Name: 核磁共振作为鱼油补充剂的血脂的快速评价一个强大的工具 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: 了解利用核磁共振波谱技术快速分析鱼油补充剂中脂质成分的方法。该技术无需分离纯化步骤即可同时定量检测多种脂肪酸及其位置分布，为营养学研究提供高效可靠的分析手段。

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本研究由俄亥俄州立大学食品与健康发现主题项目及俄亥俄州立大学食品科学与技术系资助。作者谨此感谢俄亥俄州立大学核磁共振中心和宾夕法尼亚州立大学核磁共振中心提供的支持。

1. NMR 样品制备
注意：请谨慎操作，使用前请查阅所有相关的材料安全数据表（MSDS）。样品制备中使用的氘代氯仿（CDCl3）具有毒性。进行样品制备时，请采取一切适当的安全措施，包括在通风橱中操作，并佩戴个人防护装备（护目镜、手套、实验服、长裤、封闭式鞋履）。
<ol>
	<li>1H 和 13C 样品的制备
	<ol>
		<li>使用注射器从膳食补充剂胶囊中提取 120 µL（约 110 mg）鱼油，并将其放入 4 mL 玻璃小瓶中。记录鱼油的重量。</li>
		<li>样品溶解
		<ol>
			<li>将约 120 µL 鱼油溶解于 500 µL 含 0.01% 四甲基硅烷（TMS）的 CDCl3 中，TMS 用作 1H 和 13C 化学位移的参考标准。 
			注：TMS 仅用于化学位移校准（见步骤 2.2.1.2.7 和 2.2.2.2.7），不用于定量分析（见步骤 2.2.1.3 和 2.2.2.3）。</li>
			<li>若需以 mg/g 表示定量结果，则通过将约 220 mg 2,6-二-叔-丁基-4-甲基苯酚（BHT）和 15 mg 三（乙酰丙酮）铬(III)（Cr(acac)3）溶解于 20 mL 含 0.01% TMS 的 CDCl3 中，配制 BHT 储备液。取 500 µL 该储备液溶解 100 mg（± 10 mg）鱼油。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>溶解油样后（耗时数秒），将全部溶液直接转移至高品质 5 mm NMR 样品管中并盖上盖帽。样品制备后 24 小时内完成分析。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 核磁共振仪器准备
注意：请谨慎操作，注意核磁共振（NMR）仪器产生的强磁场可能会影响心脏起搏器、外科假体等医疗设备和植入物，以及信用卡、手表等电子物品，等等。若使用非屏蔽磁体进行分析时，需格外小心。本研究采用两台核磁共振仪采集1H 和 13C NMR 谱图：一台核磁共振波谱仪的 1H 和 13C 核工作频率分别为 850.23 MHz 和 213.81 MHz，配备三共振氦冷却反向（TCI）5 mm 探头；另一台核磁共振波谱仪的 1H 和 13C 核工作频率分别为 500.20 MHz 和 125.77 MHz，配备宽带检测（BBO）氮冷却 5 mm 探头。所有实验均在 25 ± 0.1 ºC 条件下进行，谱图数据采用标准的核磁共振数据采集与处理软件包进行处理（见材料列表）。
<ol>
	<li>核磁共振谱图采集前的准备工作 
	注意： 1氢和 1313C NMR 谱可以在不将样品从仪器中取出的情况下连续采集。
	<ol>
		<li>将核磁共振管插入旋转载样器涡轮中（见材料列表）。</li>
		<li>将转子和试管置于分级深度规的顶部，轻轻按压试管顶端，直至其底部接触深度规的底部。</li>
		<li>将核磁共振样品放入样品架的空位中，并记录样品所在的插槽编号。</li>
		<li>在 NMR 中加载样品时，返回控制计算机并输入“sx #”，其中 # 是样品架中放置样品的槽位编号。</li>
		<li>等待 CDCl 的氘信号3 在锁屏窗口中显示。如果未自动出现，请手动输入 &#34;锁定显示&#34;一旦氘信号可见，输入 &#34;锁定&#34; 在命令行中并选择 &#34;CDCl₃3&#34; 从溶剂列表中选择，以使用 CDCl 锁定样品3 氘核共振。 
		注意：如果前一位用户使用了不同的溶剂，氘信号可能不会出现。用户应等待样品下降指示，然后进行锁场。</li>
		<li>类型 &#34;bsmsdisp&#34; 在命令行中输入以确保旋转未激活。如果 &#34;SPIN&#34; 按钮为绿色，点击以停止旋转。</li>
		<li>输入 &#34;新&#34; 创建新数据集的命令。在 &#34;名称&#34; 标签和实验编号在 &#34;实验编号&#34; 表。使用数字 &#34;1&#34; 在 &#34;PROCNO&#34; 表。在 &#34;实验&#34; 标签，点击 &#34;选择&#34; 并选择 &#34;质子&#34; 参数文件。在实验标题处填写实验名称 &#34;标题&#34; 点击标签页 &#34;好的。&#34;</li>
		<li>类型 &#34;getprosol&#34; 在命令行中输入以获取当前 NMR 探头和溶剂的标准参数。</li>
		<li>重复步骤 2.1.7 13C，选择 &#34;C13IG&#34; 脉冲序列在 &#34;实验&#34; 1D谱的标签 13C反向门控去耦实验。</li>
		<li>类型 &#34;getprosol&#34; 在命令行中输入以获取当前 NMR 探头和溶剂的标准参数。</li>
		<li>输入命令 &#34;atma&#34; 对探头进行碳核和质子核的自动调谐与匹配。</li>
		<li>执行一维梯度匀场，以获得高度均匀的磁场，从而实现核磁共振信号的最佳线型。
		<ol>
			<li>使用标准的自动一维匀场程序，只需按顺序执行命令即可 &#34;qu topshim 1dfast ss&#34;, &#34;qu topshim tuneb ss,&#34; 和 &#34;qu topshim 报告&#34; 在命令行中。</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>参数优化
	<ol>
		<li>90&#176; 脉冲校准
		<ol>
			<li>创建一个新的数据集 1H（见步骤 2.1.7 和 2.1.8）。</li>
			<li>输入命令 &#34;paropt&#34; 在命令行中输入以启动用于校准90的自动化程序&#176; 脉冲。选择脉冲持续时间 p1 作为待调整的参数。</li>
			<li>从 &#34;2&#34; &#181;将 p1 的初始值输入为 &#34;2&#34; &#181;s 增量并执行 &#34;16&#34; 实验</li>
			<li>创建一个新的数据集 13C（参见步骤 2.1.9），并重复该过程 13C核（见步骤2.2.1.2和2.2.1.3）。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>T1 采用零点法测量的测量值16 用于 1H 
		注意：该空方法采用反转恢复脉冲序列，包含一个180°脉冲&#176; 脉冲后接一个延迟（tau），以允许z轴方向的弛豫，以及最终的90&#176; 产生可观测的横向磁化强度的脉冲。
		<ol>
			<li>创建一个新的数据集 1H（见步骤 2.1.7 和 2.1.8）。</li>
			<li>类型 &#34;pulprog t1ir1d&#34; 将脉冲序列更改为反转恢复实验。</li>
			<li>在命令行中输入以下命令，以设置谱宽（ppm）、射频发射器中心频率、扫描次数、预扫描次数以及数据点数 &#34;8&#34;, &#34;o1p 3.8&#34;, &#34;ns 2&#34;, &#34;ds 2&#34; 和 &#34;td 64K&#34;.</li>
			<li>类型 &#34;p1（值）&#34; 并输入90的持续时间值&#176; 由脉冲校准（参见步骤 2.2.1）确定的脉冲并输入类型 &#34;p2（值）&#34; 对于 180&#176; 脉冲（180°脉冲的持续时间值）&#176; 脉冲为90&#176; 脉冲持续时间乘以二）</li>
			<li>将循环延迟设置为一个非常大的值，例如通过输入 10 s &#34;d1 10&#34;.</li>
			<li>设置 tau 将数值设为较短的值，例如 10 ms，通过输入 &#34;d7 10毫秒&#34; 在命令行中。</li>
			<li>使用命令将接收增益（RG）设置为适当值 &#34;rga&#34; 用于RG的自动计算。</li>
			<li>输入命令以运行谱图 &#34;zg&#34;.</li>
			<li>输入傅里叶变换命令以执行 &#34;efp&#34; 在命令行中。</li>
			<li>输入命令以执行自动相位校正 &#34;apk&#34; 在命令行中。如果需要额外的相位调整以进一步改善谱图，请点击 &#34;步骤标签，&#34; 然后点击 &#34;调整相位&#34; 进入相位校正模式的图标。
			<ol>
				<li>使用零级（0）和一级（1）相位校正图标，通过拖动鼠标使所有信号均处于负吸收模式。单击以应用并保存相位校正参数 &#34;返回并保存&#34; 退出相位校正模式的按钮。</li>
			</ol>
			</li>
			<li>增加 tau 直至所有峰均为正峰或通过重复步骤 2.2.2.6–2.2.2.9 使信号完全抵消。以确定 T1 值，只需将 tau 峰在 ln2 处被抵消的值。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>T1 采用零点法测量的测量值16 用于 13C
		<ol>
			<li>创建一个新的数据集 13C（参见步骤 2.1.9）</li>
			<li>类型 &#34;pulprog t1irpg&#34; 将脉冲序列更改为碳核的反转恢复实验。</li>
			<li>在命令行中输入以下命令，以设置谱宽（ppm）、射频发射器中心频率、扫描次数、预扫描次数以及数据点数： &#34;谱宽 200&#34;, &#34;o1p 98&#34;, &#34;ns 8&#34;, &#34;ds 2&#34;和 &#34;td 64K&#34;.</li>
			<li>类型 &#34;p1（值）&#34; 并输入90的持续时间值&#176; 由脉冲校准（见步骤 2.2.1）确定的脉冲并输入 &#34;p2（值）&#34; 对于180&#176; 脉冲（持续时间值为90）&#176; 脉冲持续时间乘以二）</li>
			<li>将循环延迟设置为一个非常大的值，例如通过输入 100 s &#34;d1 100&#34;.</li>
			<li>设置 tau 将数值设为较短的时间，例如通过输入100 ms &#34;d7 100ms&#34; 在命令行中。</li>
			<li>使用命令将接收增益（RG）设置为适当值 &#34;rga&#34; 用于RG的自动计算。</li>
			<li>输入命令以运行谱图 &#34;zg&#34;.</li>
			<li>输入以执行傅里叶变换 &#34;efp&#34; 在命令行中。</li>
			<li>通过输入命令执行自动相位校正 &#34;apk&#34; 在命令行中。如果需要额外的相位调整以进一步改善谱图，请点击 &#34;调节相位&#34; 零阶（0）和一阶（1）相位校正的图标以及相位校正图标。
			<ol>
				<li>单击零级和一级相位校正图标的同时，拖动鼠标直至所有信号均处于负吸收模式。通过单击 &#34;返回并保存&#34; 退出相位校正模式的按钮。</li>
			</ol>
			</li>
			<li>增加 tau 直至所有峰均为正峰或通过重复步骤 2.2.3.6–2.2.3.9 被抵消。以确定 T1 值，只需将 tau 峰在 ln2 处被抵消的值。</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>一维（1D）核磁共振谱
	<ol>
		<li>1氢核磁共振（1H NMR）谱
		<ol>
			<li>核磁共振数据的采集
			<ol>
				<li>前往 1第2.1.7步创建的H数据集，并使用标准 &#34;脉冲-采集&#34; 脉冲序列， &#34;zg&#34;，通过输入 &#34;脉冲程序 zg&#34; 在命令行中。</li>
				<li>在命令行中输入以下命令，以设置谱宽（ppm）、射频发射机中心频率、扫描次数、预扫描次数、数据点数以及90°脉冲的脉冲持续时间&#176; 脉冲角度： &#34;sw 8&#34;, &#34;o1p 3.8&#34;, &#34;ns 2&#34;, &#34;ds 2&#34;, &#34;td 64K&#34; 和 &#34;p1（通过脉冲校准确定）&#34; （参见步骤 2.2.1）. 
				注：500 MHz 仪器可使用 32K 数据点。</li>
				<li>为500 MHz仪器设置7秒的弛豫延迟，或为850 MHz仪器设置9秒的弛豫延迟，通过输入 &#34;d1 7s&#34; 或 &#34;d1 9s&#34;，分别在命令行中。</li>
				<li>使用命令将接收增益（RG）设置为适当值 &#34;rga&#34; 用于RG的自动计算。</li>
				<li>类型 &#34;digmod baseopt&#34; 以获得基线更佳的谱图。</li>
				<li>输入脉冲-采集命令以开始采集 &#34;zg&#34; 在命令行中。</li>
			</ol>
			</li>
			<li>核磁共振数据的处理
			<ol>
				<li>类型 &#34;64K&#34; 在命令行中应用零填充，并将实谱的大小设置为 64K。</li>
				<li>将线宽参数设置为 0.3 Hz，方法是输入 &#34;0.3 磅&#34; 在命令行中应用线宽因子为 0.3 Hz 的指数衰减加权函数，再进行傅里叶变换。</li>
				<li>通过输入执行傅里叶变换 &#34;efp&#34; 在命令行中。</li>
				<li>通过输入命令执行自动相位校正 &#34;apk&#34; 在命令行中。如果需要额外的相位调整以进一步改善谱图，请点击 &#34;步骤标签，&#34; 然后点击 &#34;调节相位&#34; 零阶（0）和一阶（1）相位校正的图标以及相位校正图标。
				<ol>
					<li>单击零阶和一阶相位校正图标的同时，拖动鼠标直至所有信号均处于正吸收模式。通过单击 &#34;返回并保存&#34; 退出相位校正模式的按钮。</li>
				</ol>
				</li>
				<li>输入命令以应用四次多项式函数进行积分时的基线校正 &#34;绝对值&#34;. 
				注意：这可确保光谱基线平坦且强度最低。</li>
				<li>以 TMS 为基准，报告化学位移（单位：ppm）&#948; = 0）。单击校准（&#34;校准轴&#34;）图标，将带红线的光标置于TMS NMR信号（最接近0的峰）上方，单击左键并输入 &#34;0&#34;.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>核磁共振数据解析
			<ol>
				<li>积分谱图中以下区域： &#948; 1.1 至 &#948; 0.6 以及在 &#948; 4.98, &#948; 5.05 和 &#948; 5.81 使用 &#34;积分&#34; 图标（位于下方 &#34;流程&#34; 标签）和高亮（&#34;定义新区域&#34;) 图标。左键单击并拖动以选中积分区域。 
				注意：如果需要聚焦某个区域，可单击高亮图标以取消激活，然后按住鼠标左键并拖动以放大该区域。如需调整阈值强度，可使用鼠标中键。再次单击高亮图标以激活积分功能，然后移至下一个峰。
				<ol>
					<li>右键单击信号下方显示的积分值，选择将上述积分总和归一化为100 &#34;归一化积分总和&#34;. 输入数值 &#34;100&#34; 在方框中并点击 &#34;返回并保存&#34; 退出积分模式。</li>
				</ol>
				</li>
				<li>使用BHT作为内标时，对位于 &#948; 6.98，并将积分值设为每0.5 mL储备溶液中BHT的毫摩尔数。</li>
				<li>在可能的情况下，对目标峰（参见步骤 2.3.1.3.1）两侧各延伸 10 Hz 的范围进行积分。</li>
				<li>继续执行 13C-NMR 谱的采集与处理方式类似。</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
		<li>13碳-13核磁共振（13C NMR）谱
		<ol>
			<li>核磁共振数据的采集
			<ol>
				<li>前往 13C 数据集并使用反向门控去耦脉冲序列， &#34;zgig&#34; 通过输入 &#34;pulprog zgig&#34; 在命令行中。 
				注意：使用标准宽带去耦脉冲序列运行碳实验时，输入 &#34;pulprog zgpg&#34; 在命令行中。</li>
				<li>在命令行中输入以下命令，以设置谱宽（ppm）、射频发射器中心频率、扫描次数、预扫描次数、数据点数以及90°脉冲的脉冲持续时间&#176; 脉冲角度： &#34;sw 200&#34;, &#34;o1p 95&#34;, &#34;ns 16&#34; &#34;ds 2&#34;, &#34;td 64K&#34; 和 &#34;p1（通过脉冲校准确定）&#34; （参见步骤 2.2.1.4）</li>
				<li>为500 MHz仪器设置35秒的弛豫延迟，或为850 MHz仪器设置45秒的弛豫延迟，通过输入 &#34;d1 35s&#34; 或 &#34;d1 45秒&#34;，分别在命令行中设置。使用BHT时，500 MHz仪器的弛豫延迟应为50 s，850 MHz仪器的弛豫延迟应为60 s。</li>
				<li>使用命令将接收增益（RG）设置为适当值 &#34;rga&#34; 用于RG的自动计算。</li>
				<li>类型 &#34;digmod baseopt&#34; 在命令行中以获取基线改善的谱图。</li>
				<li>输入脉冲-采集命令以开始采集 &#34;zg&#34; 在命令行中。</li>
			</ol>
			</li>
			<li>核磁共振数据的处理
			<ol>
				<li>类型 &#34;si 64K&#34; 在命令行中应用零填充，并将实谱的大小设置为 64K。</li>
				<li>将线宽参数设置为 1.0 Hz，方法是输入 &#34;1.0 lb&#34; 在命令行中应用线宽因子为1.0 Hz的指数衰减加权函数，再进行傅里叶变换。</li>
				<li>通过输入执行傅里叶变换 &#34;efp&#34; 在命令行中。</li>
				<li>通过输入命令执行自动相位校正 &#34;apk&#34; 在命令行中。如果需要进一步调整相位以改善谱图，请点击 &#34;步骤标签，&#34; 然后点击 &#34;调节相位&#34; 零阶（0）和一阶（1）相位校正的图标以及相位校正图标。
				<ol>
					<li>单击零阶和一阶相位校正图标的同时，拖动鼠标直至所有信号均处于正吸收模式。通过单击 &#34;返回并保存&#34; 退出相位校正模式的按钮。 
					注意：对于在214 MHz拉莫尔频率（850 MHz仪器）下采集的碳谱，由于较大的离共振效应，非专业用户在进行频率依赖性误差（一阶）校正时可能会面临挑战且耗时较长&#176; 脉冲</li>
				</ol>
				</li>
				<li>输入命令以应用四次多项式函数进行积分时的基线校正 &#34;绝对值&#34; 在命令行中。</li>
				<li>以 TMS 为基准，报告化学位移，单位为 ppm&#948; = 0）。单击校准（&#34;校准轴&#34;) 图标，将带红线的光标置于需参照的核磁共振信号上方，左键单击并输入 &#34;0&#34;.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>&#160;核磁共振数据解析
			<ol>
				<li>积分谱图中以下区域： &#948; 175 至 &#948; 171 使用 &#34;积分&#34; 图标（位于下方） &#34;流程&#34; 标签）和高亮（&#34;定义新区域&#34;) 图标。左键单击并拖动以选中积分区域。 
				注意：如果需要聚焦某个区域，请单击高亮图标以取消激活，然后按住鼠标左键并拖动以放大该区域。再次单击高亮图标以激活积分功能，然后移至下一个峰。
				<ol>
					<li>右键点击信号下方显示的积分值，将其设置为100 &#34;校准当前积分&#34;. 输入数值 &#34;100&#34; 在盒子中并单击 &#34;返回并保存&#34; 退出积分模式。</li>
				</ol>
				</li>
				<li>使用BHT作为内标时，对位于 &#948; 151.45，并将积分值设定为每0.5 mL储备溶液中BHT的毫摩尔数。</li>
				<li>从峰的每侧各延伸5 Hz，对目标峰进行积分（参见步骤2.3.2.3.1）。</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Simopoulos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+ratio+of+omega-6%2Fomega-3+essential+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids.</a> Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).</li>
<li>Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega+3+fatty+acids+on+platelet+composition+and+function+in+man%3A+a+prospective%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega 3 fatty acids on platelet composition and function in man: a prospective, controlled study.</a> Blood. 58 (5), 880-885 (1981).</li>
<li>Harper, C., Jacobsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+omega-3+fatty+acids+and+the+prevention+of+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of omega-3 fatty acids and the prevention of coronary heart disease.</a> Am. J. Cardiol. 96 (11), 1521-1529 (2005).</li>
<li>Kremer, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-dose+fish+oil+on+rheumatoid+arthritis+after+stopping+nonsteroidal+antiinflammatory+drugs.+Clinical+and+immune+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Effects of high-dose fish oil on rheumatoid arthritis after stopping nonsteroidal antiinflammatory drugs. Clinical and immune correlates.</a> Arthritis and Rheumatol. 38 (8), 1107-1114 (1995).</li>
<li>Malasanos, T., Stackpoole, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+omega-3+fatty+acids+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Biological effects of omega-3 fatty acids in diabetes mellitus.</a> Diabetes Care. 14, 1160-1179 (1991).</li>
<li>Han, Y., Wen, Q., Chen, Z., Li, P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1876610211019503">Review of Methods Used for Microalgal Lipid-Content Analysis.</a> Energ. Procedia. 12, 944-950 (2011).</li>
<li>Guillén, M., Ruiz, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.200300799/abstract">1H nuclear magnetic resonance as a fast tool for determining the composition of acyl chains in acylglycerol mixtures.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 105, 502-507 (2003).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, I., Aubourg, S. P., Addeo, F., Paolillo, L. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/237943502_Proton_Nuclear_Magnetic_Resonance_Rapid_and_Structure-Specific_Determination_of_o-3_Polyunsaturated_Fatty_Acids_in_Fish_Lipids">Proton nuclear magnetic resonance rapid and structure specific determination of ω-3 polyunsaturated fatty acids in fish lipids.</a> J. Am Oil Chem Soc. 70, 225-228 (1993).</li>
<li>Igarashi, T., Aursand, M., Hirata, Y., Gribbestad, I. S., Wada, S., Nonaka, M. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/226798699_Nondestructive_Quantitative_Acid_and_n-3_Fatty_Acids_in_Fish_Oils_by_High-Resolution_1H_Nuclear_Magnetic_Resonance_Spectroscopy">Nondestructive quantitative acid and n-3 fatty acids in fish oils by high-resolution 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 737-748 (2000).</li>
<li>Plans, M., Wenstrup, M., Saona, L. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-015-2666-8">Application of Infrared Spectroscopy for Characterization Dietary Omega-3 Oil Supplements.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 92, 957-966 (2015).</li>
<li>Jian-hua, C. I. A. <a target="_blank" href="http://pubs.sciepub.com/jfnr/2/2/1/">Near-infrared Spectrum Detection of Fish Oil DHA Content Based on Empirical Mode Decomposition and Independent Component Analysis.</a> J Food Nutr Res. 2 (2), 62-68 (2014).</li>
<li>Millen, A. E., Dodd, K. W., Subar, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+vitamin%2C+mineral%2C+nonvitamin%2C+and+nonmineral+supplements+in+the+United+States%3A+The+1987%2C+1992%2C+and+2000+National+Health+Interview+Survey+results%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Am.+Diet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Use of vitamin, mineral, nonvitamin, and nonmineral supplements in the United States: The 1987, 1992, and 2000 National Health Interview Survey results.</a> J. of Am. Diet Assoc. 104 (6), 942-950 (2004).</li>
<li>Dwyer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+developing+analytical+and+label-based+dietary+supplement+databases+at+the+NIH+office+of+dietary+supplements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Compos.+Anal%22%5BJournal%5D)">Progress in developing analytical and label-based dietary supplement databases at the NIH office of dietary supplements.</a> J. Food Compos. Anal. 21, S83-S93 (2008).</li>
<li>Monakhova, Y. B., Ruge, I., Kuballa, T., Lerch, C., Lachenmeier, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+coenzyme+Q10+in+food+supplements+using+1H+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Vitam.+Nutr.+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of coenzyme Q10 in food supplements using 1H NMR spectroscopy.</a> Int. J. Vitam. Nutr. Res. 83 (1), 67-72 (2013).</li>
<li>Monakhova, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardless+1H+NMR+determination+of+pharmacologically+active+substances+in+dietary+supplements+and+medicines+that+have+been+illegally+traded+over+the+internet%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Test.+Anal%22%5BJournal%5D)">Standardless 1H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the internet.</a> Drug Test. Anal. 5 (6), 400-411 (2013).</li>
<li>Berger, S., Braun, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerger%2C+S+%22200+and+more+NMR+experiments%3A+a+practical+course%22">200 and more NMR experiments: a practical course</a>. , Wiley-VCH. Weinheim. (2004).</li>
<li>Knothe, G., Kenar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+fatty+acid+profile+by+1H-NMRspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Lipid+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of the fatty acid profile by 1H-NMRspectroscopy.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 106, 88-96 (2004).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, J. I., Aubourg, S. P., Paolillo, I. G. L., Addeo, F. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00032a016">Quantitative High-Resolution 13C NMR Analysis of Lipids Extracted from the White Muscle of Atlantic Tuna (Thunnus alalunga).</a> J. Agric. Food Chem. 41 (8), 1247-1253 (1993).</li>
<li>Dais, P., Misiak, M., Hatzakis, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/277335832_Analysis_of_marine_dietary_supplements_using_NMR_spectroscopy">Analysis of marine dietary supplements using NMR spectroscopy.</a> Anal. Methods. 7 (12), 5226-5238 (2015).</li>
<li>Pickova, J., Dutta, P. C. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-003-0809-7">Cholesterol Oxidation in Some Processed Fish Products.</a> J. Anal. Oil Chem. Soc. 80 (10), 993-996 (2003).</li>
<li>Siddiqui, N., Sim, J., Silwood, C. J. L., Toms, H., Iles, R. A., Grootveld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicomponent+analysis+of+encapsulated+marine+oil+supplements+using+high-resolution+1H+and+13C+NMR+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Lipid+Rsrch%22%5BJournal%5D)">Multicomponent analysis of encapsulated marine oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR techniques.</a> J. of Lipid Rsrch. 44 (12), 2406-2427 (2003).</li>
<li>Sua´rez, E. R., Mugford, P. F., Rolle, A. J., Burton, I. W., Walter, J. A., Kralovec, J. A. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-010-1638-2">13C-NMR Regioisomeric Analysis of EPA and DHA in Fish Oil Derived Triacylglycerol Concentrates.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 87, 1425-1433 (2010).</li>
<li>Youlin, X. A., Moran, S., Nikonowiczband, E. P., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Z-restored+spin-echo+13C+1D+spectrum+of+straight+baseline+free+of+hump%2C+dip+and+roll%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Chem%22%5BJournal%5D)">Z-restored spin-echo 13C 1D spectrum of straight baseline free of hump, dip and roll.</a> Magn. Reson. Chem. 46, 432-435 (2008).</li>
<li>Tengku-Rozaina, T. M., Birch, E. J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.201300357/abstract">Positional distribution of fatty acids on hoki and tuna oil triglycerides by pancreatic lipase and 13C NMR analysis.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 116 (3), 272-281 (2014).</li>
<li>Berry, S. E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triacylglycerol+structure+and+interesterification+of+palmitic+and+stearic+acid-rich+fats%3AAn+overview+and+implications+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Triacylglycerol structure and interesterification of palmitic and stearic acid-rich fats:An overview and implications for cardiovascular disease.</a> Nutr. Res. Rev. 22 (1), 3-17 (2009).</li>
<li>Hunter, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+effects+of+dietary+fatty+acids+as+related+to+their+position+on+triglycerides%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Studies on effects of dietary fatty acids as related to their position on triglycerides.</a> Lipids. 36, 655-668 (2001).</li>
<li>Vlahov, G. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1097-458X(199805)36:5%3C359::AID-OMR274%3E3.0.CO;2-Z/abstract">Regiospecific analysis of natural mixtures of triglycerides using quantitative 13C nuclear magnetic resonance of acyl chain carbonyl carbons.</a> Magnetic Res. in Chem. 36, 359-362 (1998).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

修改与故障排除策略
谱图质量核磁共振信号的线宽以及核磁共振谱图的分辨率在很大程度上依赖于匀场，匀场是优化磁场均匀性的过程。对于常规分析，一维匀场已足够，无需进行三维匀场，前提是该操作由核磁共振专业人员定期执行。若未满足此条件，则需在分析前使用含有0.6 mL H的样品进行三维匀场。2O:D2O (90:10)。为了实现更好且更快的匀场，需使用分级深度规将样品置于射频（RF）线圈的激发/检测区域中心位置，然后再将其放入磁体孔腔中。影响匀场的另一个因素是将样品以10–20 Hz的转速旋转。尽管在此转速下旋转样品可改善径向匀场（X、Y、XY、XZ、YZ、X2-γ2, 等等。），通常不建议使用，以避免出现一级或更高阶的旋转边带。然而，当使用拉莫尔频率低于400 MHz的仪器进行一维核磁共振实验时，建议采用旋转。
分辨率和灵敏度均受接收增益（rg）值的影响。接收增益值过低会降低灵敏度，而过高的值则会导致模...

饮食中摄入 n-3 脂肪酸已被证实对多种疾病具有防治作用，例如心脏疾病1,2,3、炎症性疾病4 和糖尿病5。n-3 脂肪酸在西方饮食中含量较低，因此建议通过鱼油补充剂来改善消费者膳食中 n-6/n-3 脂肪酸的比例1。尽管近年来鱼油补充剂的消费量显著增加，但部分产品的安全性、真实性及质量仍存在疑问。对鱼油补充剂进行快速而准确的成分分析，对于正确评估这些商品的质量并保障消费者安全至关重要。
评估鱼油补充剂最常用的方法是气相色谱法（GC）和红外光谱法（IR）。尽管这些方法具有很高的灵敏度，但存在若干缺点6。GC分析耗时较长（4–8小时），因为需要对各个化合物进行分离和衍生化处理7，且在分析过程中可能发生脂质氧化8,9。虽然红外光谱法可以实现定量分析，但通常需要采用偏最小二乘回归（PLSR）建立预测模型，尽管在某些情况下红外吸收峰可归属于单一化合物10。PLSR需要分析大量样品，从而延长了分析时间11。因此，人们日益关注开发新的分析方法，以实现对大量鱼油样品进行准确且快速的分析。美国国立卫生研究院（NIH）下属的膳食补充剂办公室（ODS）和食品药品监督管理局（FDA）已与官方分析化学家协会（AOAC）合作，共同推动这些新方法的开发12,13。
核磁共振（NMR）波谱法是用于筛查和评估膳食补充剂等多组分基质的最有前景的分析方法之一14,15。NMR波谱法具有多项优势：它是一种非破坏性且可定量的技术，几乎无需或仅需极少的样品前处理，并具有优异的准确性和重现性。此外，NMR波谱法是一种环境友好型方法，仅需使用少量溶剂。NMR波谱法的主要缺点是其灵敏度相对其他分析方法较低，但近年来仪器技术的进步，如更强的磁场、多种直径的低温探头、先进的数据处理方法以及多样化的脉冲序列和技术，已将灵敏度提高至纳摩尔（nM）级别。尽管NMR仪器成本较高，但核磁共振波谱仪寿命长且应用广泛，长期来看可降低单次分析的成本。本详细的视频实验方案旨在帮助该领域的新手避免在进行鱼油补充剂的1H和13C NMR波谱分析时可能遇到的问题。

<table><tbody><tr><td>Avance III 850 NMR 仪器</td><td>布鲁克</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avance III 500 NMR 仪器</td><td>布鲁克</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5 mm 探头</td><td>布鲁克</td><td></td><td>采用氦气冷却的反向（质子检测）核磁共振探头，具有三个独立通道&lt;sup&gt;1&lt;/sup&gt;H &lt;sup&gt;13&lt;/sup&gt;C, &lt;sup&gt;15&lt;/sup&gt;N)</td></tr><tr><td>BBO Prodigy 5 mm 探头</td><td>Bruker</td><td></td><td>氮冷却观测（X核检测）探头，具有两个通道；一个用于 &lt;sup&gt;1&lt;/sup&gt;氢和 &lt;sup&gt;19&lt;/sup&gt;F检测以及一个用于X核（覆盖从 &lt;sup&gt;15&lt;/sup&gt;N 到 &lt;sup&gt;31&lt;/sup&gt;P)</td></tr><tr><td>涡轮旋转器</td><td>布鲁克</td><td></td><td>NMR转子由聚合物材料制成，并配有橡胶O形圈，以确保NMR管牢固固定</td></tr><tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>氘代氯仿</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&amp;nbsp;865-49-6</td><td>99.8 原子% D，含有 0.03 TMS</td></tr><tr><td>2,6-二-&lt;em&gt;叔&lt;/em&gt;叔丁基-4-甲基苯酚</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&amp;nbsp;128-37-0</td><td>纯度 &gt;99%</td></tr><tr><td>鱼油样品</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>核磁共振管</td><td>新时代</td><td>NE-RG5-7</td><td>5毫米外径常规探头 &amp;ldquo;R&amp;rdquo; 系列 NMR 样品管</td></tr><tr><td>BSMS</td><td>布鲁克</td><td></td><td>Bruker 系统管理系统；控制系统设备</td></tr></tbody></table>

核磁共振波谱法作为快速评估鱼油补充剂脂质谱的可靠工具

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

西方饮食中n-3脂肪酸含量较低，因此建议服用鱼油补充剂以增加这些必需营养素的摄入。本研究的目的是利用两种不同核磁共振（NMR）仪器——500 MHz和850 MHz仪器，通过高分辨率1H和13C NMR波谱法，对封装的鱼油补充剂进行定性和定量分析。质子（1H）和碳（13C）NMR谱图均可用于鱼油补充剂主要成分的定量测定。鱼油补充剂中脂质的定量通过积分相关一维谱图中的适当NMR信号实现。尽管两种原子核及两种仪器在分辨率和灵敏度上存在差异，1H和13C NMR所得结果彼此之间具有良好一致性。1H NMR分析速度较13C NMR更快，其谱图可在1分钟内完成采集，而13C NMR分析则需10分钟至一小时。然而，13C NMR谱图信息更为丰富，可提供更多种类单个脂肪酸的定量数据，并可用于确定脂肪酸在甘油骨架上的位置分布。两种原子核均能在一次实验中提供定量信息，无需纯化或分离步骤。磁场强度主要影响1H NMR谱图，因其分辨率低于13C NMR，但即便是成本较低的NMR仪器，也可被食品工业和质量控制实验室高效地作为标准方法应用。

1H 和 13C NMR 谱图是使用两种市售鱼油补充剂的 NMR 仪器采集的，分别为 850 MHz 和 500 MHz 波谱仪。这些谱图可用于鱼油中组分的定量测定，例如二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA），以及其他化合物如 n-1 酰基链和营养学重要指标 n-6/n-3 比值。即使不使用内标物也可进行定量分析，但此时定量结果必须以相对摩尔百分比表示。当需要将数据表示为绝对值（mg/g）时，则必须使用内标物。NMR 获得的结果具有高度可重复性，13C NMR 分析的相对标准偏差（RSD）为 0.3% 至 2%，1H NMR 分析的 RSD 为 0.5% 至 2.5%，具体数值取决于所分析的脂质类型。1H NMR 的 RSD 略高，这通常是由于质子谱图信号拥挤，影响了分析准确性，特别是对于信噪比（S/N）较低的共振信号。850 MHz 与 500 MHz 仪器之间的结果一致性良好，RSD 范围为 1%...

本研究采用高分辨率1H和13C核磁共振（NMR）波谱法作为对封装鱼油补充剂进行定性和定量分析的快速且可靠的工具。

西方饮食中n-3脂肪酸含量较低，因此建议服用鱼油补充剂以增加这些必需营养素的摄入量。本研究的目的是利用两种不同核磁共振（NMR）仪器——500 MHz和850 MHz仪器，通过高分辨率的¹H和¹³C NMR波谱法对封装的鱼油补充剂进行定性和定量分析。¹H和¹³C核磁共振谱均可用于鱼油补充剂主要成分的定量测定。通过对相关一维谱图中适当NMR信号进行积分，可实现对鱼油补充剂中脂质的定量分析。尽管两种原子核及两种仪器在分辨率和灵敏度上存在差异，但¹H和¹³C NMR所得结果相互之间具有良好一致性。与¹³C NMR相比，¹H NMR分析速度更快，其谱图可在1分钟内完成采集，而¹³C NMR分析则需10分钟至一小时。然而，¹³C NMR谱图信息更为丰富，可提供更多种类单个脂肪酸的定量数据，并可用于确定脂肪酸在甘油骨架上的位置分布。两种核磁共振技术均能在一次实验中提供定量信息，无需进行纯化或分离步骤。磁场强度主要影响¹H NMR谱图，因其分辨率较¹³C NMR更低，但即便成本较低的NMR仪器也可被食品工业和质量控制实验室高效地作为标准方法应用。

本方法的总体目标是利用核磁共振波谱法测定鱼油补充剂的脂质谱。该方法可帮助回答脂质分析中的关键问题，例如鱼油补充剂中的脂质含量以及各种脂肪酸在甘油骨架上的位置分布。该技术的主要优势在于，无需经过分离和纯化步骤，即可在一次检测中快速、可靠地分析多种不同分子。为进行氢谱和碳谱核磁共振（NMR）分析，首先使用注射器从膳食胶囊中提取120微升（约110毫克）鱼油，并将其置于4 mL玻璃小瓶中。记录鱼油的重量。使用500微升BHT储备溶液溶解100毫克±10毫克的鱼油。溶解油样后，立即将全部溶液转移至一支高质量的5毫米核磁共振（NMR）样品管中，并盖上盖帽。样品制备后须在24小时内进行分析。将NMR样品管插入旋转涡轮中。将旋转器和试管置于分级深度规顶部，轻轻下压试管顶端，直至其底部接触深度规的底部。然后将核磁共振（NMR）试管放入样品盒中的空位，记录样品所放置的插槽编号。将样品装入核磁共振仪时，返回控制计算机并输入 SX-编号，其中编号为样品架中放置样品的槽位编号。等待氘代氯仿的氘信号出现在屏幕上。一旦看到氘信号，立即在命令行中输入 lock，并从溶剂列表中选择氘代氯仿，以利用其氘共振信号锁定样品。在命令行中输入 bsmsdisp，以确保旋转功能未激活。如果旋转按钮为绿色，请点击该按钮以关闭旋转。输入 new 命令以创建新的数据集，然后在名称选项卡中输入数据集名称，并在标有 EXPNO 的实验编号选项卡中输入实验编号。在标有“PROCNO”的流程编号选项卡中使用编号一。在“TITLE”选项卡中填写实验标题。在实验选项卡中，点击“Select”并选择 C13IG 参数文件。然后点击编辑器中的“设置选定项目”，并点击“确定”。在命令行中输入 getprosol 以获取当前核磁共振探头和溶剂的标准参数。接着输入命令 atma，对碳核和质子核自动进行探头调谐与匹配。随后，执行一维梯度匀场，以获得高度均匀的磁场，从而实现核磁共振信号的最佳谱线形状。为此，请在命令行中依次执行命令“qu topshim 1dfast ss”、“qu topshim tuneb ss”和“qu topshim report”，以使用标准自动程序完成一维匀场。按照文本方案中所述进行参数优化后，采集一维碳核磁共振（NMR）谱图。为此，请进入碳数据集，并在命令行中输入“pulprog zgig”，使用反门控去耦脉冲序列。在命令行中输入命令，设置光谱参数：nppm、射频发射器中心频率、扫描次数、伪扫描次数、数据点数，以及90度脉冲角度的脉冲持续时间。在命令行中输入“digmod baseopt”以获取基线更优的谱图。然后在命令行中输入“di 60s”为850兆赫仪器设置60秒的弛豫延迟。使用命令 rga 进行接收增益的自动计算，以设置适当的接收增益值。最后，在命令行中输入脉冲采集命令 zg 以开始采集。为处理数据，首先在命令行中输入 si 64K，以应用零填充并将实谱的尺寸设置为 64K。然后在命令行中输入“lb 1.0”，将线宽扩展参数设置为1.0赫兹，以在执行4ea变换前应用一个线宽扩展因子为1.0赫兹的等待函数。在命令行中输入“efp”以执行4ea变换。接下来，在命令行中输入命令“apk”进行自动相位校正。如果需要进一步调整相位以改善谱图，请点击“处理”选项卡，然后依次点击“调整相位”图标以及零阶和一阶相位校正图标。在点击零阶和一阶相位校正图标的同时，拖动鼠标，直到所有信号均处于正吸收模式。单击“返回并保存”按钮，应用并保存相位校正数值，以退出相位校正模式。在积分过程中，通过在命令行中输入命令 abs n 来应用四阶多项式函数进行基线校正。为报告相对于TMS的化学位移（单位为ppm），需放大TMS信号，然后单击校准图标，并将带红色线的光标置于待校准的NMR信号上方，此处为TMS信号。如需调整阈值强度，可使用鼠标中键。单击左侧并输入 0。使用 BHT 作为内标时，对化学位移 δ 151.45 处的峰进行积分，积分范围为该峰每侧各延伸五赫兹。然后将积分值等于0.5毫升储备溶液中BHT的微摩尔数。对目标峰进行积分，积分范围为峰两侧各延伸5赫兹。如果需要聚焦某一区域，可点击高亮图标以取消高亮。然后单击鼠标左键并拖动以放大该区域。再次单击高亮图标以激活积分功能，并移至下一个峰。单击鼠标左键并拖动光标穿过积分区域。单击“返回保存区域”按钮。此处显示的是羰基碳区域碳核磁共振（Carbon NMR）分析的代表性谱图。图中展示了EPA和DHA在sn-1,3位和sn-2位的核磁共振信号。这些信号可用于EPA和DHA的定量测定。图中显示的是质子核磁共振分析的代表性谱图，标出了可用于EPA和DHA测定的NMR信号。与碳核磁共振谱相比，质子核磁共振谱的谱带宽度较窄，因此谱分辨率较低。若操作得当，掌握该技术后可在不到30分钟内完成检测。该技术发展后，为脂质分析领域的研究人员提供了快速分析多种脂质组分的方法，这些组分常出现在多组分体系中，如膳食补充剂、植物油和生物燃料。观看本视频后，您应能够充分掌握如何应用质子和碳核磁共振（NMR）波谱法分析鱼油补充剂的脂质谱。请注意，核磁共振波谱仪产生的强磁场可能对心脏起搏器、外科植入假体以及信用卡、手表等电子设备造成严重危害。

nmr-spectroscopy-as-robust-tool-for-rapid-evaluation-lipid-profile

Research

科研

JoVE Journal

Chemistry

化学

核磁共振作为鱼油补充剂的血脂的快速评价一个强大的工具

本文介绍了一种从浮游微生物群落中提取代谢物的方法。通过将样品过滤至特制的滤膜上，实现整个群落的采样。经过冻干处理后，提取水溶性代谢物。该方法可将环境代谢组学应用于自然或实验性微生物群落的跨组学研究。...

利用核磁共振波谱法对低密度浮游群落环境代谢组学样品中代谢物的浓缩方法

本文描述了一种逐步定植方法，以进一步评估其对宿主肝脏代谢的影响。通过基于核磁共振（NMR）的代谢谱分析，无创监测微生物共代谢产物在尿液中的排泄情况，以评估定植过程；同时，通过对完整肝组织活检样本进行高分辨率魔角旋转（HR...

通过1H 核磁共振波谱法评估无菌小鼠在逐步定植过程中的肝脏代谢变化

本文描述了一种基于机械细胞破碎、溶剂法脂质提取、转酯化反应以及气相色谱对脂肪酸进行定性和定量分析的方法，用于测定微藻中的脂肪酸含量及组成。采用三棕榈酸甘油酯作为内标物，以校正提取过程中可能发生的损失以及转酯化反应不完全所造成的影响。...

微藻中脂肪酸含量与组成的分析

本文描述了一种利用尼罗红染色法测定藻类细胞中性脂质含量的简单方案。该技术省时高效，可作为传统基于重量法的脂质定量方法的替代方案，并专为生物工艺性能监测这一特定应用而设计。...

一种利用荧光法快速简便测定藻类细胞中中性脂质的方案

许多神经系统和全身性疾病会改变哺乳动物大脑的神经化学特性。通过脑组织粗提物，可高效获得特征性的脑代谢物谱。为此，采用高分辨率核磁共振波谱法，能够对代谢物浓度（代谢组学）进行详细的定量分析。...

利用组织提取物的高分辨率核磁共振波谱法对大鼠脑组织进行代谢组学分析

本方案描述了一种高通量方法，结合互补的分析技术和组学技术，最终实现对不同生态系统中天然有机质和微生物蛋白质组的全面配对表征。该方法可进行可靠的比较，有助于识别对描述温室气体产生及预测环境变化响应具有重要意义的代谢途径和转化过程。...

用于表征复杂天然有机质混合物的单通量互补高分辨率分析技术

本文介绍了一种模块化方案，用于神经系统疾病小鼠模型中的组织脂质组学和转录组学以及血浆脂质组学研究，重点针对与炎症和神经元活动相关的脂质、膜脂质、下游信使分子，以及编码脂质功能相关酶/受体的mRNA。文中概述了样本采集、样品处理、提取及定量分析的操作流程。...

神经疾病中的脂质组学与转录组学

受激拉曼散射（SRS）显微技术能够实现对特定化学基团的选择性、无标记成像，已被有效用于体内脂质分子的成像。本文简要介绍SRS显微技术的原理，并描述其在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis...

无需标记的脂质储存动态成像：利用受激拉曼散射显微镜对秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）的研究

本方案用于测定海水和生物样品中的脂质。滤液中的脂质采用氯仿提取，对于固体样品则使用氯仿与甲醇的混合溶液进行提取。脂质类别通过棒状薄层色谱结合火焰离子化检测进行测定，各类脂质含量之和即为总脂质含量。...

海洋样品中总脂质及脂质类别的测定

啮齿类动物组织的 shotgun 脂质组学

了解利用核磁共振波谱技术快速分析鱼油补充剂中脂质成分的方法。该技术无需分离纯化步骤即可同时定量检测多种脂肪酸及其位置分布，为营养学研究提供高效可靠的分析手段。

核磁共振波谱法作为快速评估鱼油补充剂脂质谱的可靠工具

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