2017年10月22日
本文采用套筒技术对小鼠原位主动脉移植模型进行了研究。它是一种非常快速的吻合方法, 可用于血管疾病的研究。
在这个过程中,供体的主动脉被放置在端坐位置,并在饲管中进行浅表咬合。通过面罩用 1.5 体积百分比异氟醚和 100% 氧气的混合物麻醉小鼠。将鼠标仰卧放在平台上,并将所有腿用胶带固定在手术台上。
将眼药膏涂抹在眼睛上,以防止手术过程中出现干燥。检查反射,捏住后脚以确保老鼠被充分麻醉。去除腹部的所有毛发。
涂抹脱毛膏或使用剃须刀。在无菌条件下进行作。对腹部进行消毒。
要移除供体主动脉,请做一个腹部中线切口,然后手动将肠道向右缩回。使用无粉手套轻轻地手动将肠道反射到一侧。将肠道放在一块用生理盐水湿润的纱布上,以保持湿润。
使用镊子钝器非常小心地从周围组织中解剖出腹主动脉。用镊子解剖肾动脉和腔静脉分叉之间的主动脉段。使用 11-0 单丝单缝合线固定该段的所有小分支。
在切除主动脉之前,将 0.5 毫升含有 50 单位肝素的盐水溶液注入下腔静脉。让供体动物在主动脉段被切除之前放血。用生理盐水彻底冲洗嫁接物,然后立即将其放入装有冰冷盐水的容器中。
为了准备受体,通过面罩麻醉动物,去除毛发,如上所述进行消毒,然后用手术刀从剑突到骨盆做一个中线切口。用牵开器缩回腹壁。用盐水溶液湿润的纱布包裹肠道,然后非常轻柔地将它们移到动物的右侧。
用镊子解剖近端肾动脉和远端分叉之间的肾下主动脉。使用 11-0 单丝单缝合线固定该段的所有小分支。通过 6-0 单丝缝合线夹住主动脉的近端和远端部分。
将夹子中间的主动脉分开,并用肝素化盐水冲洗切割端以冲洗管腔。将移植物置于端坐位置。使用套筒技术进行吻合,缝合线使用 11-0 单丝。
使用这种方法,将饲喂容器的末端放入接收容器中。将肾下受体主动脉的末端置于供体主动脉的近端。以相同的方式进行远端吻合术。
将供体主动脉的远端置于受体主动脉的远端内。通过确保供主动脉和受体主动脉的完美对齐,注意避免主动脉的任何扭转。夹具松开的那一刻是手术中非常重要的步骤,必须非常小心地执行。
检查吻合口是否正常后,松开夹子。首先轻轻松开远端夹,然后松开近端夹。这样,在释放高压侧之前,有低压将壁固定在一起。
立即灌注移植物,并可见脉搏。轻轻去除真丝的残留物。将腹内容物放回腹腔,并使用正在运行的 3-0 聚乙醇酸缝合线闭合伤口。
在终止麻醉之前,向小鼠施用每公斤 0.05 毫克丁丙诺啡。我们介绍了移植物移植物 6 周的尸检图片及其超声三维和 B 型视图的示例。图片显示了移植物的通畅性。
移植物显示管腔尺寸没有变化。此外,我们没有发现狭窄或动脉瘤形成。我们通过组织学和免疫组织化学染色未观察到移植主动脉中的任何显着病变。
细胞核用 DAPI 复染。总之,这种非常快速的吻合方法可用于研究基因工程小鼠的血管疾病。
本文介绍了一种在小鼠中采用套管技术的原位主动脉移植模型,该方法可实现快速吻合。此方法可用于血管疾病相关研究。
小鼠原位主动脉移植的套管技术可实现快速、可重复的血管移植,且失败率低,支持高通量的血管生物学研究。该模型有助于在临床前血管疾病研究中进行机制性风险排除和靶点验证,为评估基因和药物干预提供了一个可靠的平台。其操作简便性和可靠性使其在心血管研发的项目筛选和转化连续性中具有重要价值。
该小鼠主动脉移植模型融入了血管疾病研究从发现到临床前的连续过程,架起了机制研究与转化验证之间的桥梁。