂血管阻力（FVR max），即平均动脉压（map）除以 FBF max。

此处展示了正常血压个体与高血压个体微血管形态的对比。左侧图显示了正常老年人皮肤中排列整齐、呈直线状的典型毛细血管网络。相比之下，右侧图则显示出毛细血管卷曲、萎缩且排列紊乱的模式。

反应性充血后毛细血管密度降低表明功能性毛细血管募集受损，因而提示功能性稀疏。观看本视频后，您应能够充分理解如何对微循环进行可视化观察，并无创评估内皮功能。