为铁氧化还原物种（Fe（II）、Fe（III）定量设置毛细管电泳-电感耦合等离子体质谱仪（CE-ICP-MS）

这种铁氧化氧光谱法基于毛细管电泳-电感耦合等离子质谱法，样品堆叠与短分析相结合。该方法可快速分析铁氧化还原物种的定量限制，用于各种组织和生物流体样品。

过量的铁会导致自由氧化-活性铁2+，可对细胞内造成破坏性影响，如氧化应激和细胞死亡脂质过氧化称为铁质中毒。铁铁和铁铁的定量测量是更深入地了解这些有害工艺的关键。这种CE-ICP-Ms技术提供:快速分析和低定量极限，这两者都是量化铁-氧化还原物种所必需的。

首先选择自吸气量低的雾化器，并准备适当的部件来安装自制的界面。通过将下三向凸道杆的左端连接到公连接器，将两个三向母 luer 连接器与公锥形 luer 连接器连接，将公三向 luer 连接器连接到上部三向 luer 的中间连接。接下来，在铂丝上放一厘米的管子，用一厘米的硅胶管连接第一管和公路连接器的喷嘴。

通过螺钉旋转将组件固定到下部三向凸线连接器的中间连接。将一厘米长管推到 CE 毛细管的插座上，从末端向 8 到 9 厘米的位置，然后用硅胶管将其连接到公凸接头的喷嘴上。将整个组件穿过上部三向 T 连接器的杆，并通过螺钉旋转固定母凸道连接器和母三向 luer 连接器的左端。

然后将 25 厘米硅胶管固定在公 luer 连接器的喷嘴上，然后从下部三向引诱连接器将整个组件固定到杆的底部。紧推一厘米硅胶管，雾化器末端五毫米。当第二个公凸锥形连接器插入管的突出部分时。

将凸出的 CE 毛细管的接口部分移动到雾化器的公锥体，然后小心地将毛细管插入通过公锥体和雾化器毛细管的较宽部分。如有必要，通过拧开左侧公凸，将带连接管的凸出毛细管的凸出毛细管长度移动到所需位置并重新安装。上部母三向凸道连接器应紧贴于公锥体。

完成设置后，请继续使用 ICP-Ms。为铁三和铁两个氧化还原物种创建校准曲线。检测的限值为铁2升3.1微克，铁三每升3.2微克，线性度显示高达每升150微克。

对SH-SY5Y细胞莱赛特的分析表明，由于电导率稍高，铁氧化还原物种的迁移速度稍慢。测得的铁三和铁二的浓度分别是每升330微克和84微克/升。导致铁2比3比0.25。

该协议最重要的步骤是通过安装的接口小心插入突出的CE毛细管，其与雾化器毛细管相关的适当定位。这里介绍的方法可能成为一个有希望的工具，加深对铁依赖分子过程的洞察力。需要精心设计的研究来验证铁二加、铁三加定量是否可作为潜在的生物标志物，以查明在神经退行性疾病和癌症疾病背景下存在铁介质致命损伤风险的组织。