非破坏性¹⁹F时域核磁共振技术测定含氟药物产品中氟含量的应用与方法

本低场氟-19时域核磁共振方法的总体目标是测定制剂中药物产品的平均含氟量。该技术是一种非破坏性方法，可用于制药行业中的药物研发与生产。该方法有助于回答药剂学领域在药物及药物制剂配方过程中的一些关键问题。

建议测定片剂和胶囊中药物的平均含量。该技术的主要优势在于，与高效液相色谱等传统方法相比，它具有非破坏性且测量速度更快，适用于测定药品中药物的平均含量。将用于校准的样品称重后加入合适的核磁共振管中，直至达到标记线，或约30毫米的高度。

将配制好的药品样品称重后放入合适的核磁共振管中，直至达到标记线或约30毫米高度。接着，将聚四氟乙烯标准样品放入一支25或26毫米的核磁共振管中。然后将核磁共振管插入磁体内的探头中。

将离心管静置平衡5到10分钟，然后将仪器调谐至f 19。在RINMR软件的命令菜单下选择自动o一。至少重复测量三次。

取o1参数的最后一个值。在RINMR软件中导航至命令菜单，选择auto p90，使用仪器内置的标准自动校准程序，通过标准聚四氟乙烯样品对f19的90度脉冲进行校准。为了获得更好的信噪比，将制备于25毫米核磁共振管中的API样品放入安装在磁体中的f19探头内，并使其平衡至少10分钟。

根据仪器手册中的说明，使用RINMR软件中的反转恢复标准实验，测量每种API样品的T1弛豫时间。测量弛豫时间时，在RINMR软件中进入序列菜单并选择加载，然后选择反转恢复脉冲序列并点击打开。

通过点击选项卡检查基本参数是否具有正确的值。在工具菜单下，选择脚本，此时将弹出一个窗口。然后选择 t 选项卡并点击绿色箭头。

另一个窗口将弹出。请选择包含适当延迟时间的延迟列表文件，或在点击打开后创建列表。

当延迟列表设置满意后，点击“确定”。此时将弹出一个窗口，提示创建一个文件，用于保存所有将要采集的光谱数据，以计算 t one 值。点击“保存”，仪器将开始采集数据。

并自动将文件保存到所选文件夹中。此时将弹出一个窗口，显示纵向弛豫曲线以及时间常数或纵向弛豫时间（t one）值。为建立校准曲线，首先将一种特定活性药物成分（API）的校准样品放入磁体中。

将样品在较小的管中至少平衡5分钟，在较大的管中平衡10分钟。根据仪器手册中的说明，使用适当的参数采集自由感应衰减或固体实验数据。在RINMR软件的序列选项卡中，通过选择脉冲序列并点击“打开”来加载脉冲序列。

检查基本参数是否具有正确的数值。每种活性药物成分（API）的样品在与磁体温度平衡后，测量5到10分钟，为每种API样品生成校准曲线。将数据保存在文件夹中，为每次实验运行指定一个独特的名称。

根据每支试管中的含量计算样品的重量百分比。考虑原料药样品在最大试管中的纯度。将已准备好的制剂药品样品依次放入磁体中进行测量。

将样品在小型核磁共振管中平衡5分钟，或在较大的核磁共振管中平衡10分钟。对每种活性药物成分（API），采用与已校准样品相同的条件，采集相同的核磁共振实验数据。打开RI校准软件。

通过点击剪辑符号，调取来自特定API及其片剂药物产品样品的FID或固体文件中的所有固体数据。对于所有测得的样品，在浓度列中输入重量百分比，在质量列中输入相应重量。选择适当区域，采用平均法建立校准曲线。

保存校准曲线。接下来，从固体实验的5到300个点中选择区域，以生成校准曲线。使用平均值法进行校准的结果将以表格形式显示。

作为第二种校准方法，使用RI校准软件中的拟合（Fit）方法，利用相同选定区域建立校准曲线。保存校准曲线。使用拟合方法得到的校准结果以表格形式显示。

作为第三种校准方法，打开 Mnova 软件。拖入来自特定 API 的所有固体数据，并输入样品的质量百分比。

在高级菜单中，选择时域，然后选择定量。此时将弹出一个窗口。单击蓝色加号以选择积分区域。

然后使用幅值模式对适当区域进行积分，以建立校准曲线。保存校准曲线。在表格中，仅针对标准品，在浓度列下输入各样本中药物的百分比。

以及质量列下所有样品的重量。校准样品应显示为红色。确保信号函数为 y 等于 s 除以 m，以将信号归一化至质量。

为了确保可重复性和可再现性，需在不同日期对每个样品测量三次，并在两个软件包中分别建立校准曲线。务必保存校准曲线文件。读取所测样品的核磁共振（NMR）数据，并输入其质量，以确定制剂片剂或胶囊中氟化活性药物成分（Fluorinated API）的质量百分比。

使用三种不同校准方法获得的校准曲线。最后，根据文本方案中提供的公式，计算每片药片或每粒胶囊中含有的氟化药物含量，并取平均值。然后将该结果与软件基于校准曲线计算出的数值进行比较。

此处展示的是盐酸西那卡塞（Cinacalcet HCL）以游离碱形式计算并进行三联测定所得到的校准曲线的代表性结果，采用RI校准软件的平均模式（average mode）进行计算。若使用RI校准软件的拟合模式（Fit mode），在三联测定中亦可获得相似的盐酸西那卡塞校准曲线。

使用 Mnova 软件在幅值模式下通过面积法对盐酸西那卡塞进行三次重复测量所得到的校准曲线，结果具有可比性。此处显示的是商业片剂中西那卡塞游离碱计算剂量的结果表格，以及由 RI 校准软件采用平均法和拟合法，以及 Mnova 软件进行统计分析的结果。

一旦掌握，该技术可在15至20分钟内完成。例如，校准样品可能需要一小时，但如果操作得当，则只需进行一次即可。

观看本视频后，您应能够充分理解如何利用低场氟-19时域核磁共振（TD NMR）这一非破坏性技术，对制剂类药品中含氟药物的平均含量进行定量分析。请务必注意，操作药品和核磁共振仪器具有极高的危险性，在执行本实验过程中，必须始终采取必要的安全防护措施，例如佩戴个人防护装备，并确保磁体周围不放置任何金属物品。