Name: 左心房狭窄致大鼠肺静脉动脉化及第2组肺动脉高压 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: 学习在大鼠中进行左心房狭窄手术以建立第2组肺动脉高压模型的详细步骤。该视频演示了使用钛夹诱导肺静脉动脉化的完整手术流程，为研究肺动脉高压机制提供了可重复的动物实验方法。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

作者感谢Mitacs-日本学术振兴会（JSPS）暑期项目的支持。Ping Yu Xiong 受Mitacs-JSPS暑期项目资助，前往庆应义塾大学医学院进行访问。南岛博士（S.M.）部分受日本文部科学省（Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology of Japan）、文部科学省资助的私立大学战略性研究基础建设项目的资助（MEXT-Supported Program for the Strategic Research Foundation at Private Universities）、汽车竞赛纪念基金会（Vehicle Racing Commemorative Foundation）以及庆应义塾大学研究生研究基金（The Jikei University Graduate Research Fund）对本项目的财政支持。Archer博士（S.L.A.）部分受美国国立卫生研究院（U.S. National Institutes of Health, NIH）基金项目NIH 1R01HL113003-01A1和NIH 2R01HL071115-08、加拿大创新基金会（Canada Foundation for Innovation）、加拿大卓越教授计划（Tier 1 Canada Research Chair）线粒体动力学与转化医学方向（Mitochondrial Dynamics and Translational Medicine）、William J. Henderson基金会、加拿大血管网络（Canadian Vascular Network）以及女王大学心肺单位（Queen's Cardiopulmonary Unit, QCPU）的支持。
作者感谢日本医科大学医学部学术信息中心摄影服务部负责人小久保正先生拍摄本视频。

LAS实验方案已获得济生会医科大学动物护理委员会和大学研究与伦理委员会的批准（方案编号 #2015-118）。
1. 术前准备
<ol>
	<li>到达动物房后，让5周龄、体重在150至200 g之间的雄性Sprague Dawley大鼠适应新环境1周，然后再进行手术操作。</li>
	<li>术前将以下设备通过高压灭菌进行准备：1）小型动物呼吸机，2）麻醉机，3）插管包（包括一对止血钳、舌压板和18 G套管针），4）外科手术器械（包括一对弯头镊子、一对直头镊子、持针器、胸腔牵开器、剪刀、5-0单股缝合线、施夹器、中大型止血夹和23 G胸腔引流管）。</li>
	<li>准备好无菌棉签和纱布，以应对术中出血。</li>
	<li>手术过程中使用加热垫维持动物体温在约37 °C。</li>
</ol>
2. 麻醉与气管插管
<ol>
	<li>将大鼠置于诱导室中，使用5%异氟烷与2 L/min的室内空气混合进行麻醉。</li>
	<li>插管前，使用剃毛器剃除大鼠胸部毛发，并涂抹脱毛膏以去除细小毛发。</li>
	<li>插管前检查大鼠的足底反射，以确认麻醉成功。</li>
	<li>用一根细线钩住大鼠的门齿，并用两枚图钉固定细线。</li>
	<li>使用止血钳打开大鼠口腔，并将压舌板插入其口中。</li>
	<li>抬起压舌板以观察声带。 
	注意：在大鼠头部区域使用强光照射有助于清晰观察声带。</li>
	<li>将18 G套管针作为气管内导管插入气管，随后迅速将其连接至呼吸机。</li>
	<li>设定潮气量为每克体重10 µL，呼吸频率为每分钟100次。</li>
	<li>以2%异氟烷与2 L/min的室内空气混合维持麻醉状态。</li>
</ol>
3. 手术部位的准备
<ol>
	<li>用氯己定和酒精交替擦洗手术部位3次。</li>
	<li>皮下注射0.01 mg/kg的丁丙诺啡。</li>
	<li>用无菌巾覆盖大鼠。</li>
	<li>检查足底反射，以确认插管成功并维持麻醉状态。</li>
</ol>
4. 左心房狭窄手术
<ol>
	<li>用直尺在大鼠左侧腋窝下方2 cm处标记切口位置。</li>
	<li>用剪刀在左侧胸部外侧壁做一个2 cm的切口。</li>
	<li>使用直镊和弯镊分离第四与第五肋骨之间的肋间肌，直至进入胸腔。</li>
	<li>将胸腔拉钩插入胸腔内，继续使用直头和弯头镊子分离肋间肌，以直接暴露胸腺和心脏。</li>
	<li>用一对直镊子提起胸腺。用剪刀将覆盖在心脏上的胸腺组织剪除。注意避免剪伤或刺破任何主要血管。</li>
	<li>用5-0单丝缝线小心穿过左心室表面，位置位于左心耳下方，避免穿刺主要冠状动脉。</li>
	<li>缝线就位且无明显出血后，打一个松结。</li>
	<li>将缝合线向上前方牵拉，以将心脏从胸腔中提起。</li>
	<li>心脏从胸腔取出后，立即在二尖瓣上方的左心房处夹上一个中大型夹子。 
	注意：夹子处于半闭合状态，其尖端夹住左心房，导致左心房狭窄。</li>
	<li>迅速将心脏放回胸腔，确保心脏在胸腔外的时间不超过30秒。</li>
	<li>移除用于提起心脏的固定缝线。</li>
	<li>使用5-0单丝缝线，以单纯间断缝合法关闭胸腔。</li>
	<li>将连接10 mL注射器的23 G胸管插入胸腔，然后使用单纯间断缝合关闭胸壁肌肉和皮肤。</li>
	<li>抽出任何空气、血液和胸腔积液 通过 使用连接的10 cc注射器抽吸插入的胸腔引流管，然后拔出导管。</li>
	<li>使用5-0单股缝线，以单纯间断缝合方式闭合皮肤层。</li>
	<li>皮下注射0.01 mg/kg的丁丙诺啡。</li>
	<li>关闭异氟烷。</li>
	<li>观察到自主呼吸后，断开呼吸机。</li>
	<li>保持大鼠插管状态，并将其置于加热垫上恢复，直至苏醒。</li>
	<li>在观察到以下一项或多项体征后，安全地拔除大鼠的气管插管：大鼠开始活动四肢、恢复翻正反射、恢复咽反射，或出现自主排空行为。</li>
</ol>
5. 术后护理
<ol>
	<li>每8至12小时皮下注射一次丁丙诺啡，剂量为0.01 mg/kg。术后连续两天每日皮下注射卡洛芬5 mg/kg，之后根据需要给予，若大鼠活动不佳且表现出疼痛迹象。</li>
	<li>手术后立即皮下注射5 mL生理盐水，因为大鼠在术后初期可能难以通过饮水管正常饮水。</li>
</ol>
6. 通过超声心动图确认左心房狭窄手术的成功
<ol>
	<li>术后2周进行经胸超声心动图检查，以测定左心室流入道血流速度。</li>
	<li>按照第1节所述步骤对大鼠进行麻醉。</li>
	<li>麻醉诱导后，通过鼻罩维持麻醉，使用2%异氟烷与2 L/min室内空气混合气体。</li>
	<li>使用剃毛器剃除大鼠胸壁毛发，并用脱毛膏清除残留毛发。</li>
	<li>将超声探头置于心脏心尖部，即左侧胸壁第五肋间区域。在此区域内移动探头，直至获得清晰的四腔心切面图像。</li>
	<li>采用脉冲波多普勒模式，在二尖瓣环上方测量左心室流入道血流速度。</li>
	<li>左心室流入道血流速度大于2.0 m/s时，可在LAS手术后8–10周成功建立中度肺动脉高压模型。</li>
</ol>
7. 假手术操作
<ol>
	<li>除应用夹子（步骤 4.9）外，执行上述所有步骤以制备年龄匹配的假手术对照（SOC）大鼠。</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

LAS大鼠是一种新型的2型肺动脉高压（PH）模型，已引起领域内研究人员的广泛关注12,13。与现有的两种2型PH模型——即使用仔猪的肺静脉狭窄（PVS）模型14和冠状动脉上主动脉缩窄（SAB）大鼠模型8,9,10——相比，LAS大鼠模型具有多项优势。与PVS仔猪模型相比，LAS大鼠模型的构建成本更低，且在大鼠中进行的手术操作比在仔猪中更简单。与目前最常用的2型PH动物模型SAB大鼠模型相比，LAS模型中2型PH的病理生理机制更为直接，因为在SAB模型中，主动脉缩窄首先导致左心室功能衰竭，继而才引起肺淤血和肺动脉高压。LAS模型与SAB模型在啮齿类动物中很可能互为补充，有助于更深入地理解2型PH的病因学。
LAS 手术中最关键的两个步骤...

本文的目的是演示在大鼠中进行左心房缩窄术（LAS）的逐步操作流程。通过手术诱导产生的LAS在人类中与二尖瓣狭窄（MS）和三房心具有高度相似性，其特征是在左心房内制造机械性梗阻1。左心室（LV）流入道的梗阻常导致肺静脉循环淤血，患者会逐渐发展为肺动脉高压（PH）。世界卫生组织将由左心疾病引起的PH归为第2类，这是PH中最常见的类型2,3,4。在患有左心疾病的患者中，若合并PH，其1年标准化死亡率将增加七倍以上4。目前，除治疗基础左心疾病（例如，通过手术置换狭窄的二尖瓣）外，尚无获批用于第2类PH的特异性疗法。然而，即使成功实施二尖瓣置换术，在多达一半的MS患者中PH仍无法完全缓解5。这种持续存在的PH源于不良的肺血管重构，但其机制尚不明确。因此，动物模型对于深入理解第2类PH中肺血管不良重构的分子机制至关重要。
目前存在少数几种用于研究2型肺动脉高压（PH）的动物模型。在啮齿类动物中，冠状动脉结扎6,7和横主动脉缩窄8,9,10是最常用的2型PH动物模型。这些模型的主要缺点是涉及左心室（LV）的损伤，使得2型PH研究结果难以解释。相比之下，在LAS模型中，左心室功能保持完整。此外，LAS模型具有临床相关性，因其可在10周内逐步、渐进地诱导PH的形成11。在人类中，若经二尖瓣多普勒血流速度超过2.0 m/s，则认为二尖瓣狭窄（MS）具有临床意义11；我们亦采用该数值作为临界值，以判断LAS手术是否成功诱导了显著的狭窄。此外，尽管LAS模型仅诱导轻度或中度PH，但其表现出与人类患者相似的典型组织学改变，即肺内静脉动脉化11。LAS大鼠模型是一种新型且具有临床相关性的2型PH模型，其左心室功能得以保留。该模型适用于研究持续性肺血管重构的病理生理机制、识别潜在的分子靶点，并测试针对2型PH的新型治疗方法。

<table><tbody><tr><td>5-0 Prolene 缝线</td><td>Johnson &amp;amp; Johnson - Ethicon</td><td>8725H</td><td>带 HEMO-SEAL 技术的聚丙烯缝线</td></tr><tr><td>麻醉机</td><td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A</td><td>空气泵和麻醉机</td></tr><tr><td>血管导管导丝</td><td>自制</td><td></td><td>将 10 cm 导丝粘接到 1 cc 注射器上&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>胸腔牵开器</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>23G 胸腔引流管</td><td>自制</td><td></td><td>将 10 cc 注射器连接至 23G 针头并加装塑料管</td></tr><tr><td>弯头止血钳</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>加热垫</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>维持体温在 37 摄氏度</td></tr><tr><td>Horizon 结扎夹</td><td>Teleflex</td><td>REF 003200</td><td>中-大号</td></tr><tr><td>Horizon 手动装夹中-大号结扎夹施夹器</td><td>Teleflex</td><td>REF 337085</td><td>带角度钳口的结扎夹施夹器（20 cm）</td></tr><tr><td>持针器</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>啮齿类动物呼吸机</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830/P</td><td>小型动物呼吸机</td></tr><tr><td>剪刀</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>直剪刀，理想情况下带圆头</td></tr><tr><td>直头止血钳</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>压舌板</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>使用宽端</td></tr></tbody></table>

大鼠左心房狭窄诱导的肺静脉动脉化及2型肺动脉高压

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

二尖瓣狭窄引起肺静脉动脉化及第2类肺动脉高压（PH）的机制尚不明确。由于缺乏由二尖瓣狭窄（MS）导致的第2类PH啮齿类动物模型，相关疾病机制及潜在治疗策略的研究受到限制。本文介绍一种新型大鼠模型，该模型通过左心房狭窄（LAS）引发肺静脉充血，进而导致肺静脉动脉化和第2类PH。LAS通过使用半闭合钛夹缩窄左心房实现。LAS手术后，经超声心动图检测，二尖瓣跨瓣流入速度大于或等于2.0 m/s的大鼠在8至10周内逐渐发展出肺静脉动脉化和第2类PH。本方案详细阐述了实施LAS手术的逐步操作流程。该LAS大鼠模型模拟了人类二尖瓣狭窄的病理特征，可用于研究肺静脉动脉化的分子机制，并为第2类PH的治疗策略提供临床前评估平台。

术后2周通过超声心动图确认LAS的有效性。采用四腔心切面测量，左心室流入道血流速度大于2.0 m/s的大鼠被认为已形成显著性狭窄（图1），并在LAS手术后8至10周稳定发展为中度肺动脉高压及肺静脉动脉化。
LAS 手术后 10 周，LAS 组大鼠出现左心房扩大（图2B），肺充血（图2E），右心室（RV）压力超负荷（图2F)，以及肺静脉血流增加（图 2F,G）与 SOC 组大鼠相比（图 2A-E。LAS组的右心室收缩压也显著升高 <e...

左心房狭窄（LAS）是一种用于研究2型肺动脉高压（PH）及肺静脉动脉化机制的新型外科技术。本文中，我们介绍了一种使用钛夹缩窄大鼠左心房以诱导肺静脉动脉化并形成中度肺动脉高压的实验方案。

二尖瓣狭窄所致肺静脉动脉化及2型肺动脉高压（PH）的机制尚不明确。目前尚无……的啮齿动物模型

感谢您观看我们的视频。我是来自日本东京顺天堂大学医学院的Susumu Minamisawa。我们的研究涉及由大鼠心脏病引起的动物肺动脉高压，该类型被归类为第二组肺动脉高压。世界卫生组织将肺动脉高压分为五类。左心房狭窄大鼠是第二类肺动脉高压的动物模型，第二类肺动脉高压是肺动脉高压中最常见的类型，目前尚无针对此类肺动脉高压的获批疗法。在本视频中，我们将演示如何在大鼠中逐步实施左心房狭窄手术。通过手术建立的右心房狭窄可模拟人类二尖瓣狭窄。我们利用该模型研究二型肺动脉高压的机制与可能性。现在开始。手术前准备以下设备：小动物呼吸机和麻醉机。孵育套件包括一对止血钳、压舌板和18号套管针。手术器械包括一对弯头镊子、一对直头镊子、持针器、胸腔牵开器、一把剪刀、5-0单股缝线、施夹器、中大型止血夹和23号胸腔引流管。将大鼠置于诱导室中，使用浓度为5%的异氟烷与流速为2升/分钟的室内空气混合进行麻醉。在插管前剃除胸部毛发，并涂抹脱毛膏以去除剃毛后残留的细小毛发。用一根线钩住门牙，并将线固定在针上。固定好线后，用止血钳张开口腔，将压舌板插入嘴中。抬起压舌板以观察声带。将18号套管针作为气管插管插入气管，然后迅速将套管针连接至呼吸机。设置潮气量为10 µL/g，呼吸频率为每分钟100次。以2%异氟烷与每分钟2 L的室内空气混合维持麻醉。用氯己定和酒精交替擦拭手术部位进行消毒。皮下注射0.1毫克/千克的丁丙诺啡。用无菌巾覆盖大鼠。手术前检查足底反射，以确认麻醉成功。在腋窝下方两厘米处标记切口位置。使用剪刀在左侧侧胸壁做一长度为两厘米的切口。使用直头和弯头镊子小心地分离第四与第五肋骨之间的肋间肌，直至进入胸腔。将胸腔牵开器插入胸腔内，用力张开胸腔牵开器，使第四和第五肋骨分开约一厘米。用一把直镊子轻轻提起胸腺。用剪刀小心地将覆盖在心脏上的胸腺组织去除。在左心耳下方的左心室表面，小心地穿过一根5-0单丝缝合线。应注意避免将针穿过主要冠状动脉。缝线放置到位后，若无明显出血，打一个松结。将缝线向上前方提起，以将心脏从胸腔中拉出。将心脏迅速移出胸腔后，立即在二尖瓣上方的左心房处夹上一个中等偏大的夹子。小心移除用于提起心脏的固定缝线。开始使用5-0单股缝线以单纯间断缝合法关闭胸腔。将连接10 mL注射器的23号胸腔引流管插入胸腔，然后进行关胸操作。使用连接的10 mL注射器抽出靠近插入胸腔引流管处的空气、血液及胸膜积液。当无液体流出时，拔出导管。使用5-0单股缝线以单纯间断缝合方式闭合皮肤切口。移除外科铺巾。皮下注射0.1毫克/千克的丁丙诺啡。关闭异氟烷。当大鼠开始苏醒时，将其取出。术后两周采用超声心动图确认左心房狭窄手术的成功。通过术后两周的超声心动图检查确认左心房狭窄的有效性。在四腔心切面测得左心室流入道血流速度大于2米/秒的大鼠被认为已形成显著的狭窄。左心房缩窄手术后10周，与假手术组大鼠相比，LAS组大鼠出现左心房扩大、肺淤血、右心室压力超负荷以及肺静脉血流增加。此外，左心房缩窄组的右心室收缩压显著高于假手术组。然而，两组之间的左心室收缩压保持相同。经弹性Van Gieson染色的肺组织长横切面组织学检查显示，左心房狭窄组与假手术组相比，肺动脉和肺静脉中膜增厚。左心房狭窄组肺静脉直径增大，染色结果显示，与对照组相比，左心房狭窄组的肺动脉和肺静脉中平滑肌细胞数量增加。希望您喜欢观看本视频。尽管手术相对简单，但在对左心室进行缝合时应小心操作，避免损伤主要的冠状动脉。提起心脏时，应将缝线向上（朝向大鼠头部方向）牵拉，以便清晰地观察左心房及其走行结构。在对左心房施加夹闭时，夹闭的松紧程度应足以引起明显的左心房狭窄，但不可过紧，以免诱发急性肺水肿和右心衰竭。感谢观看本视频。祝您的实验顺利。

left-atrial-stenosis-induced-pulmonary-venous-arterialization-group-2

Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

左心房狭窄致大鼠肺静脉动脉化及第2组肺动脉高压

通过逐步阻塞肺动脉，在仔猪中诱导出慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）和右心室（RV）功能障碍。其表现与CTEPH患者中观察到的情况极为相似。该动物模型对于开展CTEPH及右心室衰竭的病理生理学和治疗研究将是一个非常有用的工具。...

慢性血栓栓塞性肺动脉高压及仔猪右心室功能评估

肺动脉高压（PAH）是一种累及肺小动脉的疾病，可导致肺小动脉闭塞并引发右心室衰竭。啮齿类动物PAH模型对于理解PAH的病理生理机制至关重要。本文展示了在小鼠和大鼠中通过右心导管术和超声心动图进行血流动力学表征的方法。...

肺动脉高压啮齿类动物模型的血流动力学表征

本方案描述了一种在大鼠中建立血流诱导肺动脉高压（PAH）模型的手术方法，以及分析该模型主要血流动力学和组织学终点的实验步骤。...

分流手术、右心导管检查及血管形态测量在血流诱导型肺动脉高压大鼠模型中的应用

我们介绍一种在大鼠中诱导右心室肥厚和心力衰竭的手术方法。...

一种肺动脉干缩窄压力超负荷诱导右心室肥厚与衰竭的模型

啮齿类动物左肺切除术是肺动脉高压研究中一种有价值的技术。本文介绍了一种大鼠肺切除术的操作方案及术后护理方法，以确保最低的发病率和死亡率。...

左全肺切除联合野百合碱或Sugen建立大鼠肺动脉高压模型

本文提供了一种研究右心室衰竭机制的有效方法。通过使用自制的手术器械，建立了一种更为简便且高效的肺动脉缩窄方法。此外，还提供了利用超声心动图和导管插入术评估该方法质量的技术。...

通过肺动脉缩窄诱导小鼠右心室衰竭及右心室功能评估

我们描述了一种由压力超负荷诱导产生中度心室重构和早期收缩功能障碍的大鼠模型，该模型可激活参与重构过程起始阶段的信号转导通路。该动物模型将有助于识别心力衰竭早期治疗性抗重构策略的分子靶点。...

一种由压力超负荷诱导的中度心室重构和收缩功能障碍大鼠模型，区别于明显的收缩性心力衰竭

本方案描述了一种手术方法，用于移除因左心疾病导致肺动脉高压的大鼠模型中的升主动脉缩窄。该技术旨在研究肺循环和右心的内源性逆向重构机制，从而为逆转肺动脉高压和/或右心室功能障碍的策略提供依据。...

通过大鼠主动脉解缩窄建立左心疾病所致肺动脉高压的血管逆向重塑模型

本方案描述了在肺动脉高压大鼠模型中，对右心室形态和功能进行超声心动图表征的方法。...

肺动脉高压大鼠模型中右心室功能的全面超声心动图评估

右心衰竭（RHF）的特征是右侧心脏扩张和肥厚，导致心室和心房功能障碍。伴有RHF的 cardiopulmonary...

利用肺动脉束带术建立大鼠右心重构与心律失常模型

本文介绍了通过向气道注射博来霉素建立与肺纤维化相关的肺动脉高压（PF-PH）大鼠模型的方法。同时提供了对该动物模型进行验证的逐步操作流程。...

建立并验证与肺纤维化相关的肺动脉高压大鼠模型

学习在大鼠中进行左心房狭窄手术以建立第2组肺动脉高压模型的详细步骤。该视频演示了使用钛夹诱导肺静脉动脉化的完整手术流程，为研究肺动脉高压机制提供了可重复的动物实验方法。

大鼠左心房狭窄诱导的肺静脉动脉化及2型肺动脉高压

探索更多视频