大鼠阴茎海绵体神经刺激及海绵体内压记录

本方法的总体目标是描述一种简化的阴茎脚插管手术技术，用于记录阴茎海绵体内压力，以及分离和游离海绵体神经以进行电刺激。该实验方案可用于研究勃起功能障碍的病理生理机制，并测试新的治疗方法。该技术的主要优势在于其可重复性强、操作快速且结果可靠。

本研究已解决并消除了本教程中所述的主要缺陷。尽管该方法可用于研究勃起功能障碍，但使用生物相容性硅胶隔离神经电极复合物的技术可适用于任何外周神经的电刺激，从而实现对其他器官的生理学检测。开始此操作时，先对动物实施麻醉，然后剃除其腹部下半部及会阴区域的毛发。

用70%酒精和聚维酮碘交替擦拭动物三次。随后，将大鼠仰卧位放置在加热的手术垫上。在眼睛上涂抹眼膏，并通过鼻罩以2.5%异氟烷维持大鼠麻醉状态。

然后，在无菌铺巾上，于手术显微镜下进行整个手术操作。随后，在阴茎根部水平开始，沿中线外侧五毫米处向下做一长度为一厘米的皮肤切口。使用棉签仔细分离阴囊外侧的筋膜。

分离筋膜后，使用一对牵开器向后牵拉皮肤边缘和睾丸，用棉签触诊定位坐骨结节。沿内侧解剖穿过脂肪组织，直至暴露出坐骨海绵体肌。用一对镊子纵向分离该肌肉，暴露白膜。

白膜将呈现为亮白色的结构。在校准系统设置后，将导管穿过会阴部皮肤，确保其与阴茎脚平行。然后，保持导管位置不变，并用生理盐水保持切口湿润。

在此操作中，通过皮肤在腹部正中线下方做一个两厘米的切口。沿腹白线在筋膜上做相应切口，以暴露膀胱和前列腺。使用拉钩以获得良好的术野暴露。

然后，使用棉签将前列腺与脂肪组织分离。调整拉钩，继续解剖，直至清晰暴露位于前列腺背外侧走行的盆神经节（MPG）和阴茎海绵体神经（CN）。在定位到MPG和CN后，仔细切开覆盖在神经上方的筋膜，切口位置应位于MPG远端2至5毫米处。

接下来，将神经两侧及下方的组织分离，游离出一段长约四毫米的神经，然后将缝线从神经下方穿过。借助缝线轻轻抬起神经，以便将双极电极的钩子放置在神经周围。让助手用胰岛素针头的尖端将两种组分的硅胶胶水混合五秒钟。

将神经干燥，并在钩子周围及神经周围涂抹胶水。轻轻牵拉电极，使神经保持抬高状态约一分钟，以使胶水干燥。随后移除牵开器，但右侧的牵开器除外，以避免电极受到牵拉或扭转。

随后，用生理盐水润湿暴露的器官，并在切口上覆盖浸有生理盐水的纱布。在此操作中，使用拉钩恢复白膜的视野。注意不要将拉钩固定在坐骨海绵体肌上，以免造成阴茎脚变形。

接下来，将针头连接到PE50导管上，并在将其插入白膜之前，用肝素化生理盐水冲洗导管。保持白膜处于拉伸状态，并用主手固定穿刺点远端的覆盖肌肉。然后，用非主手持针，将其插入海绵体。

冲洗管路以确认针头在海绵体内的位置正确且无渗漏。将针头插入海绵体以记录压力是关键步骤。当将针头置入阴茎脚时，应拉伸阴茎脚，并确保针头沿其走向平行置入。

冲洗管路并按压踝部以测试管路通畅性，确保无泄漏。随后用胶带将管路固定在桌面上，以防意外牵拉管路。

然后，移除拉钩。设置刺激器参数，并进行50秒的刺激，每次刺激之间至少休息一分钟。该图显示，在50毫米汞柱刺激下首次反应减弱，随后进行两次66毫米汞柱的刺激。

然后，在73毫米汞柱的正常水平下记录后续测量结果。此处显示的是使用该方案在75至78毫米汞柱之间连续进行10次刺激后结果的稳定性。该图展示了不同麻醉剂量对阴茎海绵体内压的影响。

与前两次和后三次刺激在2%浓度下的稳定反应相比，增加异氟烷浓度后反应减弱且波动更大。上方的蓝色轨迹显示了恒定的主动脉压力。该图展示了麻醉类型对阴部海绵体内压力的影响。

在异氟烷麻醉下进行的初始刺激显示，血压升高了80毫米汞柱。给予芬太尼和咪达唑仑后，血压反应进一步升高至110毫米汞柱。该图展示了通过鼻罩给予氧气的效果。

通过鼻锥停止供氧后，阴茎海绵体神经刺激所引起的海绵体压力升高显著降低。对主要动脉压未见影响。一旦掌握并正确操作，该操作可在30分钟内完成。

在进行刺激操作时，必须注意麻醉类型、麻醉深度以及氧合状态均会对阴茎海绵体内压产生显著影响。通过本实验方法，可测试不同药物或干预手段，以探讨勃起功能障碍的病理生理机制，并推动新疗法的研发。观看本视频后，您应全面掌握套管神经刺激技术的操作流程，包括使用密封胶隔离神经电复合体、经微创分离及海绵体插管后记录阴茎海绵体内压的方法。