Name: 优化视网膜静脉遮挡小鼠模型以限制变异性 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: 了解优化视网膜静脉闭塞小鼠模型的方法，使用孟加拉玫瑰红和激光引导成像系统实现无创实时监测。该技术有助于研究血管损伤机制和视网膜水肿发展，为神经血管疾病治疗提供可重复的动物实验平台。

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<div>本工作获得了美国国家科学基金会研究生研究奖学金计划（NSF-GRFP）资助 DGE – 1644869（授予 CKCO）、国家眼科研究所（NEI）5T32EY013933（授予 AMP）、国家老龄化研究所（NIA）R21AG063012（授予 CMT）以及美国国防部陆军研究办公室大学研究仪器计划（DURIP）（授予 CMT）的支持。</div>

本方案遵循视力与眼科学研究协会（ARVO）关于在眼科和视力研究中使用动物的声明。啮齿类动物实验已获得哥伦比亚大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准并接受其监督。
注意：所有实验均使用约20克重的两个月大雄性小鼠。
1. 他莫昔芬的制备及用于诱导型条件性基因敲除的给药
注意：视网膜血管直径可能受动物体重影响。确保实验中使用的所有动物体重相近。
<ol>
	<li>将他莫昔芬用玉米油稀释至浓度为 20 mg/mL。 
	注意：他莫昔芬具有毒性且对光敏感。应避光保存，例如用铝箔包裹。</li>
	<li>将溶液涡旋振荡数秒钟。</li>
	<li>置于 55 °C 的烘箱中 15 分钟。 
	注意：确保他莫昔芬已完全溶解。可能需要再次涡旋振荡。</li>
	<li>溶液可在 4 °C 下保存最多 1 周。</li>
	<li>使用配有 26 G 针头的 1 mL 注射器进行他莫昔芬注射。用 70% 乙醇清洁注射部位。&#160;根据特定的可诱导 Cre 品系确定的时间，每天一次经腹腔注射（IP）给予 2 mg 他莫昔芬（100 µL 的 20 mg/mL 溶液）。&#160;&#160;</li>
	<li>在开始实验前，让动物休息两天。</li>
</ol>
2. 激光光凝试剂的制备
<ol>
	<li>玫瑰红 
	注意：玫瑰红对光敏感。请避光保存直至使用，并现配现用以获得最佳效果。
	<ol>
		<li>用无菌生理盐水将玫瑰红稀释至 5 mg/mL，并通过 0.2 µm 注射器滤器过滤。</li>
		<li>用玫瑰红溶液准备一支配有 26 G 针头的 1 mL 注射器。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>氯胺酮/赛拉嗪
	<ol>
		<li>用无菌生理盐水将氯胺酮和赛拉嗪分别稀释至以下浓度：氯胺酮（80–100 mg/kg）和赛拉嗪（5–10 mg/kg）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>卡洛芬
	<ol>
		<li>用无菌生理盐水将卡洛芬稀释至 1 mg/mL。</li>
		<li>用卡洛芬溶液准备一支配有 26 G 针头的 1 mL 注射器。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>无菌生理盐水
	<ol>
		<li>用无菌生理盐水准备一支配有 26 G 针头的 5 mL 注射器。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 激光装置设置
<ol>
	<li>轻柔地操作光纤电缆，并将其连接至激光控制箱和视网膜成像显微镜的激光适配器。</li>
	<li>打开视网膜成像显微镜灯箱。</li>
	<li>打开计算机并启动成像程序。</li>
	<li>使用一张白纸，将其置于小鼠目镜前方，然后点击以调整白平衡 调节 在成像程序中。</li>
	<li>打开激光控制箱的钥匙以启动设备，并按照激光控制箱屏幕上的指示进行操作。 
	注意：本实验中使用的激光器为3B类，可能造成眼部损伤。操作激光器时应佩戴防护护目镜。</li>
	<li>验证基线激光功率。
	<ol>
		<li>使用激光功率计。</li>
		<li>将激光控制箱的屏幕参数调整为：50 mW 和 2,000 ms。</li>
		<li>打开激光器，将功率计置于目镜前方。 
		注意：&#160;测试基线激光功率时，请确保显微镜光源已关闭。</li>
		<li>踩下脚踏开关以激活激光。</li>
		<li>目标使激光功率读数为13–15 mW。 
		注意：激光功率读数将决定视网膜静脉阻塞造模的成功率。若激光功率读数过低，可对激光照射的功率和时间进行调整。参见 表1 以获取建议。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>通过设置调节实验激光功率 激光控制箱的屏幕 对于以下参数：100 mW，1,000 ms。</li>
	<li>关闭激光器。 
	&#8203;注意：出于安全考虑并防止过热，建议在处理不同小鼠之间保持激光关闭。</li>
</ol>
4. 罗丹明B小鼠尾静脉注射
<ol>
	<li>将300 mL水倒入500 mL烧杯中。</li>
	<li>将烧杯放入微波炉中加热1分钟。</li>
	<li>将纱布放入烧杯的温水中。</li>
	<li>将小鼠放入固定器中。</li>
	<li>轻轻按压小鼠尾部纱布，观察扩张的静脉。消毒注射部位&#160;使用温水扩张后，再用酒精棉片擦拭。&#160;</li>
	<li>将针头插入注射部位并&#160;拉动注射器以确保你处于正确位置&#160;静脉。然后，&#160;通过尾静脉注射小鼠，根据动物体重给予正确剂量（37.5 mg/kg）。注射后对注射部位施加压力，以避免血肿或出血。擦拭注射部位。</li>
	<li>将小鼠从固定器中释放并放回笼中。</li>
	<li>在注射麻醉剂前，让玫瑰红素循环8分钟。 
	&#8203;注意：玫瑰红注射与激光照射之间将总共间隔10分钟。</li>
</ol>
5. 主要静脉的阻塞
<ol>
	<li>打开加热小鼠平台。</li>
	<li>在每只眼睛中各滴入一滴去氧肾上腺素和托吡卡胺。</li>
	<li>腹腔注射150 µL麻醉剂，包括氯胺酮（80–100 mg/kg）和赛拉嗪（5–10 mg/kg）。 
	注意：在此操作过程中，小鼠需接受两次腹腔注射，因此应交替注射部位。麻醉剂注射于&#160;右下腹象限，生理盐水注射于&#160;左下腹象限。建议在注射前回抽注射器，以确认针头位于腹腔内而非器官内。</li>
	<li>通过夹捏脚趾评估动物的麻醉深度，并等待至其无反应为止。</li>
	<li>每只眼睛滴入一滴盐酸丙帕他卡因（镇痛剂）。</li>
	<li>在双眼表面涂抹凝胶眼膏。</li>
	<li>在耳间区域皮下注射150 µL卡洛芬。</li>
	<li>将小鼠安置于平台上。</li>
	<li>调节平台位置，直至视网膜眼底视野清晰且聚焦良好。</li>
	<li>计数视网膜静脉，并拍摄眼底图像。 
	注意：视网膜静脉比动脉颜色更深、管径更宽。静脉与动脉通常交替排列；但有时在视神经附近可能存在分支动脉，从而导致相邻的两条动脉。</li>
	<li>打开激光，将光束对准距视盘约375 µm处的一条视网膜静脉。</li>
	<li>踩下脚踏开关照射血管，同时轻微移动激光束，移动范围不超过100 µm。重复此步骤三次，每次脉冲后移动激光束位置，避免在同一位置集中照射。</li>
	<li>对其他主要血管重复照射，以实现2–3个阻塞点。</li>
</ol>
6. 确定第0天闭塞的静脉数量
<ol>
	<li>照射容器后关闭光源，并等待10分钟。 
	注意：光照可能导致视网膜损伤和炎症；在等待期间关闭光源以尽量减少暴露7。</li>
	<li>重新打开光源，统计闭塞的静脉数量。</li>
	<li>拍摄眼底图像。</li>
</ol>
7. 术后护理
<ol>
	<li>腹腔注射1 mL无菌生理盐水。 
	注意：腹腔注射的详细步骤见第5节第3步。</li>
	<li>向双眼滴加润滑性眼药水。</li>
	<li>向双眼涂抹凝胶眼膏。</li>
	<li>密切观察小鼠从麻醉中恢复的过程，在其完全恢复前不得将其放回与其他动物共用的笼具中。术后可每日给予卡洛芬（5 mg/kg），最多连续使用2天。&#160;若应用于人类，疼痛并非视网膜静脉阻塞（RVO）的症状。 
	注意：&#160;在动物完全恢复之前，不得使其无人看管。</li>
</ol>
8. 通过光学相干断层扫描（OCT）评估视网膜水肿
注意：此步骤可根据研究者的兴趣时间点进行。C57BL/6J小鼠视网膜水肿的高峰期为RVO手术后1天。该时间点可能因小鼠品系背景不同而有所变化。
<ol>
	<li>打开视网膜成像显微镜光源箱、OCT 仪器以及加热小鼠平台。</li>
	<li>闭塞后的第二天，按照步骤 5.2 至 5.7 准备动物。</li>
	<li>启动成像和 OCT 软件程序。</li>
	<li>在 OCT 程序中，将微调值设为 5。</li>
	<li>在距离烧灼部位远端 75 µm 处或 4 个点击位置处进行 OCT 扫描。</li>
	<li>在视网膜的四个象限分别采集 OCT 图像。</li>
	<li>使用描记软件分析 OCT 图像。</li>
	<li>比较照射前与 RVO 后 1 天或感兴趣时间点的视网膜厚度。 
	注意：分析数据时，应考虑被照射的静脉数量，因其可能影响视网膜水肿的发展。随后通过给予麻醉剂并实施灌注性非存活手术处死动物。</li>
</ol>

<ol><li>Song, P., Xu, Y., Zha, M., Zhang, Y., Rudan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+epidemiology+of+retinal+vein+occlusion%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+prevalence%2C+incidence%2C+and+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Global+Health%22%5BJournal%5D)">Global epidemiology of retinal vein occlusion: a systematic review and meta-analysis of prevalence, incidence, and risk factors.</a> Journal of Global Health. 9 (1), 010427(2019).</li>
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</ol>

作者声明不存在利益冲突。

小鼠视网膜静脉阻塞（RVO）模型为深入理解RVO的病理机制以及测试潜在治疗方法提供了途径。尽管小鼠RVO模型在该领域被广泛使用，但仍缺乏一份详尽的最新实验方案来应对模型的变异性，并描述其优化过程。本文基于实践经验，提供了一份操作指南，介绍如何调整实验条件以在一组实验动物中获得最一致的结果，并生成可靠的数据。
RVO 小鼠模型的两个最关键要素是激光输出和光敏染料的静脉注射。当激光对准特定静脉以诱导凝固时，必须适当调整激光输出，以产生所需的功率。虽然本方法中建议的技术可实现这一目标，但需考虑各实验室系统设置的差异。光纤电缆的差异及其与设备的连接方式、室温等因素，均可能导致激光输出偏低。建议针对系统设置进行独立调试，以提高激光输出。
然而，若无合适的尾静脉注射技术来递送光敏染料，这一操作将无法实现。尾静脉注射较难完成，且需要一定时间才能掌握。注射操作不当可能导致无法形成阻塞；在此情况下，可采用腹腔注射（IP）给予玫瑰红染料。已有研究通过腹腔注射玫瑰红建立视网膜静脉阻塞（RVO）模型，但需更长的激光照射时间（3秒）和更高的玫瑰红浓度（...

视网膜静脉阻塞（RVO）是一种常见的视网膜血管疾病，2015年全球约有2800万人受其影响1。RVO可导致工作年龄成年人及老年人视力下降甚至丧失，是一种持续存在的致盲性疾病，预计在未来十年内发病率将进一步上升。RVO的一些明确病理特征包括缺氧-缺血性损伤、视网膜水肿、炎症反应以及神经元丢失2。目前，该疾病的首选治疗方法是使用血管内皮生长因子（VEGF）抑制剂。尽管抗VEGF治疗有助于缓解视网膜水肿，但许多患者仍面临视力持续下降的问题3。为了进一步理解该疾病的病理生理机制，并测试潜在的新治疗方案，有必要建立一种适用于不同小鼠品系的功能完善且细节明确的RVO小鼠模型操作流程。
已开发出采用与人类患者相同激光设备的小鼠模型，并结合了适用于小鼠眼尺寸的成像系统。该视网膜静脉阻塞（RVO）小鼠模型最早于2007年被报道4，随后由Ebneter等人进一步完善4,5。最终，Fuma等人对该模型进行了优化，以复制RVO的关键临床表现，例如视网膜水肿6。自该模型首次报道以来，许多研究均采用此方法，即先给予光敏染料，随后使用激光对主要视网膜静脉进行光凝。然而，不同研究中所使用的染料种类与剂量、激光功率以及照射时间存在显著差异。这些差异往往导致模型的变异性增加，难以重复。迄今为止，尚无已发表的研究提供有关该模型优化潜力的具体细节。
本报告详细介绍了在C57BL/6J品系小鼠中建立视网膜静脉阻塞（RVO）模型的方法，并介绍了以C57BL/6J为遗传背景的他莫昔芬诱导型内皮细胞caspase-9基因敲除（iEC Casp9KO）小鼠品系，该品系与RVO病理过程相关，可作为基因修饰小鼠的参考品系。既往研究已表明，内皮细胞caspase-9的非凋亡性激活可引发视网膜水肿并促进神经元死亡8。使用该品系的经验有助于明确并深入理解RVO小鼠模型潜在的优化方向，这些改进方法也可适用于其他基因修饰小鼠品系。

<table><tbody><tr><td>卡洛芬</td><td>Rimadyl</td><td>NADA #141-199</td><td>保存于 4 &amp;deg;C</td></tr><tr><td>玉米油</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C8267</td><td></td></tr><tr><td>光纤补丁电缆</td><td>Thor Labs</td><td>M14L02</td><td></td></tr><tr><td>GenTeal</td><td>Alcon</td><td>00658 06401</td><td></td></tr><tr><td>盐酸氯胺酮</td><td>Henry Schein</td><td>NDC: 11695-0702-1</td><td></td></tr><tr><td>Lasercheck</td><td>Coherent</td><td>1098293</td><td></td></tr><tr><td>去氧肾上腺素</td><td>Akorn</td><td>NDCL174478-201-15</td><td></td></tr><tr><td>Phoenix Micron IV 配备 Meridian、&amp;nbsp;StreamPix 和 OCT 模块</td><td>Phoenix Technology Group</td><td></td><td></td></tr><tr><td>盐酸丙帕他莫</td><td>Akorn</td><td>NDC: 17478-263-12</td><td>保存于 4 &amp;deg;C</td></tr><tr><td>Refresh</td><td>Allergan</td><td>94170</td><td></td></tr><tr><td>玫瑰红染料</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>330000-5G</td><td></td></tr><tr><td>他莫昔芬</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5648-5G</td><td>避光</td></tr><tr><td>托吡卡胺</td><td>Akorn</td><td>NDC: 174478-102-12</td><td></td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>Akorn</td><td>NDCL 59399-110-20</td><td></td></tr></tbody></table>

视网膜静脉阻塞小鼠模型的优化以减少变异性的研究

Optimization of the Retinal Vein Occlusion Mouse Model to Limit Variability

视网膜静脉阻塞（RVO）的小鼠模型常用于眼科研究神经视网膜中的缺氧-缺血性损伤。本报告提供了一种详细的方法，指出了关键步骤，并提出了优化建议，以在不同基因修饰小鼠品系中实现稳定且成功的阻塞率。该RVO小鼠模型主要包括静脉内注射光敏染料，随后使用连接眼科导向激光的视网膜成像显微镜进行激光光凝。研究确定了三个影响阻塞一致性的关键变量。通过调整玫瑰红（rose bengal）注射后的等待时间，并平衡基线与实验激光输出功率，可减少实验间的变异性，提高阻塞成功率。该方法可用于研究以视网膜水肿和缺氧-缺血性损伤为特征的视网膜疾病。此外，由于该模型可诱导血管损伤，也可用于研究神经血管系统、神经元死亡及炎症反应。

视网膜静脉阻塞（RVO）小鼠模型旨在成功实现视网膜静脉的阻塞，从而导致缺氧-缺血性损伤、血-视网膜屏障破坏、神经元死亡以及视网膜水肿8。图1展示了为确保实验可重复性的操作时间线、实验设计示意图，以及可根据具体科学问题进一步优化的关键步骤。其中三个可调整的主要参数为：玫瑰红（rose bengal）给药后的等待时间、基础激光功率和实验激光输出强度。本研究中使用了C57BL/6J小鼠，以及诱导型内皮细胞caspase-9基因敲除小鼠品系（iEC Casp9）的野生型（WT）和基因敲除型（KO）同窝小鼠，以确定不同品系间的最佳实验条件。
玫瑰红注射后至激光照射之间的等待时间可能会影响静脉光凝效果。等待时间过短可能导致静脉内玫瑰红浓度不足，而等待时间过长则可能导致玫瑰红从视网膜循环中被清除。这两种情况均可能导致光凝效果不佳和闭塞失败。在检测激光照射后立即获得的闭塞数量时，比较在注射玫瑰红后10分钟和20分钟进行激光处理的动物，结果显示两者在闭塞数量上无显著差异（<strong cla...

本文介绍了一种使用玫瑰红（rose bengal）和激光引导视网膜成像显微镜系统建立视网膜静脉阻塞的优化方案，并提供了提高其在基因修饰品系中可重复性的建议。

用于研究视网膜神经组织缺氧缺血性损伤的视网膜静脉阻塞（RVO）小鼠模型在眼科研究中广泛应用。本报告中，一种……

该方案提供了一种无创研究血管损伤及其继发性水肿发生机制的模型。该技术的主要优势在于，无需手术干预即可实时动态观察损伤过程，从而为更高效地测试治疗方法提供了途径。学习如何正确进行尾静脉注射以及如何将动物正确安置在平台上可能会具有挑战性。对于这两种技术，我建议保持耐心，逐步操作。首先，轻柔地操作光纤电缆，将其连接到激光控制盒和视网膜成像显微镜的激光适配器上，然后打开视网膜成像显微镜的灯箱。打开计算机并启动成像程序。将一张白纸放在显微镜目镜前方，通过点击成像程序中的“Adjust”按钮来调节白平衡。转动钥匙以打开激光控制箱，并根据激光控制箱屏幕上的指示进行操作。为验证激光器的基线功率，将激光控制盒设置为 50 毫瓦和 2,000 毫秒。然后打开激光器，并将功率计置于目镜前方。踩下脚踏开关以激活激光，使激光功率读数达到 13 至 15 毫瓦。然后，使用激光控制箱的屏幕，将实验用激光功率调节至100毫瓦和1,000毫秒，并关闭激光。将300毫升水倒入500毫升烧杯中，并将烧杯放入微波炉加热一分钟。随后将纱布浸入温水中。接下来，将一只两个月大的雄性小鼠放入固定器中。用温热的纱布轻轻按压小鼠尾巴，观察扩张的静脉。使用26号针头，根据动物体重注射适量的玫瑰红染料，并在擦拭注射部位前对注射部位施加压力，以防止血肿或出血。然后将小鼠从固定器中释放并放回笼中。玫瑰红染料循环8分钟后，再注射麻醉剂。打开小鼠加热平台。然后在小鼠的每只眼睛中各滴加一滴去氧肾上腺素和托吡卡胺。确认麻醉成功后，每只眼睛滴加一滴盐酸丙帕卡因，随后在两只眼睛上均涂抹眼膏。接下来，在耳间皮下注射150 µL卡洛芬。然后将小鼠安置在平台上，调整平台位置，直至眼底视野清晰且对焦准确。计数视网膜静脉，并拍摄眼底图像。接着，打开激光，瞄准距视神经乳头约375 µm处的视网膜静脉。通过踩下脚踏开关照射血管，并轻微移动激光束至最多100微米。重复此步骤三次，每次脉冲后移动激光束，使照射区域不集中于一点。在其他主要血管上重复照射，以实现两到三个闭塞点。照射血管后，关闭光源并等待10分钟。然后重新打开光源，计数闭塞的静脉数量，并拍摄眼底图像。在获取图像并注射生理盐水后，向双眼滴加润滑眼药水和凝胶眼膏。观察小鼠从麻醉中恢复的过程，只有在完全恢复后才能将其放回与其他动物共用的笼子中。在玫瑰红染料注射后10分钟和20分钟进行激光照射的小鼠，其激光照射后即刻形成的阻塞数量并无差异。在视网膜静脉阻塞后长达一天的时间内，无论基因型如何，在玫瑰红染料注射后20分钟进行激光照射的小鼠所维持的阻塞数量显著减少。在不改变实验功率（100毫瓦）的情况下，11.5毫瓦的低基础激光功率未导致任何闭塞。相比之下，13.5毫瓦的基础激光输出则成功诱导了血管闭塞。激光光凝术后可出现四种主要类型的血管闭塞：完全闭塞的血管、部分闭塞的血管、部分再灌注的血管和完全再灌注的血管。与C57 Black 6小鼠相比，他莫昔芬诱导的内皮细胞Casp9基因敲除小鼠的受照射血管在部分再灌注和部分阻塞状态下的持续时间更长，而C57 Black 6小鼠则更多处于完全阻塞状态。激光光凝损伤后前10分钟内，血管的阻塞状态迅速变化，损伤后24小时可观察到火焰状出血。视网膜静脉阻塞后出现了不同的眼科病理改变。视网膜静脉阻塞后视网膜水肿的程度可通过光学相干断层扫描图像对受损眼进行定量评估。通过评估视网膜内层的结构紊乱情况，还可确定神经元层的状态。下图显示了一例光学相干断层扫描图像，并标注了各层对应的名称。测量激光的基线功率非常重要。该读数将极大地影响阻塞实验的成功率，并可进行优化。还可进行其他方法，如OCT、ERG和Optiger。这将有助于阐明神经血管损伤对视网膜神经元完整性和视觉通路功能的影响。该技术为研究驱动神经血管疾病的分子通路提供了途径，并且通过长期追踪单个动物，可获得更易于转化为人类疾病研究的数据。

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科研

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优化视网膜静脉遮挡小鼠模型以限制变异性

啮齿类动物的视网膜长期以来被视为观察大脑的一个易于接近的窗口。在本技术论文中，我们提供了一种利用小鼠氧诱导性视网膜病变模型来研究缺血性损伤后中枢神经系统内血管再生失败机制的实验方案。该系统还可用于探索促进视网膜和中枢神经系统内功能性血管再生的策略。...

利用小鼠视网膜评估中枢神经系统中的血管再生

本文介绍了小鼠激光诱导脉络膜新生血管（CNV）实验方案，该模型可重现新生血管性年龄相关性黄斑变性（AMD）的血管特征。掌握该技术后，可稳定有效地诱导CNV，作为测试多种实验干预措施的模型系统。...

一种用于激光诱导脉络膜新生血管形成的动物模型

本文展示了一种利用高分辨率谱域光学相干断层扫描（HR-SD-OCT）将基因治疗药物递送至视网膜下腔、评估其分布范围并表征光感受器活性的新方法。...

超高分辨率小鼠光学相干断层扫描技术在视网膜基因治疗研究中辅助眼内注射

此处，我们展示了纵向研究的实用性 体内 小鼠激光诱导脉络膜新生血管形态学改变随访中的成像...

体内 多模态成像与小鼠激光诱导脉络膜新生血管模型分析

氧诱导的视网膜病变（OIR）可用于模拟缺血性视网膜疾病，如早产儿视网膜病变和增殖性糖尿病视网膜病变，并可作为评估抗血管生成药物治疗新生血管疾病的概念验证研究模型。OIR...

用于啮齿类动物缺血性视网膜疾病的氧诱导视网膜病变模型

本方案详细描述了小鼠视网膜平铺片的制备与免疫荧光染色及分析方法。同时详细介绍了小鼠幼崽的荧光素眼底血管造影（FFA）技术及图像处理方法。...

监测氧诱导视网膜病变小鼠模型中视网膜血管的动态生长

本文介绍了一种成熟且可重复的凝集素染色实验方法，适用于整体视网膜标本，以及用于定量测量在增殖性和非增殖性视网膜病变中常发生变化的血管参数所需的相关实验方案。...

非增殖性和增殖性视网膜病变小鼠全层视网膜血管参数的定量分析

光学相干断层扫描在小鼠视网膜病变模型中的应用

本文介绍了视网膜静脉阻塞（RVO）研究中荧光素眼底血管造影（FA）和光学相干断层扫描（OCT）图像的三种数据分析方案。...

体内 小鼠视网膜血管损伤检测指标以促进可重复性

视网膜下注射是光感受器和视网膜色素上皮（RPE）疾病治疗药物临床前研发中不可或缺的技术。本文介绍一种优化的小鼠经巩膜视网膜下注射技术，可提高术中操作成功率并最大限度减少视网膜损伤。...

优化的小鼠经巩膜微创视网膜下注射技术

了解优化视网膜静脉闭塞小鼠模型的方法，使用孟加拉玫瑰红和激光引导成像系统实现无创实时监测。该技术有助于研究血管损伤机制和视网膜水肿发展，为神经血管疾病治疗提供可重复的动物实验平台。

视网膜静脉阻塞小鼠模型的优化以减少变异性的研究

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