Name: 驯养猪脑的提取和解剖 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: 学习猪脑完整提取与解剖的标准化操作流程，掌握使用屠夫刀、肉钩和手术刀等工具进行安全开颅和脑区分离的技术。该方法适用于神经解剖学研究和脑组织样本保存。

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作者谨此感谢农学、消费者与环境科学学院信息技术与通信服务部门的 Jim Knoblauch 和 Martin-Booth Hodges，感谢他们在音频和视频的拍摄、录制与编辑方面提供的专业技术支持。

涉及动物受试者的实验程序已获得伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准
注意：在实施安乐死前，通过肌肉注射给予猪混合麻醉剂（替来他明盐酸盐50.0 mg与唑拉西泮盐酸盐50.0 mg，用2.50 mL盐酸氯胺酮（100 g/L）和2.50 mL赛拉嗪（100 g/L）重悬，按0.06 mg/kg体重剂量给药）。待猪完全麻醉后，通过心内注射戊巴比妥钠（390 mg/mL，按1 mL/5 kg体重剂量）实施安乐死。进行脑组织解剖时，建议根据后续组织分析方法选择适当的安乐死方式，应尽可能减少对脑组织的损伤。
1. 猪脑的提取
<ol>
	<li>实施人道安乐死后，在颈部后方、第一与第二颈椎（分别为寰椎和枢椎）之间进行切割，将猪头切除。</li>
	<li>将头部固定在经过改装、带有尖刺的台钳上，确保头部完全固定后再继续操作。
	<ol>
		<li>使用手术刀沿颅骨正中线做矢状切口，切口向后延伸至头部后端。</li>
		<li>在头部后端做第二个（横向）切口。</li>
		<li>在吻部末端、与眼睛齐平的位置做第三个（横向）切口。尽可能远离颅骨切割皮肤，以确保充分暴露颅骨。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用骨锯在颅骨正中线两侧做两条从前向后的纵向切口，切口从眼睛延伸至颅骨曲率的顶点。将锯片向中线方向倾斜，切割深度以刚好穿透颅骨为宜。
	<ol>
		<li>在垂直方向重复上述操作，在颅骨上形成一个矩形的&#34;窗口&#34;。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用肉钩将颅骨上的矩形部分撬开。先将钩子插入该区域的一个角部，施加向上的压力以松动颅骨片。操作时需确保肉钩仅作用于颅骨层面，避免意外刺入脑组织。</li>
	<li>若脑表面仍有脑膜残留，使用镊子和钝头剪刀（或手术刀）轻轻去除脑膜，注意不要切破脑组织。</li>
	<li>使用手术刀切除头部后部的肌肉和脂肪组织，暴露颅骨后部区域。
	<ol>
		<li>沿颅骨后部做两个横向切口，注意不要切及脑组织。</li>
		<li>用手牢固按住吻部，向后施力，将颅骨后部掀开，暴露小脑。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将头部从台钳上取下，放置于手术垫上。</li>
	<li>使用细长工具（如手术刀的钝端）取出脑组织。将头部倒置，轻柔地以舀取动作将脑组织从颅腔中取出，避免损伤脑表面。 
	&#8203;注意：取出脑组织时需切断颅神经。操作应轻柔，切勿强行拉扯。当脑组织与颅骨及脊柱完全分离后，其将自然脱落。</li>
</ol>
2. 猪脑解剖
注意：在解剖过程中，使用脑图谱或纤维束解剖指南14作为视觉参考可能会有所帮助。每次取出样本后，务必根据具体项目需求妥善保存已解剖的组织样本（下文将更详细描述）。此外，请注意，本视频中展示的所有脑区均来自右侧半球，但不同实验室可能根据实验目的选择不同半球。
<ol>
	<li>为去除脑干（主要是延髓），在小脑尾侧进行冠状切面切割。</li>
	<li>为去除小脑，在大脑皮层后方进行冠状切面切割。从此样本中分离出所需的小脑区域（例如蚓部、绒球等），注意确保样本中不包含任何脑干组织。</li>
	<li>沿大脑纵裂进行正中矢状切口，以分离大脑的两个半球。切割时应保持连续动作，避免对皮层造成损伤。</li>
	<li>为去除中脑，从中脑上丘和下丘腹侧区域解剖获取所需量的组织。</li>
	<li>为去除海马体，将解剖刀钝端置于胼胝体后部，从胼胝体后部开始以&#34;J&#34;形动作轻柔地将海马体卷出；完整的海马角呈“豆形”。</li>
	<li>纹状体（主要显示尾状核）位于胼胝体下方、海马体前方，是一个灰质与白质相间条纹状的区域。将解剖刀倾斜，切除该区域，切除后可观察到条纹状组织。</li>
	<li>为去除内侧前额叶皮层，从前额回至胼胝体方向解剖组织，移除该区域最内侧的部分。去除内侧前额叶皮层后，右侧皮层应予以保留。</li>
	<li>为去除丘脑，从中脑前方、脑正中矢状面中心处移除一个球状结构。丘脑呈球形，颜色略深于周围组织。</li>
</ol>
3. 解剖后处理
<ol>
	<li>解剖完成后，应妥善保存组织样本，以便后续分析。若省略此步骤，组织可能在短短20分钟内发生显著的自溶和降解。</li>
	<li>若需进行结构分析，应在解剖时保持各脑区完整；若需制备均一组织样本，则可在保存前将组织剪碎。脑组织常用的保存方法包括冷冻保存以及使用交联剂进行化学固定15。</li>
	<li>对于常规实验室检测（如基因或蛋白表达分析），在长期储存于-80 °C前，应将样本浸入液氮或可稳定遗传物质的溶液中，以实现方便且经济的保存。</li>
	<li>若维持组织结构是首要考虑因素，可通过传统固定方法保存脑组织（例如使用醛类固定剂交联蛋白质），固定时可选择在解剖前对动物或目标器官进行灌注或不进行灌注。</li>
</ol>

<ol><li>Hughes, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swine+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Swine in cardiovascular research.</a> Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).</li>
<li>Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYen%2C+J+%22Biology+of+the+Domestic+Pig%22">Biology of the Domestic Pig</a>. , 31-63 (2001).</li>
<li>Pond, W. G. Of Pigs and People. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPond%2C+WG+%22Swine+Nutrition%22">Swine Nutrition</a>. , 3-24 (2001).</li>
<li>Odle, J., Lin, X., Jacobi, S. K., Kim, S. W., Stahl, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Suckling+Piglet+as+an+Agrimedical+Model+for+the+Study+of+Pediatric+Nutrition+and+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Animal+Biosciences%22%5BJournal%5D)">The Suckling Piglet as an Agrimedical Model for the Study of Pediatric Nutrition and Metabolism.</a> Annual Review of Animal Biosciences. 2 (1), 419-444 (2014).</li>
<li>Larsen, M. O., Rolin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+G%C3%B6ttingen+minipig+as+a+model+of+diabetes%2C+with+special+focus+on+type+1+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Göttingen minipig as a model of diabetes, with special focus on type 1 diabetes research.</a> ILAR Journal. 45 (3), 303-313 (2004).</li>
<li>Lehmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+minipig+in+general+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">The minipig in general toxicology.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 25, 59-62 (1998).</li>
<li>Richer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sacrococcygeal+and+transsacral+epidural+anesthesia+in+the+laboratory+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Radiologic+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Sacrococcygeal and transsacral epidural anesthesia in the laboratory pig.</a> Surgical Radiologic Anatomy. 20, 431-435 (1998).</li>
<li>Lind, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31 (5), 728-751 (2007).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+Human+Development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 311, 79-83 (1979).</li>
<li>Aurich, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+model+with+nonliving+swine+head.+Alternative+for+neurosurgical+education%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training model with nonliving swine head. Alternative for neurosurgical education.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 29 (6), 405-409 (2014).</li>
<li>Bassi, T., Rohrs, E., Fernandez, K., Ornowska, M., Reynolds, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+brain+excision%3A+An+easier+method+to+harvest+the+pig%27s+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Interdisciplinary+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Direct brain excision: An easier method to harvest the pig's brain.</a> Interdisciplinary Neurosurgery. 14, 37-38 (2018).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+pig+CNS+for+histological+analysis%3A+A+manual+for+decapitation%2C+skull+opening%2C+and+brain+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Exposure of the pig CNS for histological analysis: A manual for decapitation, skull opening, and brain removal.</a> Journal of Visualized Experiments. 122, e55511(2017).</li>
<li>Pascalau, R., Szabo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibre+dissection+and+sectional+study+of+the+major+porcine+cerebral+white+matter+tracts%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia%2C+Histologia%2C+Embryologia%22%5BJournal%5D)">Fibre dissection and sectional study of the major porcine cerebral white matter tracts.</a> Anatomia, Histologia, Embryologia. 46, 378-390 (2017).</li>
<li>McFadden, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+in+brain+banking%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation in brain banking: a systematic review.</a> Acta Neuropathologica Communications. 7, 146(2019).</li>
<li>Félix, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+atlas+of+the+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic atlas of the pig brain.</a> Brain Research Bulletin. 49, 1(1999).</li>
</ol>

作者声明不存在任何竞争性经济利益。

本文所述技术适用于约4周龄的猪。为确保脑组织结构的完整性（尤其是在考虑后续生化检测时），必须在猪被人道安乐死后立即进行这些操作步骤。初次学习这些技术时，使用脑图谱或白质纤维束16解剖指南会有所帮助。建议实验人员在正式采集样本用于数据分析之前，先进行多次脑组织提取和解剖练习。其中最具挑战性的步骤是去除颅骨。随着实践经验的积累，这一步骤将变得更容易，因为主要需要通过实际操作来掌握锯颅的位置以及判断颅骨是否已被完全切开。本操作流程与Bassi等12所描述的方法类似，但无需制作六边形颅窗，并提供了该技术操作的可视化教程。
该技术的一个局限性在于，当操作较年长的猪时，由于颅骨随年龄增长而显著增厚，可能需要更长时间才能去除颅骨。如果使用锯子处理较厚的颅骨过于费力或效果不佳，则可能需要改用锤子和凿子（如 Bjarkam 等人13 所示）或电动外科设备（例如骨锯）。此外，该技术并不总能确保完整获取嗅球。

猪已被充分记录并广泛接受为心血管系统研究中具有可转化性的动物模型1，消化系统2，营养3,4糖尿病5毒理学6，以及外科技术7. 随着在PubMed中以关键词进行检索的结果显示，猪在神经科学领域的应用正开始增加 &#34;猪脑动物模型&#34; 1996年至2005年期间的结果数量是此前10年期间的四倍8，目前还有更多研究结果。猪模型受欢迎程度不断上升的一个主要原因是，其大脑在生长、结构和功能方面与人类具有相似性。与人类大脑相比，猪大脑表现出相似的脑回模式、血管化特征以及灰质和白质的分布。9此外，猪脑已被用于神经影像学检查、诱发电位记录以及神经外科技术的建立。8,9与其他动物模型不同，猪和人类在围产期经历脑部生长激增，而并非产前或产后脑部生长激增。出生时，人脑和猪脑的重量分别约为成年脑重的27%和25%，而大鼠脑重仅为成年脑重的12%，恒河猴脑重则为成年脑重的76%10.
猪作为神经科学研究动物模型进展缓慢的原因之一，在于许多研究人员在这一背景下对猪并不熟悉。研究人员可能不了解猪在该领域的潜在用途，或不清楚使用此类模型所需掌握的正确技术。随着猪在生物医学和临床前研究中的应用日益受到关注，有必要建立标准化的组织取材流程，以确保不同研究间数据的准确比较。尽管已有文献报道过涉及猪脑的解剖和手术技术11,12,13，但仍缺乏简单且标准化的猪脑组织采集方案，尤其是在生化检测中的应用方面。因此，本视频旨在提供必要的知识，使研究人员能够执行标准化的脑组织提取与解剖操作。本视频将演示一种可保持大脑皮层和脑干完整性的猪脑取出技术，并随后介绍若干关键脑区的解剖方法。

<table><tbody><tr><td>#4 手柄用 #22 手术刀片</td><td>Ted Pella, inc.</td><td>549-4S-22</td><td></td></tr><tr><td>11 1/2&quot; 萨特利骨锯</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI13425</td><td></td></tr><tr><td>5 1/2&quot; 带凿端的碎颅器（肉钩）</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI37636</td><td></td></tr><tr><td>5 英寸重型工作台台钳</td><td>Pony</td><td>29050</td><td></td></tr><tr><td>25 cm 屠夫刀</td><td>Victorinox</td><td>5.7403.25</td><td>使用前需磨利</td></tr><tr><td>CM40 轻型锻压 C 型夹</td><td>Bessey</td><td>00655BC3120</td><td></td></tr><tr><td>金刚石磨刀器刀具修整器</td><td>Chef&amp;rsquo;s Choice</td><td>436-3</td><td></td></tr><tr><td>Shandon 不锈钢手术刀片手柄 #4</td><td>ThermoScientific</td><td>5334</td><td></td></tr><tr><td>组织镊</td><td>Henry Schein</td><td>101-5132</td><td></td></tr><tr><td>乙烯基解剖垫</td><td>Carolina</td><td>629006</td><td></td></tr></tbody></table>

家猪脑组织的提取与解剖

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

猪作为临床前及可转化的动物模型，已被心血管系统、胃肠道系统和营养学等研究领域充分记录并广泛接受，同时猪在神经科学领域也日益被用作大型动物模型。此外，由于猪的脑部生长和发育模式与人类相似，因此它被公认为研究神经发育的合适模型。然而，由于猪在神经科学研究中仍属较为少见的动物模型，研究人员可能对猪的外科手术和解剖操作相对陌生或缺乏实践经验。因此，制定一套标准化的可视化操作流程，详细说明一致性的脑组织提取与解剖方法，将为使用猪模型的研究人员提供重要帮助。本视频展示了一种在保留大脑皮层和脑干完整的前提下取出猪脑的技术，并介绍了对多个常被研究的脑区进行解剖的方法，包括脑干、小脑、中脑、海马体、纹状体、丘脑以及内侧前额叶皮层。本视频旨在为研究人员提供必要的工具与知识，使其能够对四周龄猪稳定地完成脑组织的提取与解剖操作。

本部分描述了在正确提取和解剖4周龄猪脑后获得的结果示例。图1展示了各个脑区的形态，可在解剖过程中作为参考指南。在移除小脑后，部分脑干可能仍残留在颅骨内（图1B），可在分离所需小脑区域时一并去除。表1列出了各解剖脑区的平均重量（均值 ± 均值标准误）（n=5）。
<img alt="大脑解剖示意图；显示脑干、小脑、中脑及其他区域。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62030/62030fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图1"> 
图1：提取的猪脑。 脑区轮廓，用于解剖过程中的参考。所示区域来自右半球。 <a href="https://www.jo...

本方案详细介绍了完整取出猪脑并分离神经科学研究中常涉及的多个脑区的技术。

使用猪作为临床前及可转化的动物模型已在心血管研究领域得到充分记录和广泛认可……

以下视频演示了猪脑的取出与解剖过程。在操作前或操作过程中，参考脑图谱或纤维束解剖指南可能会有所帮助。使用一把较大的屠夫刀进行断头最为合适，因为它可以在寰椎与枢椎之间实现一次干净利落的切割。在开始处理新样本前，确保刀具锋利。使用肉钩取下颅骨。使用长而细的工具（如手术刀柄）将脑组织从颅骨中取出。使用带有螺钉或突起的固定钳对于在切割颅骨时固定头部是必要的。按照既定方案对动物实施人道安乐死后，按以下步骤操作：在颈部后方稍上方、肩部与头顶之间进行切割。固定猪只，并在断头过程中将耳朵移开。使用手术刀进行切口，以分离皮肤与颅骨。在颅骨中线处做初始切口，并向头部后方延伸。第二次横向切割应在头部后方进行。第三次切割同样为横向，从吻部后方开始，与眼睛齐平，以确保易于进入颅骨。使用骨锯在中线外侧进行从前到后的切割。首先用锯子轻轻标记切割区域，然后开始锯切，直至感觉到颅骨阻力减小。切割时将锯子略微向中线倾斜，以确保切割的是颅骨最薄的部分。如果切口过于靠近耳朵，则将难以移除颅骨。但如果切口过于靠近中线，则开口会过小，无法取出脑组织。以相同方式在垂直的两侧重复此操作，形成一个矩形窗口。确保窗口的每个角落都已完全切断，以便移除部分颅骨，暴露出下方的脑组织。接下来，使用肉钩或弯曲器械将矩形颅骨部分撬离原位。首先将钩子插入其中一个角落，施加压力使颅盖脱开。在某些情况下，脑膜将保留在脑组织上。如果发生此情况，请小心使用镊子和钝头剪刀，或 alternatively 使用手术刀去除脑膜，同时避免损伤脑组织。作为参考，脑组织在去除脑膜前后应如下图所示。切开头部后方的肌肉和脂肪，以暴露小脑。为了暴露小脑，需沿颅骨后部做两个横向切口。进行这些切口时应注意不要损伤暴露的脑组织。切口完成后，将一只手放在吻部，另一只手放在颅骨上，施加向后的压力，将颅骨后部从头部其余部分拉开。如上所述，小脑位于其余脑膜层的后方。使用钝器（如手术刀柄）的末端小心地将脑组织与颅骨分离，注意避免在此过程中损伤脑组织。轻轻翻转头部以帮助脑组织脱离颅腔，并用轻柔的舀取动作切断脑神经，取出脑组织。此过程需要耐心和练习，以彻底清除大脑与颅腔之间所有残留的连接。在此过程中，将猪的头部倒置会有所帮助。继续使用钝器以 sweeping motion（扫动）操作，使大脑完全游离。如上所述，小脑和脑干可能较难取出，因为它们位于颅腔内部。在移除小脑和延髓（即脑干）时需格外小心。当脑组织完全与颅骨分离后，应可自行脱落。去除脑组织后，颅腔应呈现如图所示的外观。在准备进行脑区解剖前，应确保已预先标记的容器已整理妥当，并放置在附近。示例保存方法包括将样本在液氮中速冻，或将其浸入保存液中。 从颅腔中取出全脑后，其外观应如下所示。要移除延髓或脑干，需在小脑尾侧进行冠状切口。要移除小脑，需在大脑皮层后方进行冠状切口。为分离大脑半球，需沿大脑纵裂以连续动作进行正中矢状切开，以防止损伤。本视频仅展示右侧半球的解剖过程。为去除中脑，需寻找位于脑后部的上丘和下丘，二者为两个隆起结构。切除这些区域腹侧所需数量的脑组织。切除海马体时，将手术刀手柄置于胼胝体后部，轻轻将海马体滚出。整个海马角呈豆形。当用手指以J形动作从后部胼胝体开始刮取时，海马应能轻松地被刮出。要移除纹状体或尾状核，需清除胼胝体的前部区域。尾状核是位于胼胝体下方、呈灰白色条纹或带状的区域。将手术刀柄倾斜，切除主要包含尾状核的这一区域。切除该组织后，应能看到脑区原来所在位置呈现出条纹状结构。为切除内侧前额叶皮层，需从额上回向胼胝体方向解剖组织，并取该切片最内侧的部分。切除内侧前额叶皮层后，应保留右侧皮层。要切除丘脑，请移除中矢状面中心处类似球状的结构。丘脑具有明显的球形形态，颜色较周围组织略深。解剖完成后，应根据具体的实验目的对组织样本进行适当保存。图中显示了已解剖的脑区结构，包括使用幼猪时预期的相对大小和形态。掌握这些技术后，每个样本的全脑提取及解剖过程将可在15分钟内完成，并获得一致的结果。

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神经科学

驯养猪脑的提取和解剖

我们描述了一种创伤后应激障碍（PTSD）的大鼠模型，该模型揭示了神经内分泌功能的持续性改变以及延迟出现的长期过度恐惧反应，这些特征与PTSD患者的表现一致。本文所述的动物模型和方法可用于关联脑核团中的生物标志物（具有机制性意义但无法在患者中检测）与外周白细胞中的生物标志物（可检测）。...

用于揭示创伤后应激障碍神经、血液学及行为相关性的动物模型中的生物标志物

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制备幼年大鼠海马的器官型脑片培养

本视频展示了从海马组织中形成神经球并进行扩增的过程。出生后小鼠齿状回组织中的神经干细胞和前体细胞增殖并形成初级神经球，随后将其重新接种以形成次级神经球。...

从海马组织形成与扩增神经球

麻醉诱导的发育性神经毒性（AIDN）研究主要集中于啮齿类动物，而这类动物对人类的广泛适用性有限。非人灵长类动物模型的相关性更高，但成本过高且实验操作困难。相比之下，仔猪是一种具有临床相关性和实用性的动物模型，非常适合用于麻醉神经毒性研究。...

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本文及教学视频的目的是介绍如何完整暴露并摘除死后猪的脑组织和垂体腺，以获得适用于后续大体解剖学和组织学分析的完整标本。...

猪中枢神经系统的暴露用于组织学分析：一种关于断头、开颅和取脑的手法指南

本文介绍了一种从哺乳动物大脑皮层获取展平的切向切片，并利用组织化学和免疫组织化学方法可视化皮层功能模块的详细技术方案。...

展平哺乳动物皮层中的皮层模块可视化

本文介绍了一种快速、动手操作的逐步实验方案，用于小鼠脑组织的取出以及从新鲜脑组织中分离特定脑区。在许多神经科学研究实验室中，获取脑区用于分子分析已成为常规操作。这些脑区在分离后立即冷冻，以获得高质量的转录组数据，用于系统水平的分析。...

小鼠脑组织功能区与解剖区域的显微解剖

本文介绍了一种在猪小脑延髓池中直接植入导管的逐步操作方案。<br...

直接在猪的枕大池内植入导管

本文介绍了一种在小型猪模型中对柔性硬膜下电极阵列进行长期性能与安全性评估的方法，详细描述了手术方法与工具、术后磁共振成像、听觉皮层的电生理学特性、植入物的电化学特性以及死后免疫组织化学分析。...

皮层下柔性脑皮层电图（ECoG）阵列植入及小型猪长期皮层记录

本方案描述了使用高速气动钻在3月龄丹麦长白猪上进行开颅手术的操作过程。手术通路通过额骨，暴露腹侧硬脑膜及下方的大脑半球。该操作可实现对猪脑较大区域的暴露与接触。...

通过高速气动钻开颅术获取猪脑

本文介绍了一种创新的方法，用于构建可扩展的脑组织基质，以制备新生仔猪脑组织的冠状切片或矢状切片。该方法成本低廉，利用琼脂糖凝胶脑模的模板加工丙烯酸板，适用于多种物种，并可根据脑组织的生长进行扩展。...

可定制于不同发育阶段的可扩展脑基质的制备

学习猪脑完整提取与解剖的标准化操作流程，掌握使用屠夫刀、肉钩和手术刀等工具进行安全开颅和脑区分离的技术。该方法适用于神经解剖学研究和脑组织样本保存。

家猪脑组织的提取与解剖

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