October 22nd, 2015
在这里,我们提出了一种在雌性青少年小鼠中诱导基于活动的厌食症 (ABA) 的方案。ABA 是一种多动症,通过对可以使用跑轮的啮齿动物实施食物限制而诱发。这种现象被用作研究神经性厌食症潜在神经生物学的模型。
该程序的总体目标是在青春期雌性小鼠中诱导基于活动的厌食症。这是通过首先将小鼠引入跑轮并连续监测其跑轮活动至少三天来实现的。接下来,将 M 置于限制食物获取时间表上,并记录他们自愿轮式运行的变化。
最终,这种基于活动的厌食症模型可以表明,当动物限制获取食物时,神经生物学的变化与动物的行为变化有关。我希望这种基于活动的厌食症模型将有助于改善神经性厌食症的治疗,因为它将识别神经化学和神经解剖学中离散的个体差异,这些差异是神经性厌食症的恢复力和脆弱性的基础。虽然这种方法可以提供对神经性厌食症的见解,但它也可以应用于与焦虑共病的其他疾病。
一般来说,个体的细微差别,这种方法会很困难,因为每只动物对基于 AIA 的活动的脆弱性都是高度可变的。因此,需要密切监测动物的体重减轻、进食和活动,或者动物可以开始设置。将计算机和 USB 集线器放在动物房中,远离流水和人流,但在跑轮的发射器范围内。
此外,使用集线器上的开关为计算机和 USB 集线器使用备用电源。设置通道号以对应于它将监控的所有正在运行的轮子的通道号。现在启动 Running Wheel Manager 软件并确认软件识别每个发射器。
每个轮子都将在程序窗口中列出。在航向轮传感器下。该软件将自动为每个车轮提供一个 ID 号。
在轮子上记下这个数字可能会有所帮助。如果无法识别车轮,请更换车轮的电池。接下来,为每个小鼠受试者准备一个笼子,里面有床上用品、巢穴、自由饮水和跑轮。
跑轮必须自由移动,不得接触笼壁、食物篮或笼顶。此外,请确认软件正在更新车轮计数。为了适应动物,每只老鼠单独关在一个带有跑轮的笼子里,笼子里有大约 100 克的干粮和 50 克的湿粮。
在软件中。通过选择 开始采集 开始数据采集和存储。从 file (文件) 菜单中,选择数据将保存到的目录,直到停止。
该软件将每天在光照周期的暗相开始之前连续记录。称量动物、称量湿粮和干粮。如果干粮容器的含量低于 50 克,请重新装满干粮容器,并更换湿粮容器。
如果食物变干或被垫料弄脏,请同时手动记录轮数。为了备份食物限制第一天的数字数据,请在一天的轻度循环部分的中间从笼子中取出所有湿粮和干粮。稍后在黑暗时间开始时,记录动物的体重和轮数。
然后将大约 50 克干粮放入料斗中,并在一艘船上提供 5 克湿粮。接下来,为每只动物准备一个装有床上用品和巢穴的新笼子。两个小时后,食物转移、跑轮和几把脏床上用品到准备好的笼子里。
将小鼠转移到没有食物的新笼子中。在食物获取期结束时,记录 UNE 食物的重量和轮数。在实验期间每天重复此过程。
如果动物在任何时候下降到其初始体重的 75% 以下,请将其从实验中移除。其他过度饥饿的迹象表明应该将动物从实验中移出,包括驼背的姿势和无法在笼子里移动。动物可能摸起来很冷,并且在两个小时的进食时间内无法进食。
禁食三天后,结束实验。要么对动物实施安乐死以收获组织,要么让动物恢复。要在软件中进行进一步的行为测试,请单击文件菜单下的 End acquisition 选项。
数据现在保存在 WLS 文件中,位于实验开始时选择的目录中,从笼子中取出行走轮,然后取出电池。应该允许恢复中的动物进行,获得食物。现在,将数据导出到电子表格。
在文件菜单中选择导出选项,然后在源数据文件选项中选择所需的 WLS 文件。接下来,选择开始和结束日期和时间,最后选择要导出的每个车轮传感器。在车轮传感器列表中,可以根据需要分析数据以研究 b 的影响。
在与人类神经性厌食症相似的种群中,雌性青春期小鼠在 P 36 适应了轮子。青春期开始后不久,P 40 开始缺乏食物,它们的体重急剧下降,对照动物没有跑轮或食物限制。饥饿的动物在食物限制开始后过度奔跑。
对轮子活动的详细分析显示了昼夜节律模式。奇怪的是,即使在获取食物时,饥饿的动物也选择使用跑轮。禁食开始后,一些动物在喂食前表现出活动增加,这可能称为食物预期活动 如果执行得当,可以在几个小时内完成设置一个队列以进行基于活动的情景。
在尝试此过程时,请务必记住每天至少手动记录一次车轮计数。电源线的意外中断或电池耗尽可能会中断计算机生成的车轮计数 遵循此程序。可以进行其他方法,例如免疫细胞化学、电生理学和行为测试,以回答其他问题,例如基于活动的厌食症诱导如何影响大脑解剖结构、生物物理特性和行为。
本文介绍了一种在雌性青少年小鼠中诱导活动性厌食症(ABA)的协议,这是一种研究神经性厌食症神经生物学的模型。该协议涉及食物限制和跑步轮活动的监测,以观察行为变化。