使用大西洋鲑鱼锌示例证明的补充方法评估鱼类饲料中的矿物供应情况

我们研究了不同化学形式或来源的微金属（如锌）的溶质性，我们称之为在饲料成分变化的背景下。在放射性核素套件中，称量约0.2克的大西洋鲑鱼饲料样品，并将其与已知特定活性的锌放射器混合在5毫升体积的样品管中。准备缓冲器的其他六个碱性，并添加此处显示的氨基酸之一，以达到五毫摩尔的最终摩尔浓度。

添加淡水肠道发光缓冲器来喂养样品。接下来，将淡水肠道发光缓冲器添加到含有氨基酸的缓冲液中。关闭管子，在 25 RPM 的旋转微调器上旋转 30 分钟。

然后，离心机在 1，157 x g 下 10 分钟，将可溶性和非可溶性分数分开。使用伽马出纳器测量可溶性和非可溶性分数中锌射电器每分钟的计数。用一毫升EDTA溶液清洗虹鱼衍生肠道细胞线两次，每次洗涤后用移液器吸出溶液。

用0.25%的试金素溶液治疗被洗过的细胞。以锐角轻轻旋转烧瓶两分钟。然后加入10毫升L-15介质含有5%FBS中和试用素。

使用无菌移液器，将产生的细胞悬浮液倒入圆锥形底部离心机管中。离心机在 130 x G 三分钟。然后使用血细胞计，通过人工计数确定收获细胞的密度。

在实验前48小时，以每毫升5万细胞的细胞密度将细胞播种到24个井板上，并在正常大气下在19摄氏度下孵育这些细胞。喂鱼11天并安乐死后，从腹鳍剥到肛门，并将其放在盘子里，收集鱼粪的汇集样本。使用铲子将粪便从盘子转移到50毫升圆锥管中。

立即将样品储存在摄氏20度。在这项研究中，使用一些免费方法评估鱼饲料的矿物供应情况。通过大小排除色谱电感耦合等离子质谱法对大西洋鲑鱼饲料进行代表性分析，提供可溶性分数中发现的锌化学物种的数据。

在这个分数中可以看到五个含有峰值的锌，每个锌的分子量都不同。在可溶性部分中发现的锌化学物种可能有不同的来源，因为使用的饲料含有海洋基和植物基成分，并辅以。这些物种的分子重量范围表明，这些化合物可能是金属蛋白。

虽然补充锌65的溶解性增加了所有测试氨基酸的存在，但与他汀和赖氨酸一起发现较高的溶解性。阿尔泰卡GC细胞中的阿皮卡锌吸收受到L-Met或DL-Met在两毫摩尔浓度下存在的显著影响。此外，甲氨酸对锌吸收的影响受到BCH存在的负面影响。

此协议的主要优点是，我们尝试结合视觉、分析和活体研究中的不同方法，在研究矿物可用性方面相互比较和称赞。