电图同时记录和麻醉大鼠视觉诱发电位

该程序的总体目标是同时测量大鼠的视网膜电瘤和视觉诱发电位。这种方法可以帮助回答裂隙神经科学领域的关键问题。例如衰老或疾病的影响是否影响视觉通路中的某些组成部分。

该技术的主要优点是它允许全面评估视网膜功能及其对视觉诱发电生皮质功能的上游影响。要开始此过程，请通过切割 70 毫米长的银线并形成一个直径为 8 毫米的环来环绕大鼠眼睛，从而预先塑造定制的 ERG 非活性电极。准备一个均匀的圆圈，并通过在 1 毫米的管头尖端上塑造来调整回路的大小。

这很重要，因为太小的环可能会无意中提高关节内压，而过大的环会增加信号的可变性。接下来，通过切割 70 毫米长的银来预成型定制的 VEP 非活性电极。并形成一个直径为 8 毫米的椭圆，以钩住大鼠门牙。

然后，通过切割 30 毫米长的银丝并形成一个直径约 1 到 2 毫米的小环来预成型定制的 ERG 有源电极，用于轻轻接触大鼠角膜，同时对角膜的擦伤最小。然后，通过将银与裸露的内线缠绕在一起，将电极牢固地连接到电极引线上。用遮蔽胶带绝缘多余的裸露金属，以减少光伏伪影。

对于 ERG 有源电极，可以应用更多层的遮蔽胶带以实现更厚、更坚硬的包裹，以便更容易用微作器固定电极。在每个 ERG 非活性电极上，将一小块钩环紧固件粘在遮蔽胶带上，以便稳定地连接到啮齿动物颈带上。然后，对于每个 VEP 有源电极，将鳄鱼夹连接到电极引线的内线。

在记录之前，立即用氯化物电镀银线的裸露表面以改善信号传导。为此，请将阴极连接到电池的负极端子，并将另一端浸入盐水中。随后，将阳极线上的银头浸入生理盐水中，并将该电极丝的另一端连接到九伏电池的正极端子。

20 秒后断开它们，电极丝的银色尖端应均匀涂上白色。对所有银 ERG 和 VEP 电极重复氯化程序。在此过程中，用 10% 聚维酮碘对麻醉动物的剃须区域消毒 3 次。

用手术刀沿头部中线做矢状切口，切开直径为 20 毫米的真皮组织圈，露出颅骨。接下来，通过刮擦并用纱布干燥来去除下面的骨膜，以露出冠状和矢状颅缝合线。在两个半球的头骨上钻两个孔。

将不锈钢螺钉拧入两个预制孔中，深度可达 1 毫米，以实现牢固的锚固。然后，通过用纱布擦干颅骨并用两条缝合线缩回皮肤，为牙科汞合金准备手术区域。随后，将牙科汞合金涂抹在暴露的颅骨上，以将螺钉电极固定到位，并确保暴露约 1.5 毫米的螺钉以进行记录。

之后，取下回缩缝合线。对于暗视记录，所有程序都在暗室中进行。为了便于说明，电极定位是在正常的室内照明下进行的。

该动物在 12 小时前适应深色，并用氯胺酮和甲苯噻嗪麻醉。瞳孔散大和局部麻醉后，将非活性的 VEP 电极钩在下切牙周围。然后，将动物放在位于法拉第笼中的 Ganzfeld 碗前面的 ERG 平台上。

用一条钩环紧固件将动物固定在平台上，但不要紧紧地放在颈背上。接下来，通过在眼睛赤道周围无创地环绕 sclaral 环来定位 ERG 非活性电极。在角膜缘后方约 3 米处。

通过将电极连接到颈背周围的钩环紧固件条来稳定这一点。对对侧眼重复该过程。现在，通过将鳄鱼夹连接到预先植入颅骨的不锈钢螺钉上来固定 VEP 有源电极。

在放置 ERG 活性电极之前，在电极上滴一小滴 1% 羧甲基纤维素钠以提高信号质量。使用连接到定制立体定位臂的微型纵器，将 ERG 有源电极定位为轻轻接触中央角膜表面。擦去多余的液体，确保羧甲基纤维素钠仅接触角膜，而不接触 sclara。

然后将 2 到 5 毫米的不锈钢接地针电极皮下插入尾部。将平台滑近 Ganzfeld 碗，并确保动物的眼睛与碗的开口对齐，以实现两个视网膜的均匀照明。随后，关闭法拉第笼以减少外来噪音。

使用上述协议，可以记录一堆 ERG 波形以响应一系列刺激，最暗的闪光显示在底部，最亮的闪光显示在顶部。在非常昏暗的光线水平下，可以记录暗视阈值响应。随着刺激亮度的增加，波形由 B 波主导，然后负向 A 波出现在最亮的刺激处。

杆状感光器功能可以通过使用 P3 模拟 A 波来表示。该图显示 P2 振幅随着刺激能量的增加而增加。杆双极细胞功能可以通过用 naka rushtin 函数对杆 P2 的强度响应理论进行建模来表示。

视网膜神经节细胞功能在昏暗的发光能量下被描述，并通过 pSTR 峰值振幅和时间进行量化。通过成对的 flash paradime 引发锥体双极细胞功能，并通过锥体 P2 峰值振幅和时间进行量化。VEP 的振幅分析被视为营养元的峰值和营养元到峰值的振幅，这给出了这些响应的时间。

VEP 波的振幅随着刺激能量的增加而增加。掌握后，这项技术可以在大约 30 到 45 分钟内完成，不包括准备电极和放置电极和 adakadaptation 的时间。在尝试此过程时，特别重要的是要注意电极放置的精度并留出足够的时间进行 adak 适应。

在此程序之后，可以执行其他程序，例如疾病缓解或治疗来回答特定问题。观看此视频后，您应该对如何准备和放置电极以及如何记录和分析 ERG 和 VEP 波形有很好的了解。