Name: 小鼠主动和被动驯服的测定 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: 学习使用主动驯服测试和被动驯服测试评估小鼠驯化程度的方法。该方案可分别测量小鼠的主动接近行为和被动回避反应，为动物行为学和驯化遗传学研究提供可靠数据支持。

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本工作得到了以下科学研究费补助金（KAKENHI）的资助：15H05724、16H01491 和 15H04289。

所有实验均按照日本遗传学研究所（NIG）的动物实验指南进行，并经NIG动物护理与使用委员会批准（批准号：26-9）。
1. 动物
<ol>
	<li>选择性育种
	<ol>
		<li>创建野生来源杂合品系（WHS）6 通过杂交8个近交系小鼠（MSM、HMI、BLG2、PGN2、KJR、CHD、NJL和BFM/2）培育小鼠，同时避免近亲交配（同胞或表亲间的交配）7从第三代（G3）开始进行选择性育种，根据主动温顺性测试（见步骤3.1）结果，选择“接触时间”较长的小鼠（选育组，16对交配组合）进行繁殖。</li>
		<li>生成未选择对照组（同样为16对交配组合的家庭） 通过 从G3代开始进行随机交配。在代表性实验中，使用来自WHS小鼠选育组（S1）和非选育组（C1）的小鼠，通过三项温顺性测试（见步骤3.1–3.3）展示主动和被动温顺性的表现模式。实验中每组（S1和C1）使用10只G15代小鼠。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>代表性 实验动物
	<ol>
		<li>在3周龄时将所有小鼠与其母鼠断奶，并在测试前以同性别同胞小鼠为组，饲养于装有木屑的标准尺寸塑料笼中。所有动物均置于日本国立遗传学研究所（NIG）动物设施内，维持12/12小时明暗循环（光照时间为06:00至18:00）及恒定温度（23 ± 2 °C）。</li>
		<li>确保食物和水的供应 随意摄取在小鼠6周龄时，于光照期进行测试，以分析其在人类通常活跃的时段内与人类的互动情况。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>操作规程
	<ol>
		<li>使用套有硅胶管的大型镊子轻轻夹住小鼠尾巴，将其转移至新笼子中。在断奶时使用镊子将小鼠与其母本分离，并在实验过程中用镊子移动小鼠。在进行温顺性测试之前，任何小鼠均不应接受人为抓握处理。</li>
		<li>在进行温顺性测试前，将小鼠转移至实验室内。</li>
		<li>测试后应将雄性小鼠相互分开放置，以避免WHS小鼠发生雄性间攻击行为。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 仪器设备
<ol>
	<li>使用旷场实验装置（400 × 400 × 400 mm，灰白色聚氯乙烯材质）。</li>
	<li>使用夹式灯具，配备中性白光灯泡（100 lux），固定在旷场装置上方450 mm处，以照亮旷场区域（图1）。</li>
	<li>使用市售便携式数码相机，通过三脚架固定在旷场装置上方850 mm处，记录所有行为（图1）。</li>
	<li>在进行被动温顺性测试时，需在乳胶手套内佩戴布质手套，以防止被动物咬伤（此反应较为罕见）。</li>
	<li>使用秒表测量测试持续时间。</li>
</ol>
3. 测试
注意：前两项测试（主动温顺性和被动温顺性）每项持续1分钟，停留手部测试则少于1分钟。这三项测试均在敞箱实验装置中进行，并使用数码相机记录。&#160;所有装置在进行任何行为学研究前均应进行碘伏消毒处理。
<ol>
	<li>操作步骤 主动温顺性测试
	<ol>
		<li>打开数码相机并开始录制。</li>
		<li>使用大号镊子轻轻夹住小鼠尾巴（参见步骤1.3.1），将其从饲养笼转移至旷场实验装置的中央。</li>
		<li>启动秒表。</li>
		<li>将左手放在仪器的左下角。</li>
		<li>保持手掌向上，缓慢而稳定地移动手指，以确保小鼠将手与人连接。将全部四个手指从小指到食指依次移动的平均时间应约为0.5秒，并持续重复该运动周期。</li>
		<li>将手缓慢移向小鼠，平均速度约为13 cm/s，至距小鼠体侧10 cm处停止。</li>
		<li>若小鼠试图远离，保持相同距离。若小鼠靠近，手部保持原位并继续轻微活动手指。若小鼠试图沿手臂爬升，用另一只空闲的手将其移回操作区域。</li>
		<li>1 分钟后结束测试，收回手，然后进行被动温顺性测试。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>操作步骤 被动温顺性测试
	<ol>
		<li>参照主动温顺性测试的相同步骤操作，但不再在距离小鼠身体10 cm处停止，而是用指尖缓慢触碰小鼠。</li>
		<li>保持手指位置不变，持续接触小鼠，直到小鼠移开。当小鼠试图脱离接触时，跟随其移动，移动的平均速度约为23 cm/s，并重新开始触碰。</li>
		<li>1 分钟后结束测试。立即重新启动秒表，开始手部停留测试。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>操作步骤 手部留存测试
	<ol>
		<li>用一对大镊子夹住小鼠尾巴将其提起，轻轻放置于左手掌上。保持手部接近旷场实验装置的底部。</li>
		<li>用左手拇指以平均每秒0.5次的频率轻柔地抚摸小鼠，直至其离开手掌。</li>
		<li>重复步骤 3.3.1 - 3.3.2，共 3 次。</li>
		<li>第三次试验结束后，停止视频录制；所有温顺性测试至此全部完成。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>实验后处理步骤
	<ol>
		<li>称量小鼠体重，并计数旷场中遗留的粪便和尿液数量。</li>
		<li>对小鼠进行个体标记 通过 耳缘打孔</li>
		<li>用浸有0.2%碘伏消毒剂的纸巾擦拭仪器和实验人员手套。</li>
		<li>用干燥的纸巾擦拭仪器。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 行为学分析
注意：视频记录使用 tanaMove 0.01 版（Windows 7）进行评分，该软件为用于行为分析的事件记录软件（图2）。该软件可免费获取（补充材料1），也可从我们的网站下载（http://www.mgrl-lab.jp/MGRL_software.html）。所有视频均由一位对实验条件设盲的研究人员进行评分。所有行为指标的持续时间均以0.1秒为单位进行测量。在评分过程中，观察者在观察到特定行为时按下键盘上对应的字母键（见步骤4.1）。
<ol>
	<li>视频分析按键分配
	<ol>
		<li>为每项行为指标分配按键。在步骤 4.3 中为自动汇总数据，为每项行为指标分配合适的按键至关重要。 
		注意：本研究中使用的按键分配如图3所示。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>视频分析
	<ol>
		<li>对每段视频记录分别进行 3 次不同行为指标的分析（图3B）。自我理毛行为不进行评分。请确保打开计算机的内置扬声器，以便在视频中听到计时器声音。</li>
		<li>启动 tanaMove 软件。</li>
		<li>将待分析的视频文件拖放到 tanaMove 窗口中。确认文件已加载，并检查数据文件 [.csv]框中输出的 CSV 文件路径和文件名是否正确。</li>
		<li>点击准备按钮。这将激活一个新窗口，用于输入已分配的按键。</li>
		<li>点击播放按钮以开始播放视频文件。点击停止按钮以暂停视频文件。</li>
		<li>当观察到小鼠“朝向”或接近手部时（包括站立嗅闻），按下A键。在主动温顺性测试期间，当观察到小鼠“移动”但未朝向手部时，按下R键。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，按住W键至少 0.3 秒（窗口中至少三个时间间隔）。</li>
		<li>在被动温顺性测试中，当左手进入视频画面后开始分析。当观察到小鼠朝向或接近手部时按A键，当观察到小鼠移动但未朝向手部时按R键。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，按住W键至少 0.3 秒（窗口中至少三个时间间隔）。</li>
		<li>在“停留于手”测试中，当观察到小鼠“停留在手”上时，按下T键。</li>
		<li>完成“停留于手”测试后，点击停止按钮以结束视频观察。</li>
		<li>点击返回按钮，并为输出的 CSV 数据文件输入新的文件名。</li>
		<li>点击准备按钮，激活一个新窗口以输入已分配的按键。</li>
		<li>点击播放按钮以重新开始播放视频，并启动主动温顺性测试的观察。</li>
		<li>在主动温顺性测试期间，当观察到小鼠“接触”人类时按下T键，包括所有主动接触行为，但不包括偶然接触（例如跳跃后落在手掌上）。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，按住W键至少 0.3 秒（窗口中至少三个时间间隔）。</li>
		<li>在被动温顺性测试期间，当小鼠允许实验者触碰其身体时，按下T键。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，按住W键至少 0.3 秒（窗口中至少三个时间间隔）。</li>
		<li>点击停止按钮以停止视频播放。</li>
		<li>点击返回按钮，并为输出的 CSV 数据文件输入新的文件名。</li>
		<li>点击准备按钮，激活一个新窗口以输入已分配的按键。</li>
		<li>点击播放按钮以重新开始播放视频，并启动主动温顺性测试的观察。</li>
		<li>在主动温顺性测试期间，当观察到小鼠“跳跃”时，按下J键。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，按住W键至少 0.3 秒（窗口中至少三个时间间隔），然后开始被动温顺性测试的观察。</li>
		<li>在被动温顺性测试期间，当观察到小鼠“跳跃”时，按下J键。</li>
		<li>当在 60 秒时听到计时器声音时，点击停止按钮以结束视频观察。</li>
		<li>点击返回按钮，并为输出的 CSV 数据文件输入新的文件名。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>汇总数据
	<ol>
		<li>将所有原始数据文件（CSV）与补充材料2.xlsm文件（补充材料2）保存在同一文件夹中。</li>
		<li>打开补充材料2.xlsm文件，并点击汇总按钮。</li>
		<li>将结果另存为单独文件，用于进一步分析温顺性行为。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Albert, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+differences+in+behavior%2C+physiology+and+neurochemistry+between+rats+selected+for+tameness+and+for+defensive+aggression+towards+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Hormones+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Phenotypic differences in behavior, physiology and neurochemistry between rats selected for tameness and for defensive aggression towards humans.</a> Hormones and Behavior. 53 (3), 413-421 (2008).</li>
<li>Belyaev, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Destabilizing+selection+as+a+factor+in+domestication%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Heredity%22%5BJournal%5D)">Destabilizing selection as a factor in domestication.</a> Journal of Heredity. 70 (5), 301-308 (1978).</li>
<li>Trut, L. <a target="_blank" href="https://www.jstor.org/stable/27857815">Early canid domestication: the farm-fox experiment.</a> American Scientist. 87 (2), 160-169 (1999).</li>
<li>Price, E. O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrice%2C+EO+%22Animal+Domestication+and+Behavior%22">Animal Domestication and Behavior</a>. , CABI Publishing. New York, NY. (2002).</li>
<li>Goto, T., Tanave, A., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Koide, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+for+reluctance+to+avoid+humans+during+the+domestication+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Selection for reluctance to avoid humans during the domestication of mice.</a> Genes, Brain and Behavior. 12 (8), 760-770 (2013).</li>
<li>Matsumoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+breeding+and+selection+mapping+using+a+novel+wild-derived+heterogeneous+stock+of+mice+revealed+two+closely+linked+loci+for+tameness%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Selective breeding and selection mapping using a novel wild-derived heterogeneous stock of mice revealed two closely linked loci for tameness.</a> Scientific Reports. 7, 4607(2017).</li>
<li>Koide, T., Goto, T., Takano-Shimizu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+mixing+to+elucidate+the+genetic+system+of+complex+traits%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Genomic mixing to elucidate the genetic system of complex traits.</a> Experimental Animals. 61 (5), 503-509 (2012).</li>
<li>Albert, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+architecture+of+tameness+in+a+rat+model+of+animal+domestication%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic architecture of tameness in a rat model of animal domestication.</a> Genetics. 182 (2), 541-554 (2009).</li>
<li>Cottle, C. A., Price, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+nonagouti+pelage-color+allele+on+the+behavior+of+captive+wild+Norway+rats+%28Rattus+norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of the nonagouti pelage-color allele on the behavior of captive wild Norway rats (Rattus norvegicus).</a> Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 390-394 (1987).</li>
<li>Hayssen, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+nonagouti+coat-color+allele+on+behavior+of+deer+mice+%28Peromyscus+maniculatus%29%3A+a+comparison+with+Norway+rats+%28Rattus+norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of the nonagouti coat-color allele on behavior of deer mice (Peromyscus maniculatus): a comparison with Norway rats (Rattus norvegicus).</a> Journal of Comparative Psychology. 111 (4), 419-423 (1997).</li>
<li>Arakawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+male-specific+QTL+for+social+interaction+behavior+in+mice+mapped+with+automated+pattern+detection+by+a+hidden+Markov+model+incorporated+into+newly+developed+freeware%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A male-specific QTL for social interaction behavior in mice mapped with automated pattern detection by a hidden Markov model incorporated into newly developed freeware.</a> Journal of Neuroscience Methods. 234, 127-134 (2014).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

代表性结果涵盖了主动温顺性、被动温顺性以及停留手部测试中的九项行为指标。对选择组与对照组得分的比较显示出在温顺性方面存在明显差异。这些结果表明，这三项测试可用于有效测量小鼠的温顺性。
动物的温顺程度在实证上难以量化。已有多种方法被开发用于评估鹿、小鼠和大鼠的温顺性8,9,10。然而，这些方法并未分别量化主动温顺性和被动温顺性。在之前的一项研究中，我们建立了三种用于量化小鼠温顺性的测试方法5。利用主动温顺性测试的评分，我们开展了选择性育种实验，并成功培育出具有较高主动温顺性的小鼠品系6。除了在主动温顺性测试中更愿意接近和接触人类外，这些经过选择性育种的小鼠在被动温顺性测试中也能更长时间地耐受人类接触，尽管该测试的结果并未作为选育依据。这些结果表明，这两种测试并非完全独立，而是存在一定程度的重叠。
...

在驯化过程中，选择性育种改变了驯养动物的特征，使其更适应与人类共同生活1,2,3。&#34;温顺性&#34;是驯养动物中常见的一种行为特征。针对动物温顺性的选择性育种研究揭示了驯化过程中其表型的变化方式。在一项著名的研究中，狐狸被进行温顺性选择育种，并成功建立了一群表现出高度温顺性的狐狸种群2。这些狐狸还表现出其他表型变化，涉及形态学、繁殖、毛色以及生理特征。对小鼠——一种常用的实验动物——进行温顺性的选择性育种，有助于揭示驯化过程中多种表型变化背后的机制。
温顺性包含两个行为学组分：主动接近人类（主动温顺性）和减少对人类的回避行为（被动温顺性）4。在之前的一项研究中，我们建立了三种行为学测试方法，用于评估小鼠的温顺性水平：主动温顺性测试、被动温顺性测试和停留于手部测试5。第一种测试旨在通过测量小鼠自发接近人类的潜伏期及其与人手接触所持续的时间，来量化其主动温顺性。第二种测试旨在通过测量小鼠耐受人手触碰的时间长短，来量化其被动温顺性。停留于手部测试则用于量化小鼠对被人手轻微抚摸这一行为的回避程度。这三项评估仅需使用敞箱实验装置、一台数码相机和一把较大的镊子即可完成。整个测试过程可在3分钟内依次完成，从而实现每日大量数据的采集。
在之前的研究中，我们利用一系列近交系小鼠品系——包括10个野生品系、1个源自日本花色小鼠的品系以及6个实验室品系——对温顺行为进行了表征和比较5。大多数驯化品系在被动温顺性方面显著高于野生品系，但两组之间的主动温顺性并无差异。基于这些结果，我们得出结论：作为实验室品系祖先的驯化小鼠，在其育种历史中主要被选择的是被动温顺性，而非主动温顺性。
接下来，我们利用八种野生小鼠品系进行选择性育种，以建立一个遗传异质性群体6。我们选择在主动温顺性测试中得分较高的个体，并在连续世代中成功提高了其主动温顺性，与对照组相比差异明显。该结果表明，这些测试能够可靠地评估小鼠的温顺性。
本文中，我们介绍了利用三种行为学实验测量行为学指标的完整方法。首先，阐述实验所需的装置设置及仪器设备。接着，详细说明开展实验的逐步操作流程、通过视频采集数据的方法，以及使用我们开发的免费软件对这些数据进行分析的具体步骤。最后，展示选择性繁育小鼠群体与对照组之间比较的代表性实验结果。

<table><tbody><tr><td>旷场实验装置</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co. Ltd.</td><td>OF-3102</td><td>400&amp;times;400&amp;times;400 mm，灰白色聚氯乙烯材质</td></tr><tr><td>便携式数码相机</td><td>Ricoh Company, Ltd.</td><td>CX-5</td><td>该产品已停产</td></tr><tr><td>纯乳胶手套</td><td>AS ONE</td><td>BioLab, IKG-8002</td><td></td></tr><tr><td>秒表</td><td>SEIKO</td><td>SSBJ018</td><td></td></tr><tr><td>碘伏消毒剂</td><td>Ecolab G.K. (CLEA Japan)</td><td>CL-4123</td><td>Mikro Klene</td></tr></tbody></table>

分别测量小鼠的主动和被动温顺性

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

狗和实验小鼠等驯化动物表现出高度的温顺性，这对于人类易于操控它们至关重要。温顺性包含两个行为组分：不愿回避人类（被动温顺）和主动接近人类的动机（主动温顺）。为了量化小鼠中的这两个组分，我们此前开发了用于检测主动温顺、被动温顺以及停留在人手上的意愿的行为学实验，每个实验均设计为在3分钟内完成。所获得的数据用于选择性育种，每代分析大量小鼠。主动温顺实验测量小鼠朝向人手的运动及其与人手的接触情况；被动温顺实验测量小鼠耐受人类触碰的持续时间。在停留于手部实验中，将小鼠放置于人手上，并用该手的拇指缓慢触碰，记录动物停留在手上的持续时间。本文中，我们描述了实验装置与设备，说明了操作步骤，并讨论了适当的数据分析方法。最后，我们解释了如何解读实验结果。

我们先前对小鼠进行了主动温顺性的选择性育种，并成功培育出表现出高度主动温顺性的小鼠6. 选择组与非选择组小鼠在第15代进行的温顺性测试的代表性结果th 第15代（G15）如图所示 图4在主动温顺性测试中，所选组的小鼠得分更高，与人类手部接触的持续时间显著长于对照组小鼠。该接触时间被用作选择性繁殖的指标。两组在头部运动、运动或跳跃持续时间方面无显著差异。图 4A, 表1），但被选中的小鼠在被动温顺性测试中的得分更高，能够比对照组小鼠显著更长时间地耐受人类接触。此外，被选中的小鼠表现出显著更短的运动和跳跃持续时间（图 4B, 表1）。最后，在停留手部测试中，被选中的小鼠停留在人手上的时间显著长于对照组小鼠。图4C</str...

动物的温顺性包括对人类回避反应的减少（被动温顺）以及主动接近人类行为的增加（主动温顺）。本文中，我们描述了三种行为学测试（主动温顺测试、被动温顺测试和停留手上测试）的详细实验方案，用于分别测量小鼠的主动温顺性和被动温顺性。

家养动物（如狗和实验小鼠）表现出高度的温顺性，这对于人类易于驯养和操作至关重要。温顺性包含两个……

该方法可用于评估每只小鼠的温顺程度，所得数据对于后续的温顺性研究（例如与温顺性相关基因的遗传定位）具有重要价值。该技术的主要优势在于，能够通过此方法分别评估温顺性的两个主要组成部分：主动温顺性和被动温顺性。本次实验操作将由本实验室的研究生长山博通（Hiromichi Nagayama）先生和技术员仁平元子（Motoko Nihei）女士进行示范。首先，打开数码相机并开始录像。然后，用一把大镊子轻轻夹住小鼠的尾巴，将其提起。将小鼠从其饲养笼中转移到开阔场地装置的中央位置。启动秒表后，将一只手置于仪器的左下角。手掌朝上，缓慢而稳定地活动手指。然后缓慢地将手移向小鼠，并在距离小鼠身体侧面10厘米处停止。如果小鼠试图远离，保持此距离。若小鼠靠近手部，则保持手的位置不动，并继续缓慢而稳定地活动手指。若小鼠试图沿手臂攀爬，用另一只手将其移开。一分钟后结束测试。将小鼠放入装置后，将左手伸入装置内，然后缓慢而稳定地移动手部靠近小鼠，并用指尖轻轻触碰小鼠。继续用指尖触碰小鼠，直到它移开。当小鼠试图脱离接触时，用手跟随其移动并重新建立接触。一分钟后结束测试。上一个测试结束后立即用一把大镊子夹住小鼠尾巴，将其提起并轻轻放在左手掌上。用左手拇指轻轻抚摸小鼠，直到它离开手掌。然后，再用镊子将小鼠放回手掌上。第三次试验结束后，停止视频录制并称量小鼠体重。将小鼠放回其饲养笼后，记录装置开放区域中残留的粪便和尿液数量。接着，用浸有0.2%碘伏消毒剂的纸巾擦拭装置和手套，并用干燥的纸巾将装置擦干。为每个行为指标分配按键后，启动 tanaMove 软件。接着，将待分析的视频文件拖放到窗口中。确认文件已加载，并核对数据文件中的信息。csv 框正确。单击“就绪”按钮，并在随后的窗口中输入每个行为指标对应的指定键。然后，单击“播放”按钮以开始播放视频文件，单击“停止”以暂停播放。在主动温顺性测试期间，当观察到小鼠朝向或接近手部时，按 A 键；当观察到小鼠移动但未朝向手部时，按 R 键；当 60 秒计时器发出声音时，按住 W 键，以标记主动温顺性测试结束。当左手进入画面时，开始进行被动温顺性测试的分析。当观察到小鼠朝手部方向移动时按 A 键，当观察到小鼠移动但未朝向手部时按 R 键。随后，当 60 秒计时器发出声音时，按住 W 键。当观察到左手进入画面时，开始进行被动温顺性分析。视频播放过程中，当观察到小鼠接近手部时按 A 键，当观察到小鼠移动但未朝向手部时按 R 键。当听到计时器到达 60 秒时，再次按 W 键。此后，在测试过程中每当鼠标停留在手部区域时，按一次 T 键。测试结束后，单击“停止”按钮。然后单击“返回”按钮以激活新窗口，并为 CSV 数据输入输入新的文件名。接下来，点击“Ready”按钮，并在新窗口中输入相应的按键。然后，点击“Play”按钮以重新播放视频，并启动主动温顺性测试的分析。在视频播放过程中，每当小鼠主动接触操作者时，按下 T 键。当计时器在60秒时响起，按住 W 键。在被动温顺性测试期间，当小鼠允许操作者触碰其身体时，按下 T 键。随后，当60秒计时器响起时，按住 W 键。之后，单击“停止”按钮，然后单击“返回”按钮，再输入 CSV 数据输出文件的名称。接下来，点击“Ready”按钮以启动一个新窗口来输入指定的按键。然后，点击“Play”开始主动温顺性测试。当观察到小鼠跳跃时，按下 J 键；60 秒计时器响起后，按下 W 键。单击“停止”按钮，以停止视频观察，计时器将在 60 秒时再次发出声音。然后，单击“返回”按钮，并为 CSV 数据输出输入文件名。接下来，将所有原始数据文件保存到包含补充两个文件的文件夹中。打开补充的两个文件，然后点击“汇总”按钮。最后，将结果另存为单独的文件以供进一步分析。通过选择性育种，培育出了具有高度主动温顺性状的小鼠。在主动温顺性测试中，来自选择性繁殖组的小鼠得分高于对照组小鼠，表现为与人手接触的时间更长。这两个组的小鼠在朝向、运动或跳跃持续时间方面无显著差异。然而，选择性繁殖组的小鼠在被动温顺性测试中的得分更高。此外，在“停留于手掌测试”中，所选的小鼠停留在人手上的时间显著长于对照组小鼠。在进行该操作时，需注意在实施温顺性测试之前避免抓取小鼠，因为抓取经历可能会显著影响每只小鼠的温顺性。

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Research

科研

JoVE Journal

Behavior

行为

小鼠主动和被动驯服的测定

肌肉力量减退出现在许多临床状况中，例如运动神经元病。本文所述的倒置网格试验和负重提起试验几乎完全用于测量小鼠的力量，且受协调性等因素的影响极小。...

测量小鼠的肌力

本文介绍了使用改良的自动化装置进行小鼠T迷宫测试以评估其学习和记忆功能的实验方案。...

小鼠工作记忆与参考记忆评估的T型迷宫强制交替与左右辨别任务

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用于骨骼肌疾病的开放场活动监测系统的行为与运动功能测量

本方案提供了利用旷场迷宫评估实验小鼠模型的一般运动活性、焦虑及情绪行为的方法。...

利用旷场迷宫检测小鼠的运动能力和焦虑样行为

本方案描述了一种量化小鼠社交行为的方法。小鼠在特殊笼具中活动和相互作用时被录像，通过视频处理可实现对社交行为的自动化定量分析，具有极高的准确性和可靠性。...

利用自动化图像处理方法对小鼠社交行为的实验评估

本方案采用巴恩斯迷宫测量空间学习和记忆能力。通过一种新颖的“危难中的少女”范式来评估小鼠的运动活动性和亲社会行为。...

利用巴恩斯迷宫和遇险少女范式分析小鼠的空间学习与亲社会行为

本文介绍了如何在雄性小鼠中进行性行为测试。...

雄性小鼠交配行为评估

机械冲突回避实验被用作评估小鼠疼痛敏感性的一种非反射性指标，可用于更好地理解多种小鼠疼痛模型中的情感-动机反应。...

小鼠疼痛行为的机械性避冲突检测法

为了研究在恐惧情境下的逃跑行为，我们引入了一种改良的恐惧条件化方案。该方案可确保小鼠在恐惧条件化过程中呈现提示信号时持续表现出逃跑行为。...

改良恐惧条件化以诱导小鼠飞行行为

啮齿类动物模型是研究自闭症谱系障碍（ASD）核心行为的有力工具。本文详细阐述了两种用于模拟小鼠ASD核心特征的行为学实验：自我理毛实验，用于评估重复性行为；以及三室社交互动实验，用于记录社交功能障碍。...

评估小鼠类自闭症行为的策略

本方案描述了一种可在多种研究背景下实施的有效自主转轮跑模型。与其他自主跑台模型不同，该方法在追踪单个大鼠跑步参数的同时，避免了隔离饲养。...

使用最小化社交隔离的自主跑轮运动方案追踪小鼠个体跑步指标

学习使用主动驯服测试和被动驯服测试评估小鼠驯化程度的方法。该方案可分别测量小鼠的主动接近行为和被动回避反应，为动物行为学和驯化遗传学研究提供可靠数据支持。

分别测量小鼠的主动和被动温顺性

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