Name: 成人斑马鱼的部分肝切除术 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-04T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: 了解成年斑马鱼部分肝切除术的标准化操作流程，利用Danio rerio模型研究肝脏再生机制。该方法通过精确切除腹侧肝叶，为再生生物学和肝病治疗研究提供可重复的技术平台。

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I.M.O. 由美国国家酒精滥用与酒精中毒研究所（NIAAA）资助（项目编号：F32AA027135）。W.G. 由以下项目资助：R01DK090311、R01DK105198、R24OD017870，以及 Claudia Adams Barr 癌症研究卓越计划。W.G. 是生物医学科学 Pew 学者。

斑马鱼的饲养和繁殖均按照标准操作程序进行。实验已获得布莱根妇女医院机构动物护理和使用委员会（2016N000405）的批准。成年斑马鱼在实验开始前禁食24小时。系统水指水产养殖设施中斑马鱼饲养箱内的水。
1. 准备与麻醉
<ol>
	<li>在系统水中配制0.016%的Tricaine溶液。 
	注意：Tricaine若接触眼睛、皮肤或呼吸道，可能引起刺激。</li>
	<li>准备一块海绵，用于在解剖过程中固定麻醉后的斑马鱼。将一整块海绵切成四等份。使用剃刀刀片，沿海绵块四分之一部分的长轴方向切去一条薄楔形部分。
	<ol>
		<li>切口应足够长以容纳成年斑马鱼（具体长度因鱼体大小而异）。例如，对于体长35 mm的成年鱼，切口长度应为20 mm。鱼的头部和身体被紧密固定在海绵中，而尾部则伸出海绵边缘（图1B）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将海绵浸泡在0.016%的Tricaine溶液中。</li>
	<li>将成年斑马鱼（雄性或雌性均可）放入625 mL的0.016% Tricaine溶液中。</li>
	<li>孵育6分钟，或直至鱼对触碰无反应。</li>
	<li>用镊子小心地将鱼从Tricaine溶液中取出，并将其腹面朝上放置于海绵的凹槽中（图1A - B）。</li>
	<li>将海绵置于体视显微镜下，并使用自上而下的照明。</li>
</ol>
2. 手术
<ol>
	<li>使用精细镊子在心脏后方中线位置夹住皮肤和鳞片（图1B）。</li>
	<li>使用弹簧剪刀在镊子下方剪开，于体腔上造孔（图1C - D）。注意避免损伤心脏或主要血管，否则将导致死亡率升高。</li>
	<li>使用弹簧剪刀沿腹部做3-4 mm切口，向后延伸直至切口到达腹鳍（图1D - E）。此时，肝脏的腹叶可能已通过切口可见。</li>
	<li>单手挤压海绵两侧，使内脏器官从体腔中挤出。此时肝脏腹叶将位于肠管上方（图1F，2A-B）。肝脏呈粉红色或橙色，覆盖于金褐色的肠管表面。被指定为假手术对照组的动物在此步骤后即进行恢复处理。</li>
	<li>闭合精细镊子，使两镊尖相互接触。在保持对海绵压力的同时，将精细镊子的镊尖插入肝脏与肠管之间（图1G）。注意避免刺破肠管，否则将导致死亡率升高。</li>
	<li>缓慢放松镊子压力，使两镊尖逐渐分开（图1H）。该滑动操作可切断肝脏腹叶与肠管之间的多条门静脉连接（图2B），是完整分离肝脏腹叶所必需的步骤。重复此操作，直至肝脏与肠管之间的所有门静脉连接均被切断。</li>
	<li>使用精细镊子将肝脏腹叶从肠管上剥离，并将其与肝脏其余部分分离（图1I）。</li>
	<li>该操作可实现约三分之一的肝部分切除术（图1J）。</li>
</ol>
3. 恢复
<ol>
	<li>小心地将鱼从海绵上取下，并放入装有系统水的水族箱中。</li>
	<li>用移液器将系统水缓慢滴加至鳃部数分钟，直至鱼能够自主游动（图1K）。</li>
	<li>手术后将鱼观察2–4小时后再放回系统中。手术后24小时内不得喂食。</li>
	<li>在整个实验期间每日观察鱼的状态。</li>
	<li>随着时间推移，体壁上的切口会自然愈合，无需缝合（图&#160;1L，2C）。</li>
</ol>
4. 腹叶与肠道长度分析
<ol>
	<li>将所有用于分析的动物置于冰水中处死，持续10分钟，直至所有鳃盖运动完全停止。</li>
	<li>将鱼从冰水中取出，腹面朝上放置于海绵的凹槽中。</li>
	<li>使用弹簧剪刀，在心脏所在前后位置的腹壁处做一切口，然后沿前后轴方向从该切口向腹鳍方向再做两个切口。（图2A）。</li>
	<li>掀开皮肤和肌肉，暴露内脏器官（图2A）。</li>
	<li>使用落射荧光显微镜获取内脏器官的明场和荧光图像。该视野应包含腹叶被切除的区域。由于动物在分析前已被处死，因此此类分析无法实现对同一条鱼的长期成像观察。</li>
</ol>
5. 肝脏与体重比值分析
<ol>
	<li>将所有用于分析的动物置于冰水中安乐死，持续10分钟，直至所有鳃盖运动完全停止。</li>
	<li>将鱼放入一个50 mL的锥形管中。</li>
	<li>向管中加入25 mL含4%多聚甲醛、1×PBS和0.3%吐温的溶液。 
	注意：甲醛具有毒性，含甲醛的溶液必须始终在化学通风橱中操作。</li>
	<li>在4 °C下振荡固定48小时。</li>
	<li>用1×PBS加0.3%吐温溶液进行四次洗涤，每次10分钟。</li>
	<li>用镊子取出鱼，用纸巾吸干表面液体。</li>
	<li>记录整条鱼的重量。</li>
	<li>使用弹簧剪刀，在心脏所对应的前后位置处沿腹部体壁做一切口，然后从该切口沿前后轴方向继续做两个切口，一直延伸至腹鳍处。（图2A）。</li>
	<li>掀开皮肤和肌肉组织，暴露内脏器官（图2A）。</li>
	<li>使用落射荧光显微镜拍摄肝脏的明场图像。</li>
	<li>解剖取出肝脏，并将肝脏组织置于称量舟中。</li>
	<li>记录肝脏的重量。</li>
</ol>

<ol><li>Michalopoulos, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+liver+regeneration+and+growth+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Principles of liver regeneration and growth homeostasis.</a> Comprehensive Physiology. 3, 485-513 (2013).</li>
<li>Wang, S., Miller, S. R., Ober, E. A., Sadler, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+it+new+again%3A+insight+into+liver+development%2C+regeneration%2C+and+disease+from+zebrafish+research%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Making it new again: insight into liver development, regeneration, and disease from zebrafish research.</a> Current Topics in Developmental Biology. 124, (2017).</li>
<li>Michalopoulos, G. K., Bhushan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%3A+biological+and+pathological+mechanisms+and+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Gastroenterology+and+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration: biological and pathological mechanisms and implications.</a> Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology. , (2020).</li>
<li>Gemberling, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Genetics%22%5BJournal%5D)">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends in Genetics. 29, 611-620 (2013).</li>
<li>Sadler, K. C., Krahn, K. N., Gaur, N. A., Ukomadu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+growth+in+the+embryo+and+during+liver+regeneration+in+zebrafish+requires+the+cell+cycle+regulator+uhrf1%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Liver growth in the embryo and during liver regeneration in zebrafish requires the cell cycle regulator uhrf1.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104, 1570-1575 (2007).</li>
<li>Goessling, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((APC+mutant+zebrafish+uncover+a+changing+temporal+requirement+for+wnt+signaling+in+liver+development%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">APC mutant zebrafish uncover a changing temporal requirement for wnt signaling in liver development.</a> Developmental Biology. 320, 161-174 (2008).</li>
<li>Dovey, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topoisomerase+II+is+required+for+embryonic+development+and+liver+regeneration+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biology%22%5BJournal%5D)">Topoisomerase II is required for embryonic development and liver regeneration in zebrafish.</a> Molecular and Cellular Biology. 29, 3746-3753 (2009).</li>
<li>Kan, N. G., Junghans, D., Belmonte, J. C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compensatory+growth+mechanisms+regulated+by+BMP+and+FGF+signaling+mediate+liver+regeneration+in+zebrafish+after+partial+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Compensatory growth mechanisms regulated by BMP and FGF signaling mediate liver regeneration in zebrafish after partial hepatectomy.</a> The FASEB Journal. 23, 3516-3525 (2009).</li>
<li>Zhu, Z., Chen, J., Xiong, J. W., Peng, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haploinsufficiency+of+Def+activates+p53-dependent+TGF%CE%B2+signalling+and+causes+scar+formation+after+partial+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Haploinsufficiency of Def activates p53-dependent TGFβ signalling and causes scar formation after partial hepatectomy.</a> PLoS One. 9, (2014).</li>
<li>Feng, G., Long, Y., Peng, J., Li, Q., Cui, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+characterization+of+the+dorsal+lobes+after+hepatectomy+of+the+ventral+lobe+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic characterization of the dorsal lobes after hepatectomy of the ventral lobe in zebrafish.</a> BMC Genomics. 16, 979(2015).</li>
<li>Michalopoulos, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration.</a> Journal of Cellular Physiology. 213, 286-300 (2007).</li>
<li>Grisham, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organizational+principles+of+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22The+Liver%3A+Biology+and+Pathobiology%3A+Fifth+Edition%22%5BJournal%5D)">Organizational principles of the liver.</a> The Liver: Biology and Pathobiology: Fifth Edition. , 1-15 (2009).</li>
</ol>

作者声明不存在任何竞争性经济利益。

斑马鱼与哺乳动物在肝脏再生模型上的解剖学差异为肝脏切除手术带来了独特的挑战。斑马鱼的肝脏紧邻心脏和肠道，若不慎损伤其中任一器官，将导致死亡率升高。斑马鱼的肝脏无包膜包裹，因此更难以与肠道分离。肝脏通过门静脉接收来自肠道的富含营养的血液。在哺乳动物中，离开肠道的静脉汇集成一条主要的门静脉，随后在进入肝脏时分支12相比之下，斑马鱼的肝脏通过一系列微小血管直接从肠道接收门脉循环血液进入肝脏（图2B因此，肝脏的每个叶在展开并覆盖于肠道上时，均通过这些血管牢固地附着于肠道。若在切断门静脉之前尝试切除腹侧叶，往往会导致切除不完全（数据未显示）。一些早期方案描述通过相对较小的切口将腹侧叶拉出，但这种方法无法切断这些门静脉连接。5,6.
本文所述方案旨在解决这些挑战，以实现稳定地切除腹侧叶。将麻醉后的斑马鱼紧密地放置在海绵的凹槽中，以保持其鳃部湿润，并在手术过程中固定身体。在...

在人体的实质性器官中，肝脏是唯一具有再生能力的器官1。这一点至关重要，因为肝脏是一个关键器官，负责重要的代谢功能、能量储存、血液解毒、血浆蛋白分泌以及胆汁生成2。因毒性或炎症损伤而丢失的肝细胞主要通过剩余肝细胞的分裂来补充1。研究肝脏再生的一个经典实验模型是部分肝切除术，即切除肝脏的个别叶，而保留其余肝叶完整3。该手术最初在大鼠中建立，其中约切除肝脏总质量的三分之二。在哺乳动物中进行部分肝切除术后，剩余肝叶会发生代偿性再生，直至肝脏恢复其初始质量。值得注意的是，哺乳动物的肝脏并不会重新生成缺失的肝叶。
斑马鱼（Danio rerio）是研究成体器官再生的可行模型4。尽管斑马鱼肝脏在结构上与哺乳动物肝脏不同，但其由相同类型的细胞组成，并发挥与哺乳动物相似的功能2。斑马鱼肝脏由三个叶组成，包括两个背侧叶和一个沿肠道扁平分布的单一腹侧叶。此前已在斑马鱼中实施过部分肝切除术，但关于其确切再生模式的研究结果存在争议。通常通过完全切除整个腹侧叶来实现约三分之一的部分肝切除。早期研究报告称，在切除腹侧叶后，该叶可在一周内完全再生5,6,7，这表明与哺乳动物肝脏不同，斑马鱼肝脏具备表形态再生能力。然而后续研究显示，腹侧叶的切除实际上导致背侧叶发生代偿性再生，而非缺失腹侧叶的再生，最终在一周内恢复肝脏质量8,9。对腹侧叶切除后背侧叶的转录组分析揭示了与代偿性再生相关的重要变化10。鉴于肝脏再生模式可能随损伤程度的不同而变化8，我们推测研究结果之间的差异可能是由于不同研究团队在部分肝切除实验操作流程上的技术差异所致。
本方案描述了一种通过切除腹叶对成年斑马鱼进行三分之一部分肝切除的手术方法。该技术将有助于评估肝脏再生的机制。

<table><tbody><tr><td>16% 甲醛水溶液，电镜级</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15700</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Falcon 离心管，聚丙烯材质，无菌</td><td>Corning</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>AS 82/220.R2 PLUS 分析天平</td><td>Bay State Scale &amp;amp; Systems, INC.</td><td>WL-104-1051</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #55 镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11295-51</td><td></td></tr><tr><td>EMS Kuehne 盖玻片/样本镊子</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>72997-07</td><td></td></tr><tr><td>落射荧光显微镜</td><td>Zeiss</td><td>Discovery.V8</td><td></td></tr><tr><td>Mastertop 纤维素清洁海绵</td><td>Amazon</td><td>B07CBSM53Z</td><td></td></tr><tr><td>PBS 10X 液体浓缩液 4L</td><td>EMD Millipore</td><td>6505-4L</td><td></td></tr><tr><td>超细微型剪刀，3 1/4&quot; 直头</td><td>Biomedical Research Instruments</td><td>11-1020</td><td></td></tr><tr><td>三卡因甲磺酸盐（Tricaine methanesulfonate）</td><td>Syndel</td><td>TRIC-M-GR-0010</td><td></td></tr><tr><td>吐温 20，Fisher BioReagents</td><td>Fischer Scientific</td><td>BP337-500</td><td></td></tr></tbody></table>

成年斑马鱼的部分肝切除术

Partial Hepatectomy in Adult Zebrafish

肝衰竭是全球主要的死亡原因之一，美国慢性肝病导致的死亡率正在急剧上升。健康的肝脏能够从毒性损伤中再生，但在晚期肝病中，肝脏的自然再生能力会受到损害。斑马鱼已成为研究再生的有力实验体系。它们是研究部分肝切除后肝脏再生的理想模型，部分肝切除是一种具有直接临床相关性的手术，即外科切除部分肝脏而保留其余部分完整。目前尚无部分肝切除的标准操作流程；以往使用该模型的研究采用了略有不同的方案，并报告了不同的结果。本文描述了一种在成年斑马鱼中实施部分肝切除的高效且可重复的方案。我们利用该技术证明，斑马鱼能够对被切除的肝叶进行表型再生。该方案可用于进一步探究斑马鱼肝脏再生所需的机制。

为了研究成年斑马鱼肝脏的再生潜能，我们在成年斑马鱼中进行了部分肝切除术（PHX）。通常选择体型较大的成年鱼（体长30-40 mm），年龄范围为1.5-2.5年。在单次实验中，所用个体均来自同一水箱，并在年龄和体型上相匹配。作为合适的对照，我们采用了假手术组，即对动物进行麻醉并在腹壁做大切口，但不切除任何组织即进行恢复。假手术组中雄性和雌性斑马鱼的存活率均在90%-100%之间。PHX组动物的存活率在雄性斑马鱼中为60%-75%，在雌性斑马鱼中为60%-90%，所有死亡均发生在手术后24小时内。
评估肝部分切除术（PHX）后肝脏再生恢复的金标准是肝脏与体重比（LBR）。该检测方法已用于哺乳动物11和斑马鱼模型8中肝脏质量恢复的测量。为可靠地定量肝脏重量，我们如前所述8对固定处理的动物进行了称重。我们在野生型、未受损伤的斑马鱼中进行了LBR测定，发现与既往报道一致8，雌性斑马鱼的LBR几乎是雄性斑...

本方案描述了在成年斑马鱼中切除肝脏腹叶以研究肝脏再生的过程。

肝衰竭是全球范围内导致死亡的主要原因之一，而美国慢性肝病的死亡率正在急剧上升。健康的……

本方案将使研究人员能够利用现有的化学和遗传工具，研究斑马鱼肝脏再生的机制。部分肝切除术可精确去除组织，从而在不引起全身性毒性肝损伤效应的情况下刺激肝脏再生。只有深入理解肝脏再生的分子与细胞机制，才能为晚期肝病患者设计出新的治疗策略。首先，使用镊子将鱼从三卡因（Tricaine）溶液中取出，并将其腹侧朝上固定在浸有三卡因的海绵凹槽中。然后将海绵置于体视显微镜下，采用自上而下的照明。用精细镊子夹住心脏后方的皮肤和鳞片，并用弹簧剪在镊子下方于体腔上剪开一个小孔。旋转海绵，沿腹部向后剪至骨盆鳍处，做一个三到四毫米的切口。然后将海绵转回原位。用一只手挤压海绵两侧，将内脏器官从体腔中挤出。肝脏的腹叶位于肠管上方，呈粉红色或橙色，分布在金褐色的肠管表面，可通过CFP荧光清晰观察到。轻轻挤压精细镊子，使镊尖相互接触，然后将镊尖插入肝脏与肠管之间。随后缓慢分开镊尖，以切断肝脏与肠管之间的门静脉连接。重复此过程，直至切断肝脏与肠道之间的所有门脉连接，然后使用精细镊子将肝腹叶从肠道上分离。将肝腹叶与肝脏其余部分完全切离。通过CFP荧光对动物进行观察，证实肝腹叶已被移除。操作完成后，小心地将鱼从海绵转移至盛有系统水的水族箱中，并将系统水缓缓流过鱼鳃数分钟，直至鱼恢复自主游动。处死鱼后，将其从冰水中取出，腹面朝上放置于海绵的凹槽内，在心脏的前后位置处沿腹壁做一切口。然后从第一条切口的两端沿前后轴向腹鳍方向再做两个切口，剥离皮肤和肌肉以暴露内脏器官。现在可以通过明场和荧光显微镜观察内脏器官。通过计算肝脏重量与体重的比值来评估部分肝切除后的肝脏再生情况，该比值在雄性中为1.8%，在雌性中为3.3%。在部分肝切除术和假手术对照组中，分别于术后第0天和第7天测定两性个体的肝脏重量与体重比值。在术后第0天，假手术动物可见明显的肝腹叶，而部分肝切除术动物的肝腹叶则完全缺失，导致雄性个体肝脏重量与体重比值减少30%，雌性个体减少20%。在术后第7天，部分肝切除术动物的肝腹叶未见再生，但部分肝切除术组与假手术对照组的肝脏重量与体重比值相近，表明部分肝切除术后肝脏质量已恢复。通过进行1/3部分肝切除术并测量腹叶与肠道长度的比值，确定时间对腹叶再生的影响。假手术对照组中，腹叶占据肠道长度的50%至100%，而在1/3部分肝切除动物中腹叶明显缩小。术后第36天的部分肝切除动物，其腹叶与肠道长度的比值较术后第1天有所增加。与术后第1天相比，在术后第36天部分肝切除术后恢复的动物中观察到腹叶体积显著增大，但在假手术对照组中未观察到此现象。部分动物再生了腹叶，而另一些则没有，表明对手术的反应存在个体差异。本方案最关键的步骤是将肝脏与肠道彻底分离，以便完全切除腹叶。可以在突变体或转基因斑马鱼品系中进行部分肝切除，以检测肝脏再生的遗传需求。

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科研

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Biology

生物学

成人斑马鱼的部分肝切除术

本文中，我们展示了一种在成年斑马鱼中进行造血干细胞移植（HCT）的方法。...

成年斑马鱼全肾髓移植

斑马鱼的肾脏含有肾源性和造血性成体干细胞/祖细胞，为在脊椎动物模式生物中研究这些细胞类型及其分化后代提供了极佳的机会。本文展示了一种详细的解剖操作步骤，使研究人员能够识别并手术切除成年斑马鱼的肾脏，该组织可用于细胞分离、移植以及肾脏和/或血细胞群体的表达研究等应用。...

成年斑马鱼肾脏的解剖

本文介绍了一种在转基因斑马鱼幼鱼中利用甲硝唑诱导肝细胞死亡的靶向性肝脏消融方法。示例实验方案详细描述了在斑马鱼中建立、操作和评估靶向性肝脏消融的过程。...

靶向肝脏消融：利用甲硝唑在转基因斑马鱼幼虫中诱导肝细胞死亡

斑马鱼在心血管研究中的应用正逐步扩展到成年心脏的研究。对于这些应用而言，快速且简便地分离心脏组织是关键，以避免死后变化并获得足够数量的样本。本文介绍了一种快速且可重复的成年斑马鱼心脏解剖方法。...

成年斑马鱼心脏的回收及其在高通量应用中的使用

为了帮助评估斑马鱼胆管驱动的肝脏再生背后的分子机制，我们建立了一种肝损伤模型，该模型中表达硝基还原酶的肝细胞在甲硝唑处理后被遗传性消融。在本方案中，我们描述了如何熟练地操作、监测和分析肝细胞消融及胆管驱动的肝脏再生过程。...

斑马鱼肝细胞特异性消融以研究胆管驱动的肝脏再生

持续的纤维化伴随过量细胞外基质蛋白沉积可导致肝硬化。酒精滥用是严重肝病的主要病因之一。我们建立了一种乙醇诱导的斑马鱼肝纤维化模型，用于研究酒精诱导损伤后促进肝细胞再生的机制与策略。...

建立乙醇诱导的斑马鱼肝纤维化模型以研究前体细胞介导的肝细胞再生

本方案描述了对经2%乙醇处理24小时的斑马鱼幼鱼肝脏进行的组织学分析。这种急性乙醇处理会导致肝细胞脂肪变性和肝血管系统的肿胀。...

斑马鱼急性酒精性肝损伤的组织学分析

在成年斑马鱼器官中实现条件性基因敲除或有效的基因敲低仍然是一个重大挑战。本文报道了一种通过纳米颗粒介导的siRNA进行基因沉默的技术方案，用于成年斑马鱼心脏，从而为研究斑马鱼及其他模式生物的成年器官提供了一种新的功能缺失研究方法。...

纳米颗粒介导的 siRNA 基因沉默在成年斑马鱼心脏中的应用

本文展示了一种定量分析幼年斑马鱼肝脏大小的方法，可用于评估基因和药物干预对肝脏生长与发育的影响。...

利用明场显微镜定量斑马鱼幼鱼肝脏大小

本文介绍了如何构建与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）相关的肝细胞癌（HCC）斑马鱼模型，以研究胆固醇过量对肝脏微环境及免疫细胞格局的影响。...

斑马鱼非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌早期进展过程中肝脏微环境分析

本文描述了一种成年斑马鱼新的腹腔（IP）注射方法。在处理多柔比星等有毒化合物时，该方法比此前报道的两种腹腔注射方法更有效。该技术设计为斑马鱼模型研究经验有限的研究人员也能轻松掌握。...

一种可最大限度减少机体损伤及相关死亡率的成年斑马鱼腹腔注射技术

了解成年斑马鱼部分肝切除术的标准化操作流程，利用Danio rerio模型研究肝脏再生机制。该方法通过精确切除腹侧肝叶，为再生生物学和肝病治疗研究提供可重复的技术平台。

成年斑马鱼的部分肝切除术

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