平滑肌功能中分离出来的组织浴，应用药理学研究测量

该程序的总体目标是测量平滑肌张力。这是通过首先解剖和准备组织来完成的。第二步是将组织安装在隔离的组织浴中。

然后测试组织的活力并进行等长收缩测量。最终，分离的组织浴制剂用于测试受体功能、受体信号传导和平滑肌反应性。一般来说，这种技术的主要优点是系统的灵活性、取得结果的快速性以及保持整个组织的完整。

这种方法可以帮助回答关键问题 在任何使用药物干扰受体信号传导或平滑肌灵魂的领域，必须强调一些准备工作。通过打开循环加热水浴，将组织浴系统预热至 37 摄氏度至关重要。水必须在最低的倒钩连接处流入每个组件，并在最高的倒钩连接处流出。

每个组件都必须连接。力传感器应进行校准，并且必须在实验前至少 15 分钟通电，以使其温度达到平衡。接下来，在连接气体时检查是否有泄漏，然后对系统加压。

用溶液填充系统后，请务必灌注并去除任何气泡。还需要测试组织浴曝气器。良好的通气将有效地分布药物，但不会在实验前立即破坏组织。

解剖组织。麻醉大鼠后，用剪刀制造气胸。沿着胸腔底部的隔膜进行 Cuss。

然后从胸腔底部切开到胸骨，将组织一分为二。清理脊柱上方的器官以找到直接沿着脊柱的主动脉。现在切断与主动脉的所有连接，并在横膈膜水平处切割垂直于脊柱的主动脉。

接下来，轻轻握住主动脉并从脊柱解剖主动脉。从靠近脊柱的下横膈膜区域开始，向心脏方向工作。只是要小心，不要拉扯或拉扯主动脉组织，因为这可能会立即对它造成损害。

将主动脉放入含有 PSS 的解剖皿中。现在拿一根电线，做一个小的 90 度角。在一端，将金属丝的倾斜端固定在解剖皿的地基上。

然后小心地将导丝穿入主动脉腔，并将主动脉滑到导丝上。当可以看到金属丝的自由端时，轻轻弯曲它并将其推入粉底，从而稳定组织。现在使用小 Venus 剪刀和镊子，去除血管周围脂肪组织和其他外来组织，直到胸主动脉呈白色和一些纤维状。

清除多余的组织后，小心地从金属丝上去除干净的主动脉。通过将主动脉切成 3 到 5 毫米宽的环来完成此部分。臂距主动脉环。

准备两个带缝合线的组织钩，将其固定在桑拿房中。一个钩子应该有一个带有小打结环的缝合线，用于连接到杆上。另一个钩子需要一根 10 到 14 厘米长的缝合线。

打结时，小心地将一对这样的组织钩连接到每个主动脉环上。小心避免缠结钩子。接下来，将每个组织块转移到室温 PSS 培养皿中，并将组织支架固定在环形支架上。

接下来，将打结的环滑到杆的钉子上，并使用长缝合线将组织固定起来。然后将杆放入腔室并确保杆牢固。现在，将缝合线从剩余的钩子系到力传感器上。

在缝合线上留出足够的松弛度，以便可以通过千分尺调节力传感器和组织之间的张力。对每个腔室中的每个环重复此过程。现在，设置被动张力。

使用千分尺将张力增加到 2 克，然后等待组织上的张力停止增加。然后将张力再增加两克，再次等待张力的变化。完成。

张力现在应该在 3.2 克左右。在每个腔室中的每个环上重复此过程。设置所有被动张力后，让组织平衡一个小时。

在此期间，每 15 分钟更换一次 PSS 并为实验做其他准备，例如在平衡期结束时制备药物。最后一次清洗纸巾，保存数据并重新输入所有。然后按照文本协议中的详细信息，进行初始质询。

请务必在软件中记录这些作。在最初的挑战之后，张力变化将趋于稳定。然后洗掉攻击药物，使组织的张力达到基线。

让组织在这个基线音调下静置约 10 分钟，在这种情况下，在车辆上洗澡，在另一个上洗水。在浴中加入足够的哌唑星浓度为 5 纳摩尔。让组织浴孵育一小时，不要清洗。

同时，沿对数曲线修复较宽浓度范围内的酚氨酸。一小时后，向浴中加入浓度递增的苯基嘧啶激动剂，以产生累积浓度响应。每次添加后，等待组织对平台期的反应，然后再添加下一个浓度。

继续添加，直到它们不再改变组织的色调或直到整个响应曲线趋于稳定。相反，将胸主动脉在 alpha 1 肾上腺素能受体拮抗剂 POZ sim 中孵育 1 小时，然后将 α1 肾上腺素能激动剂苯基 rine 加入组织浴中，并生成苯基 rine 的最大收缩和一半最大收缩的累积收缩反应曲线。仅在载体上，对照组织标记为绿色。

半最大值标识药物的有效浓度。对 razin 处理过的组织进行的相同测量结果以黑色显示。看完这个视频，你应该对如何在离体组织浴中测量平滑肌功能有一个很好的了解。