移植性动脉硬化的小鼠模型

以下实验的总体目标是将供体血管移植到受体小鼠的腹主动脉中。第一步是从供体小鼠中分离胸主动脉。接下来，在受体小鼠的腹主动脉上创建吻合位点。

随后将供体血管植入受体小鼠的腹主动脉。最终，可通过受体小鼠后肢完整的运动功能来评估移植是否成功。因此，该模型将有助于我们理解移植物动脉硬化的发病机制。

这在技术上具有挑战性，需要大量的练习，并且要求操作极为精准。因此，本操作将由陈博士演示，Louanne 担任助手。首先，确认供体小鼠麻醉深度是否合适。

麻醉后，将小鼠仰卧置于操作显微镜下的托盘上。暴露心脏后，用生理盐水灌流冲洗，再用碘伏和酒精反复擦拭胸部进行消毒。随后取出心脏和肺组织，以充分暴露胸主动脉全长。在视野中确认胸主动脉后，开始仔细将其从周围组织中分离出来。

当到达腰动脉分支时，用丝线在靠近主动脉处结扎后切断。从周围组织中游离后，完整切除整个胸主动脉。分离后，用含肝素的生理盐水冲洗供体主动脉，并将其保存在冰上的该溶液中，直至移植。

确保受体小鼠麻醉充分后，剃除其腹部前侧的毛发。用眼膏覆盖眼睛，并按之前所述方法清洁手术区域。准备就绪后，将小鼠仰卧置于操作显微镜下的托盘上。

从剑突至耻骨沿中线切开腹壁，然后使用拉钩将腹壁撑开，暴露腹腔。暴露后，用生理盐水浸湿的纱布包裹肠管，并将其向上推离腹腔。用更多生理盐水浸湿的纱布包裹腹腔其余区域，并以此将直肠牵拉至腹腔右侧。接下来，将生殖器官向下牵拉。

注意定期用生理盐水湿润暴露的组织。常规辨认位于肾血管近端、腹主动脉分叉远端的肾下腹主动脉，仔细分离，使其与下腔静脉分开。

识别并结扎、切断从该段主动脉发出的所有小分支。主动脉段隔离后，在其两端约相距五毫米处各放置一个血管夹。接下来，在两个血管夹之间横断腹主动脉，以创建吻合口部位。

使用锋利的显微剪刀从一端切口处切除一小段主动脉，以容纳供体主动脉移植物。用含肝素的生理盐水冲洗夹子之间的主动脉节段，以清除残留血液。在整个操作过程中，请记得定期用含肝素的生理盐水溶液灌洗两段主动脉样本。

接下来，横断供体主动脉的两侧，制备一段长度为 2.5 毫米的血管段移植物用于移植。将供体主动脉移植物就位，对齐近端和远端，以便进行连续缝合。首先在两端的三点和九点位置放置固定缝线。

接下来，在移植物两侧的三点和九点位置构建四个吻合口。首先，用三到四个连续缝合线连接切缘，并将连续缝合线与固定缝线以双重结扎法打结，形成间断缝合。然后，在每两个吻合口之间用三到四个缝线连接切缘。

缝线放置完毕后，松开远端钳夹，使血液逆向流入移植物。在三分钟内识别任何出血部位，并进行额外缝合。当达到满意的止血效果后，松开近端钳夹。

可通过观察到明显的搏动来确认移植物的通畅性。如果搏动减弱，应向血管内注射肝素以防止血栓形成。准备就绪后，将肠管还纳至腹腔内，并缝合肌肉层和皮肤层。

将受体小鼠放入温暖、洁净的笼子中，并监测1至2小时，直至意识恢复。恢复后评估小鼠的运动功能，并在术后第二天再次评估；若未观察到后肢功能障碍，则视为移植手术成功。术后4周获取动脉移植物进行组织学分析，结果显示，接受雄性供体移植物的雌性受体小鼠血管壁增厚。

然而，在雄性至雄性组中未观察到移植物动脉硬化。在此示例中，来自雄性供体的胸动脉被移植到干扰素γ基因敲除小鼠体内，随后在受体小鼠中诱导干扰素γ的表达。在采集样本之前。

几周后，对动脉移植物进行组织学分析显示，治疗组中未观察到移植物动脉硬化。现在您已了解如何进行此项手术。请继续练习。