Name: 1%亚甲蓝染料作为单一技术在乳腺癌哨点节点活检中的应用 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-01T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: 了解使用1%亚甲蓝染料作为单一技术进行乳腺癌前哨淋巴结活检的方法。本视频演示了在保乳手术和乳房切除术中的注射技巧、术中识别及病理评估流程，为资源有限环境下提供可靠的替代方案。

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作者无任何利益冲突需要披露。

所有涉及人类受试者的程序均已获得Dharmais癌症医院伦理委员会的批准，批准证书编号为040/KEPK/VII/2017。所有患者均签署了知情同意书，并表示同意参与本研究。
注意：纳入标准为诊断为早期乳腺癌的患者，肿瘤分期为 T1-T2 且无触诊或超声检查发现淋巴结肿大（cNo）。排除标准为局部晚期乳腺癌、已接受新辅助化疗或激素治疗，以及妊娠患者。
1. 1% 亚甲蓝染料的制备及注射技术
<ol>
	<li>在患者麻醉后对手术区域进行消毒灭菌。</li>
	<li>用3 mL注射器从药瓶中吸取2 mL的1%亚甲蓝染料。</li>
	<li>在胸大肌外侧缘下方画线，标记腋毛下界。</li>
	<li>将2 mL的1%亚甲蓝染料注射至乳房乳晕下区域。</li>
	<li>若乳房外上象限或乳头乳晕复合体（NAC）存在瘢痕，则在超声引导下，使用线阵探头（12 MHz）和23G针头，将2 mL的1%亚甲蓝染料经瘢痕外侧向腋窝方向，注射至肿瘤周围乳腺实质内。</li>
	<li>在注射部位行环形按摩5分钟，然后继续进行手术。</li>
</ol>
2. 乳腺保乳手术（BCS）中的前哨淋巴结活检技术
注意：本手术针对已接受乳腺癌保乳手术（BCS）和前哨淋巴结活检（SNB）的患者进行。
<ol>
	<li>准备手术器械：单极电凝器、DeBakey镊/解剖镊以及拉钩。</li>
	<li>切开皮肤、皮下组织和筋膜。</li>
	<li>寻找蓝色淋巴结或蓝色淋巴管。沿蓝色淋巴管追踪，直至识别出蓝色淋巴结或带有蓝色淋巴管的非蓝色淋巴结。</li>
	<li>若无法找到蓝色淋巴结或蓝色淋巴管，应沿肋间臂神经和胸外侧静脉寻找前哨淋巴结。</li>
	<li>仔细切除前哨淋巴结，避免损伤淋巴结。</li>
	<li>触诊腋窝区域，寻找其他可疑的恶性淋巴结肿大。</li>
</ol>
3. 乳房切除术中的前哨淋巴结活检技术
注意：本手术针对已接受乳房切除术和前哨淋巴结活检的患者进行。
<ol>
	<li>切开皮肤和皮下组织。</li>
	<li>制作皮瓣。</li>
	<li>从胸大肌处游离乳腺组织，直至完全暴露腋窝区域。</li>
	<li>切开锁胸筋膜以寻找前哨淋巴结。</li>
	<li>若无法观察到蓝色淋巴管，可沿肋间臂神经及胸外侧静脉区域寻找前哨淋巴结。</li>
	<li>切除前哨淋巴结。</li>
	<li>通过触诊寻找其他可疑的淋巴结。</li>
</ol>
4. 术中检查
<ol>
	<li>沿淋巴结长轴将其切片，厚度不超过 2 mm。</li>
	<li>对每个淋巴结制作涂片细胞学标本。</li>
	<li>将手术标本置于金属组织托盘上，并用与冷冻组织密度相似的凝胶状介质包埋。</li>
	<li>将所有淋巴结送检冷冻切片（FS）。</li>
	<li>将前哨淋巴结的转移状态分为阳性或阴性，并在手术过程中向外科医生报告结果。</li>
</ol>
5. 病理学检查
<ol>
	<li>对福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片进行前哨淋巴结的最终病理学评估。</li>
	<li>根据第6类对前哨淋巴结转移进行分类th 美国癌症联合委员会（AJCC）手册第8版。大转移灶（MAC）定义为大于2 mm的肿瘤病灶，微转移灶（MiC）定义为直径在0.2至2 mm之间的肿瘤病灶，孤立肿瘤细胞（ITC）定义为不超过0.2 mm的单个细胞或细胞簇。</li>
	<li>当对界定孤立性肿瘤细胞（ITC）存在疑问时，可进行连续切片及细胞角蛋白免疫组化分析。</li>
	<li>以类似方式检查其余的腋窝淋巴结。</li>
</ol>

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</ol>

感谢Muhammad医生在手术准备和协助方面的工作，感谢Ali Abdul Aziz先生、Adhitya Bayu先生和Ariananda Hariadi先生在稿件准备过程中的帮助。我们还感谢Tegar Kharisma先生在视频编辑方面的协助。

在现代乳腺癌手术时代，前哨淋巴结活检（SNB）已取代腋窝淋巴结清扫术（ALND），成为早期乳腺癌腋窝分期的标准治疗方案；如果前哨淋巴结（SNs）无转移，应避免进行ALND14,15。在发达国家普遍采用的淋巴显影技术是使用放射性同位素示踪剂和专利蓝染料（PBD），可单独或联合应用16,17。当无法获得放射性同位素甚至PBD时，如何实施SNB成为一个问题。本文所述仅使用亚甲蓝染料（MBD）的技术，旨在解决这些示踪剂不可及的局限性。
亚甲蓝染料即氯化甲硫噻嗪，是一种深绿色结晶化合物，其溶液呈深蓝色。在医学领域，它常被用作诊断工具，例如用于瘘管的检测，同时也可用于治疗，如治疗高铁血红蛋白血症18。尽管在猫模型研究后，专利蓝染料（PBD）已成为首选的蓝色染料7，但自...

腋窝淋巴结（ALNs）转移状态是乳腺癌最重要的预后因素。腋窝淋巴结清扫术（ALND）曾是评估ALNs转移状态的传统方法1,2。然而，ALND会导致患者出现多种并发症，降低生活质量，尤其是显著增加术后淋巴水肿的风险3,4。如今，由于前哨淋巴结活检（SNB）在患者中引起的并发症较少，已取代ALND成为腋窝分期的标准方法5。实施SNB最常用的方法是联合使用放射性同位素示踪剂和亚甲蓝染料（PBD）6。在世界某些地区，包括部分发展中国家，这些示踪剂可能难以获取，因此寻找替代性示踪剂对于解决这一问题至关重要。
最初，Wong 等人将亚甲蓝（MBD）用作示踪剂以定位前哨淋巴结（SNs）7。在他们采用猫模型的研究中，亚甲蓝的皮内注射显示出较差的淋巴摄取效果，因此选择异硫蓝作为前哨淋巴结（SN）定位的首选染料7。自 Simmons 等人首次成功报道以来，亚甲蓝染料已应用于乳腺癌前哨淋巴结活检（SNB）8。多项研究也报道亚甲蓝是识别前哨淋巴结的优选染料，其假阴性率与放射性同位素或专利蓝（PBD）技术相当9,10,11。此外，亚甲蓝过敏反应较少且价格较低，也是其在前哨淋巴结定位中值得考虑使用的其他原因12。
近期，我们研究了单独使用1%亚甲蓝（MBD）对临床淋巴结阴性的乳腺癌患者进行前哨淋巴结活检（SNB）的应用。在早期阶段，MBD具有良好的检出率和阴性预测值13。我们将2 mL的1% MBD注射至乳晕下区域，或当乳腺的外上象限或乳头乳晕复合体（NAC）存在切除活检瘢痕时，注射至肿瘤周围区域。显色为蓝色的淋巴结以及具有蓝色淋巴管但本身未显色的淋巴结均被归类为前哨淋巴结（SN）。在腋窝解剖过程中，以前哨淋巴结的解剖标志作为寻找SN的指引。术中对前哨淋巴结进行检查以评估是否存在转移，并根据美国临床肿瘤学会（ASCO）指南14将前哨淋巴结送检进行组织病理学分析。
如果仔细选择病例，并且外科医生和病理学家均掌握了该技术所需的技能，则可在保证良好生存率的同时，使许多患者免受前哨淋巴结活检（ALND）有害影响的困扰。

<table><tbody><tr><td>Metiblo 50mg/5ml</td><td>Laboratories Sterop NV</td><td>BE475217</td><td>亚甲蓝染料</td></tr><tr><td>带针一次性注射器 - 3mL（鲁尔锁扣式针头）</td><td>Terumo Europe NV</td><td>dvr-3414</td><td>注射用注射器</td></tr><tr><td>ForceTriad 能量平台</td><td>Medtronic</td><td>ForceTriad</td><td>外科电凝设备</td></tr><tr><td>Shandon Cryomatrix 包埋树脂</td><td>Thermo (scientific)</td><td>6769006</td><td>冷冻切片</td></tr><tr><td>Cryotome FSE</td><td>Thermo (scientific)</td><td>77210153</td><td></td></tr><tr><td>HistoStar 包埋工作站</td><td>Thermo (scientific)</td><td>A81000001</td><td>组织病理学检查</td></tr><tr><td>Finesse Me+</td><td>Thermo (scientific)</td><td>A77510272</td><td></td></tr><tr><td>Gemini AS</td><td>Thermo (scientific)</td><td>A81500002</td><td></td></tr><tr><td>Benchmark GX</td><td>Ventana Medical Systems</td><td>750-850</td><td>免疫组织化学</td></tr><tr><td>Benchmark XT</td><td>Ventana Medical Systems</td><td>750-700</td><td></td></tr><tr><td>显微镜</td><td>Olympus</td><td>型号 BX53</td><td></td></tr><tr><td>超声设备</td><td>Phillips</td><td>HD 7XE</td><td></td></tr></tbody></table>

1%亚甲蓝染料作为单一技术在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用

The Application of 1% Methylene Blue Dye As a Single Technique in Breast Cancer Sentinel Node Biopsy

在本研究中，我们将1%亚甲蓝染料（MBD）注射至乳房的乳晕下或肿瘤周围区域。对于乳腺保乳手术（BCS），在腋下皱襞毛发分界线处另作一切口以寻找前哨淋巴结（SNs）。而在乳房切除术中，则通过同一乳房切除切口来识别前哨淋巴结。前哨淋巴结被定义为染成蓝色的淋巴结或带有蓝色淋巴管通道的淋巴结。我们采用腋窝内的解剖标志以辅助前哨淋巴结的识别。前哨淋巴结是否存在转移通过术中冰冻切片分析及组织病理学检查进行评估，因其被视为金标准。本文中，我们描述了仅使用亚甲蓝染料（MBD）进行乳腺癌前哨淋巴结活检（SNB）的技术，该方法在无法获得放射性同位素示踪剂或专利蓝V染料（PBD）或伊文思蓝染料的情况下具有应用价值。

此处，我们描述所展示技术的结果。按照标准注射技术，将2 mL的1%亚甲蓝染料（MBD）注射至乳晕深部组织间隙（图1A）。若需进行肿瘤周围注射，则应在超声引导下完成（图1B）。进入腋窝区域后，可见蓝色染色的淋巴结或蓝色淋巴管通路。沿蓝色淋巴管通路追踪可定位前哨淋巴结（SNs）（图2A）。若无法观察到蓝色淋巴结或蓝色淋巴管通路，则可利用肋间臂神经和胸外侧静脉作为解剖标志，前哨淋巴结通常位于这些区域附近（图2B、C）。
一旦定位前哨淋巴结后，应立即将其送至实验室进行术中冰冻切片检查。前哨淋巴结沿长轴切成2 mm厚的切片，图3A）。...

在印度尼西亚，由于无法常规提供放射性同位素示踪剂以及亚甲蓝或专利蓝染料（PBD），前哨淋巴结活检（SNB）尚未作为乳腺癌手术的常规操作。为克服这一障碍，我们采用1%亚甲蓝染料（MBD）作为单一示踪剂来定位前哨淋巴结（SNs）。

在本研究中，我们将1%亚甲蓝染料（MBD）注射至乳房的乳晕下或肿瘤周围区域。在乳腺保乳手术中……

使用1%亚甲蓝染料作为单一技术进行乳腺癌前哨淋巴结活检。本操作的总体目标是展示仅使用1%亚甲蓝染料作为单一技术进行早期乳腺癌腋窝淋巴结活检的应用方法，并介绍如何对前哨淋巴结进行亚甲蓝检查。第一部分：1%亚甲蓝染料的配制及注射技术。第二部分 乳腺癌保乳手术中的前哨淋巴结活检技术。第三部分 乳房切除术中的前哨淋巴结活检技术。第四部分 前哨淋巴结的病理学检查。第五部分 术中检查。第六部分 结果。第七节 结论。

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癌症研究

1%亚甲蓝染料作为单一技术在乳腺癌哨点节点活检中的应用

荧光成像是一种在肿瘤外科手术中具有前景的创新性影像引导手术技术。本视频中，我们介绍了在妇科肿瘤学领域应用荧光成像技术检测前哨淋巴结的技术操作流程。该方法采用多光谱荧光相机系统，并结合荧光造影剂吲哚菁绿（indocyanine...

妇科肿瘤术中前哨淋巴结多光谱实时荧光成像检测

在本视频中，我们介绍亚甲蓝染色法，通过计数从注射后小鼠模型远端器官中分离的癌细胞经培养后获得的染色克隆，来定量评估转移负荷。...

亚甲蓝染色法用于体外评估转移性克隆形成：一种通过定量来自小鼠癌症模型的收获癌细胞来评估转移的染色步骤

本文介绍了一种非侵入性地向小鼠乳腺导管递送水溶性试剂的实验方案。该方法通过将试剂局部注射至乳腺乳头，特异性地靶向乳腺导管。此技术可适用于多种化合物，包括siRNA、化疗药物和小分子化合物。...

乳腺导管内注射实现药物对小鼠乳腺的局部递送

将亚甲蓝染料注入小鼠胚胎肾盂，有助于评估泌尿系统发育过程中尿路连接处的梗阻缺陷。本文介绍了一种向肾盂注射亚甲蓝染料的实验方案。...

通过亚甲蓝染料注射评估尿路连接处梗阻缺陷

本文介绍了一种使用染料标记进行肺结节定位的实验方案 通过...

电磁导航经胸结节定位在微创胸外科手术中的应用

本方案描述了前哨淋巴结的识别与切除方法，旨在使手术操作尽可能简便且微创。...

早期子宫内膜癌的腹腔镜前哨淋巴结定位与活检

本文介绍了通过单一腋窝切口进行内窥镜双侧乳头保留乳房切除术并同期行胸大肌前假体重建的详细外科手术步骤。该术式对于乳腺癌患者而言是一种安全且可行的方法。...

经腋窝单一切口内镜双侧乳头保留乳房切除术联合即刻胸大肌前假体重建

本文描述了在动物模型中将携带RNA寡核苷酸的磁性氧化铁纳米颗粒递送至转移性乳腺癌的体内给药方案，为癌性核酸的治疗性沉默提供了一种具有临床可行性的方法。...

监测纳米药物在小鼠乳腺癌转移灶中的蓄积

这项前瞻性研究评估了一种新型单孔机器人平台在恶性病变的肿瘤整形保乳手术中的应用。主要终点为技术成功，定义为通过术中冰冻切片组织病理学检查证实切缘无肿瘤残留；次要终点为评估患者的美学效果及生活质量评分。...

单孔机器人辅助经腋窝保乳手术：一项前瞻性、单组、非随机IIa期临床试验

本研究描述了一种用于乳腺癌单孔腹腔镜腋窝淋巴结清扫术的标准化外科手术方法，无需进行吸脂术。该技术适用于经活检证实存在淋巴结转移或前哨淋巴结阳性的患者，强调保护重要结构，特别是肋间臂神经，以减少术后并发症并优化功能恢复。...

乳腺癌手术中单孔非吸脂内镜腋窝淋巴结清扫术

了解使用1%亚甲蓝染料作为单一技术进行乳腺癌前哨淋巴结活检的方法。本视频演示了在保乳手术和乳房切除术中的注射技巧、术中识别及病理评估流程，为资源有限环境下提供可靠的替代方案。

1%亚甲蓝染料作为单一技术在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用

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