2021年3月3日
本文描述了大鼠全身短时间体温过低诱导的两种方法。第一种快速感应方法,使用风扇和乙醇喷雾剂进行主动冷却,以快速降低温度。第二种方法是渐进冷却方法。这是通过异黄素麻醉和降低家庭热垫上的温度设置的组合实现的。这样,核心体温就会逐渐降低,而无需使用任何外部冷却设备。
逐渐冷却方案的冷却速度比目前的实验方法慢。此模型在临床上是相关的,因为瞄准温度的时间更接近人类范围。这些技术的主要优点是简单和廉价。
此外,这些型号不需要专业设备。从渐进模型获得的临床冷却率将允许更知情的临床前调查体温过低的好处,作为中风患者的治疗措施。首先,将麻醉大鼠放在手术热垫上,鼻子放在圆锥体中。
用手术带固定鼻子。从右下腹部剃掉毛皮,皮下注射200微升0.05%的布皮瓦卡因作为局部麻醉剂。将防腐剂溶液应用于刚剃光的区域。
沿着右腹部区域近处向右大腿进行两厘米的纵向切口,使其足够深,足以暴露腹腔大腿折痕处的空间,并使用造热器和钳子在皮肤下创建一个口袋,足够大,足以容纳数据记录器设备。将温度监测数据记录器设备插入口袋,并使用 5-0 缝合线关闭肌肉和皮肤,确保数据记录器不会靠在加热垫上。为了诱导活性体温过低,首先放置一个反驳站,从鼠头夹住20厘米,从下腹部夹住120厘米,并附加一个60毫米12伏风扇,每分钟至少旋转4000次,每个支架上都有瞄准老鼠下背部的风扇。
调整热垫到所需的目标温度,以启动体温过低,并打开两个风扇。在易感位置,每五分钟向大鼠下背部喷洒三到四次70%乙醇,同时擦毛皮以加快冷却感应,同时密切监测直肠温度。当直肠温度在目标温度的一度以内时,停止使用乙醇。
当温度在目标的 0.5 度以内时,关闭风扇,使温度缓慢下降至目标,而不会过度冷却。在过度冷却的情况下,用动物热灯更换一个风扇,并使用热灯将动物温和加热到目标温度。一旦达到目标温度并稳定下来,监测剩余体温过低期的温度。
在体温过低期结束时,将热垫设置为 37 摄氏度,并允许动物在 30 分钟内进行热调节。为了诱导临床上可以实现的逐渐性体温过低,将核心温度调节的家用热垫的温度以小增量降低,以便在特定预定时间段内达到体温过低。达到目标温度后,在没有任何外部冷却的情况下,保持所需间隔的目标温度。
要在体温过低期结束时重新加热动物,请调整热垫,让大鼠在所需的时间间隔内重新加热到 37 摄氏度。在完成这两种类型的体温过低实验后,移除数据记录器,以便分析记录的体温。在这项分析中,通过在15分钟内快速冷却到32.5摄氏度的目标温度,实现了体温过低。
由于未能阻止冷却,可以观察到比目标温度高出约 0.5 摄氏度的轻微温度超标。目标温度维持30分钟,1.5小时开始回暖。在这项实验中,采用逐渐体温过低的诱导方法,使目标温度在两个小时内达到33摄氏度。
目标温度维持30分钟,然后在2.5小时重新升温。逐渐冷却技术导致我们研究一个更临床相关的冷却率是否将防止颅内压力升高后缺血性中风大鼠。
本文展示了在大鼠中诱导短时程治疗性低温(TH)的两种方法,旨在弥合神经保护领域临床前研究与临床研究之间的差距。实验方案包括一种使用乙醇喷雾和风扇的快速降温技术,以及一种使用温度可控加热垫的渐进式、临床相关性降温方法。这些方法设计简便、成本低廉,且无需特殊设备,有助于推动在脑卒中等神经系统疾病背景下开展更具转化价值的研究。
治疗性低温研究中的转化鸿沟影响了临床前神经保护研究的预测可信度。本文所述的大鼠模型可直接比较快速且具有临床相关性的降温速率,有助于神经保护干预措施的机制去风险化和靶点验证。这些方案有助于研发团队更好地将临床前研究结果与临床试验设计及产品管线推进决策相衔接。
这些低温诱导模型连接了早期发现与临床前验证,有助于神经保护领域中的先导化合物筛选和转化研究。