Name: 非原位负压通气肺灌注:肺功能和代谢的评估 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 31 s
Description: 了解非原位负压通气肺灌注技术用于评估猪肺功能和代谢状态的方法。该方案通过定制设备减少肺损伤，延长供肺安全保存时间，为肺移植研究提供可靠的操作流程和故障排除策略。

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本研究由医院研究基金会代表资助。

<ol><li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018%3B+focus+theme%3A+Multiorgan+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li>
<li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+2017+annual+data+report%3A+Lung%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation. 19, Suppl 2 404-484 (2019).</li>
<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+Thirty-fourth+adult+lung+and+heart-lung+transplantation+report-2017%3B+focus+theme%3A+Allograft+ischemic+time%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fourth adult lung and heart-lung transplantation report-2017; focus theme: Allograft ischemic time.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 36 (10), 1047-1059 (2017).</li>
<li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states%2C+1999-2008%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation. 10 (4), Pt 2 973-986 (2010).</li>
<li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequence+of+refusals+for+donor+quality%2C+organ+utilization%2C+and+survival+after+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li>
<li>Bhorade, S. M., Vigneswaran, W., McCabe, M. A., Garrity, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liberalization+of+donor+criteria+may+expand+the+donor+pool+without+adverse+consequence+in+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Liberalization of donor criteria may expand the donor pool without adverse consequence in lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 19 (12), 1199-1204 (2000).</li>
<li>Snell, G. I., Griffiths, A., Levvey, B. J., Oto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Availability+of+lungs+for+transplantation%3A+Exploring+the+real+potential+of+the+donor+pool%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Availability of lungs for transplantation: Exploring the real potential of the donor pool.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 27 (6), 662-667 (2008).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li>
<li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion%3A+A+case-control+study%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-45 (2014).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (1), 1200-1206 (2012).</li>
<li>Buchko, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+parenteral+nutrition+in+ex+vivo+lung+perfusion%3A+Addressing+metabolism+improves+both+inflammation+and+oxygenation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Total parenteral nutrition in ex vivo lung perfusion: Addressing metabolism improves both inflammation and oxygenation.</a> American Journal of Transplantation. 19 (12), 3390-3397 (2019).</li>
<li>Andreasson, A. S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+inflammation+and+tissue+injury+markers+in+perfusate+and+bronchoalveolar+lavage+fluid+during+human+ex+vivo+lung+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Profiling inflammation and tissue injury markers in perfusate and bronchoalveolar lavage fluid during human ex vivo lung perfusion.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 51 (3), 577-586 (2017).</li>
<li>Sadaria, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+expression+profile+in+human+lungs+undergoing+normothermic+ex-vivo+lung+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22The+Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Cytokine expression profile in human lungs undergoing normothermic ex-vivo lung perfusion.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 92 (2), 478-484 (2011).</li>
<li>Ricard, J. D., Dreyfuss, D., Saumon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventilator-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Ventilator-induced lung injury.</a> European Respiratory Journal. 42, 2-9 (2003).</li>
<li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex-vivo+lung+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex-vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li>
<li>Lai-Fook, S. J., Rodarte, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleural+pressure+distribution+and+its+relationship+to+lung+volume+and+interstitial+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pleural pressure distribution and its relationship to lung volume and interstitial pressure.</a> Journal of Applied Physiology. 70 (3), 967-978 (1991).</li>
<li>Buchko, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+transplantation+using+negative+pressure+ventilation+ex+situ+lung+perfusion+with+extended+criteria+donor+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Clinical transplantation using negative pressure ventilation ex situ lung perfusion with extended criteria donor lungs.</a> Nature Communications. 11 (1), 5765(2020).</li>
<li>Buchko, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+low-cost+perfusate+alternative+for+ex+vivo+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">A low-cost perfusate alternative for ex vivo perfusion.</a> Transplantation Proceedings. 52 (10), 2941-2946 (2020).</li>
<li>Forgie, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+lung+orthotopic+transplantation+in+a+juvenile+porcine+model+for+ESLP%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for ESLP.</a> The Journal of Visualized Experiments. , (2021).</li>
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DHF 持有以下专利 离体 器官灌注技术与方法。DHF 和 JN 是 Tevosol 公司的创始人及主要股东。

成功的ESLP实验运行需要若干关键的手术步骤以及相应的故障排除措施。与成人人类肺脏相比，幼猪肺脏极为脆弱，因此在处理猪肺时，获取器官的外科医生必须格外谨慎。必须尽力尝试 &#34;非接触式&#34; 避免在分离肺组织时造成创伤和肺不张的技术。 &#34;非接触式&#34; 意味着在获取肺脏过程中尽量减少对肺部的手动操作。在手术期间使用呼吸机时，肺复张操作在猪肺中的效果远不如在人肺中有效。与常用于人肺的操作不同，手动重新定向肺泡内的气流会对幼龄猪肺造成不可逆的损伤，因此不建议进行此类操作。在夹闭气管时，应使潮气量与诱导潮气量相匹配，这对于提高NPV-ESLP成功运行的概率至关重要。在获取过程中任何顺应性的丧失，在猪肺的NPV-ESLP过程中都难以恢复；相比之下，使用NPV-ESLP的人肺在此方面更具耐受性。理想情况下，应在无需增加峰值压力的情况下于诱导潮气量水平夹闭肺脏；然而，温暖缺血开始后不久顺应性即开始下降，有时需要更高的压力以维持肺泡复张。在心脏切除术后，切换至吸呼比（I:E）为2:1有助于维持甚至轻微增加肺泡复张，尤其是在启动肺切除术前使呼出潮气量（TVe）保持在10 ml/kg以上。在分离后侧胸膜与食管的附着时，切勿像在人肺获取...

肺移植（LTx）仍是终末期肺病的标准治疗方案1；然而，肺移植存在诸多局限性，包括供体器官利用率不足2以及高达40%的等待名单死亡率3，后者高于其他任何实体器官移植4,5。由于对器官质量的担忧，供体器官的利用率较低（20–30%）。过长的地理运输距离，加上严格的供体器官接受标准，进一步加剧了对器官质量的顾虑。在长期移植物存活率和患者预后方面，肺移植也落后于其他实体器官移植2。原发性移植物功能障碍（PGD）是最常见的缺血再灌注损伤（IRI）所致并发症，是肺移植术后30天内死亡率和发病率的首要原因，并增加慢性移植物功能障碍的风险6,7。减少缺血再灌注损伤并延长安全运输时间，对于改善患者预后至关重要。
离体肺灌注（ESLP）是一项具有前景的创新技术，可有效缓解上述局限性。ESLP可在肺移植前实现供体肺的保存、评估和功能修复。在扩展标准供体（ECD）肺移植中，该技术已展现出良好的短期和长期效果，有助于增加适用于肺移植（LTx）的供体肺数量，部分中心的器官利用率提高了20%8,9,10。与当前肺移植临床标准——冷静态保存（CSP）相比，ESLP具有多项优势：器官保存时间不再局限于6小时，可在移植前评估器官功能，并且由于实现了器官的持续灌注，可对灌注液进行调整以优化器官功能11。
目前绝大多数用于人类的ESLP设备采用正压通气（PPV）；然而，近期文献表明，该通气策略劣于负压通气（NPV）ESLP，因正压通气更易引发显著的呼吸机相关性肺损伤12,13,14,15在人和猪的肺脏中，与正压通气相比，NPV-ESLP 表现出更优的器官功能 离体 肺灌注（PPV-ESLP）在多种生理学领域中的表现，包括促炎性细胞因子生成、肺水肿及大疱形成15NPV-ESLP中胸内压在整个肺表面的均匀分布被认为是产生这一优势的重要因素15,16除了其在临床前的优势外，NPV-ESLP的临床安全性和可行性已在最近的一项临床试验中得到证实17利用一种新型的NPV-ESLP装置，成功保存、评估并移植了十二例扩展标准供体人肺，术后30天和1年生存率均达到100%。
本文的目的是展示我们实验室的NPV-ESLP设备在常温条件下对幼猪肺脏进行12小时灌注的可行操作方案。文中详细介绍了手术获取过程，以及我们定制软件平台的启动、运行和终止操作。同时，还阐述了组织样本的采集策略及样本管理方法。

<table><tbody><tr><td>0 号 ETHIBOND 绿色 1 x 36&quot; 内科环线 0</td><td>ETHICON</td><td>D8573</td><td></td></tr><tr><td>2-0 丝线 黑色 12&quot; x 18&quot; 股线</td><td>ETHICON</td><td>SA77G</td><td></td></tr><tr><td>ABL 800 FLEX 血气分析仪</td><td>Radiometer</td><td>989-963</td><td></td></tr><tr><td>成人-儿童静电过滤 HME - 小号</td><td>Covidien</td><td>352/5877</td><td></td></tr><tr><td>动脉过滤器</td><td>SORIN GROUP</td><td>01706/03</td><td></td></tr><tr><td>Backhaus 毛巾钳</td><td>Pilling</td><td>454300</td><td></td></tr><tr><td>Biomedicus 泵</td><td>Maquet</td><td>BPX-80</td><td></td></tr><tr><td>扎带 &amp;ndash; 白色 12&amp;rdquo;</td><td>HUASU International</td><td>HS4830001</td><td></td></tr><tr><td>氯化钙</td><td>Fisher Scientific</td><td>C69-500G</td><td></td></tr><tr><td>Cooley 胸骨牵开器</td><td>Pilling</td><td>341162</td><td></td></tr><tr><td>CUSHING Gutsch 换药钳</td><td>Pilling</td><td>466200</td><td></td></tr><tr><td>D-葡萄糖</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G5767-500G</td><td></td></tr><tr><td>深部 Deaver 牵开器</td><td>Pilling</td><td>481826</td><td></td></tr><tr><td>Debakey 直血管组织钳</td><td>Pilling</td><td>351808</td><td></td></tr><tr><td>Debakey-Metzenbaum 解剖剪</td><td>Pilling</td><td>342202</td><td></td></tr><tr><td>剪刀</td><td>Pilling</td><td>342202</td><td></td></tr><tr><td>气管插管 9.0 mm CUFD</td><td>Mallinckrodt</td><td>9590E</td><td>为 ESLP 装置移除气囊</td></tr><tr><td>流量换能器</td><td>BIO-PROBE</td><td>TX 40</td><td></td></tr><tr><td>人血清白蛋白</td><td>Grifols Therapeutics</td><td>2223708</td><td></td></tr><tr><td>输液泵</td><td>Baxter</td><td>AS50</td><td></td></tr><tr><td>Inspire 7 M 中空纤维膜氧合器</td><td>SORIN GROUP</td><td>K190690</td><td></td></tr><tr><td>Intercept 管路 1/4&quot; x 1/16&quot; x 8'</td><td>Medtronic</td><td>3108</td><td></td></tr><tr><td>Intercept 管路 3/8&quot; x 3/32&quot; x 6'</td><td>Medtronic</td><td>3506</td><td></td></tr><tr><td>Intercept 管路连接头 3/8&quot; x 1/2&quot;</td><td>Medtronic</td><td>6013</td><td></td></tr><tr><td>MAYO 解剖剪</td><td>Pilling</td><td>460420</td><td></td></tr><tr><td>医用二氧化碳气瓶</td><td>Praxair</td><td>5823115</td><td></td></tr><tr><td>医用氮气瓶</td><td>Praxair</td><td>NI M-K</td><td></td></tr><tr><td>医用氧气瓶</td><td>Praxair</td><td>2014408</td><td></td></tr><tr><td>器官浴槽</td><td>Tevosol</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PlasmaLyte A</td><td>Baxter</td><td>TB2544</td><td></td></tr><tr><td>Poole 吸引管</td><td>Pilling</td><td>162212</td><td></td></tr><tr><td>磷酸钾</td><td>Fischer Scientific</td><td>P285-500G</td><td></td></tr><tr><td>电子秤</td><td>TANITA</td><td>KD4063611</td><td></td></tr><tr><td>硅胶支撑膜</td><td>Tevosol</td><td></td><td></td></tr><tr><td>碳酸氢钠</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>792519-1KG</td><td></td></tr><tr><td>0.9% 氯化钠</td><td>Baxter</td><td>JB1324</td><td></td></tr><tr><td>Sorin XTRA 血液回收机</td><td>SORIN GROUP</td><td>75221</td><td></td></tr><tr><td>胸骨锯</td><td>Stryker</td><td>6207</td><td></td></tr><tr><td>外科电凝设备</td><td>Kls Martin</td><td>ME411</td><td></td></tr><tr><td>温度传感器探头</td><td>Omniacell Tertia Srl</td><td>1777288F</td><td></td></tr><tr><td>THAM 缓冲液</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15504020</td><td>由 UltraPureTM Tris 配制</td></tr><tr><td>TruWave 压力换能器</td><td>Edwards</td><td>VSYPX272</td><td></td></tr><tr><td>双腔中心静脉导管 7fr</td><td>Arrowg+ard</td><td>CS-12702-E</td><td></td></tr><tr><td>Vorse 管夹</td><td>Pilling</td><td>351377</td><td></td></tr><tr><td>Willauer-Deaver 牵开器</td><td>Pilling</td><td>341720</td><td></td></tr><tr><td>Yankauer 吸引管</td><td>Pilling</td><td>162300</td><td></td></tr></tbody></table>

常温负压通气离体肺灌注：ex situ 肺功能与代谢评估

Normothermic Negative Pressure Ventilation Ex Situ Lung Perfusion: Evaluation of Lung Function and Metabolism

肺移植（LTx）仍是终末期肺病的标准治疗手段。合适的供体器官短缺，以及因过长的地理运输距离和严格的供体器官接受标准而导致的供体器官质量担忧，限制了当前肺移植的开展。离体肺灌注（ESLP）是一项具有前景的创新技术，有望缓解这些限制。在供体机体的炎症环境之外对肺进行生理性的通气和灌注，使ESLP相较于传统的冷静态保存（CSP）具有多项优势。已有证据表明，负压通气（NPV）ESLP优于正压通气（PPV）ESLP，因为PPV更容易引起更显著的呼吸机相关性肺损伤、促炎性细胞因子产生、肺水肿和肺大疱形成。NPV的优势可能源于胸腔内压力在整个肺表面的均匀分布。一种定制的NPV-ESLP装置的临床安全性和可行性已在一项涉及扩展标准供体（ECD）人肺的临床试验中得到验证。本文描述了该定制装置在幼年猪模型中进行12小时常温NPV-ESLP的应用，特别关注器官管理技术。文中详细说明了术前准备，包括ESLP软件的初始化、ESLP管路的预充和排气，以及抗血栓、抗微生物和抗炎药物的添加。文中描述了中心静脉置管、肺活检、放血、血液采集、心脏切除和肺切除等术中操作技术。此外，特别强调了麻醉相关事项，详细列出了麻醉诱导、维持及动态调整方案。该方案还规定了定制装置的启动、灌注与通气的维持及终止流程。对动态器官管理技术，包括通气和代谢参数的调整以优化器官功能，进行了详尽描述。最后，代表性结果中展示了肺功能的生理学和代谢评估指标。

在肺灌注和通气初期（保存模式），随着灌注液逐渐升温至正常体温，肺动脉压力通常较低（&lt; 10 mmHg），动态顺应性也较低（&lt; 10 mL/mmHg）。体重为35–50 kg的约克夏猪，其肺脏重量通常为350–500 g。在NPV-ESLP的最初1小时内，测得的呼气潮气量（TVe）为0–2 mL/kg，吸气潮气量（TVi）为100–200 mL。TVe通常在3–6小时内达到4–6 mL/kg，并可能继续增加，但最终自然稳定在6–8 mL/kg范围内。TVi始终比TVe高出100–200 mL。同样，动态顺应性在最初1小时内为0–10 mL/mmHg，有时可能更高；在3–6小时期间，动态顺应性为10–20 mL/mmHg，并与TVe一同趋于稳定，这两个参数相互关联。随着肺动脉血流逐渐增加至心输出量的10%–30%，肺动脉压力（PAP）将逐步升高。在最初1小时内，PAP通常为10±2 mmHg，并在12小时运行期间轻微上升，最终达到12±2 mmHg的范围。在以心输出量50%的血流进行评估时，PAP可能显著升高，达到15–20 mmHg。肺血管阻力（PVR）在整个ESLP过程中将逐渐上升。...

本文描述了一种负压通气的猪模型 离体 肺灌注，包括器官获取、连接及在定制平台上的管理。重点介绍麻醉与外科技术，以及问题排查。

肺移植（LTx）仍是终末期肺病的标准治疗方法。合适的供体器官短缺以及对供体器官的担忧……

Darren Freed 博士研发了该 ESLP 装置，其采用了专利的负压通气技术与软件，该技术在 ESLP 研究领域尚属独创。本实验室先前已证实，在 ESLP 过程中，与正压通气相比，负压通气所致的肺损伤更轻。这可能是由于负压通气具有更符合生理机制的作用方式。该设备和方案旨在延长供体肺的安全保存时间，并将边缘性肺修复至可接受的移植标准。该设备本身操作非常简单。最大的挑战是在手术中摘取幼猪肺时避免造成任何损伤。与成人人类肺脏相比，它们极为脆弱。通过增加峰值压力以实现最大肺泡募集，从而维持每公斤体重10毫升的呼气潮气量。行胸骨正中切开术。使用电灼器切开皮肤和皮下组织。钝性分离下部胸骨后板的软组织附着。使用胸骨锯劈开胸骨。插入胸骨牵开器并充分撑开。心脏切除术后，双侧切开并去除纵隔胸膜，以暴露肺部。然后使用Deaver牵开器将膈肌向上牵拉，从膈肌开始向左下肺叶方向分离胸膜粘连。现在，切开左侧的肺下韧带，并继续向上至肺门。接着，分离下腔静脉和胸膜与膈肌的附着处，然后使用Deaver拉钩将膈肌向上牵拉。切开右侧的肺下韧带，并继续向上至肺门。然后切断无名静脉和弓部血管，以暴露气管。钝性分离气管周围组织后，在最大吸气末使用管夹夹闭气管，确保呼气潮气量为10毫升/千克。横断气管，并将管夹部分向上提起，以提供手术牵引。然后使用粗钝的梅岑鲍姆剪刀和徒手钝性分离法，将后部气管从食管上解剖下来。切断任何残留的胸膜附着物。在左支气管上方和下方横断主动脉，并连同一段降主动脉将肺脏从胸腔中取出。称量带夹子的肺脏后，迅速将其存放在装满冰的冷藏箱中。首先向灌注回路中加入500毫升浓缩红细胞，使灌注液总体积达到1.5升。对肺脏进行拍照，以留存数据记录。进行肺活检时，用0号丝线缝合线围绕一立方厘米的组织区域并打结固定。然后用剪刀切除该结扎部分，用于组织学分析，具体操作如文稿所述，并将活检组织分段。接下来，为将3/8英寸的管路接头固定至主肺动脉，使用镊子或夹子夹住主肺动脉的对侧壁。然后，将带有半英寸部分的接头插入主肺动脉，并在用零号丝线或Ethibond线固定接头位置的同时，将其稳固就位。现在将肺置于硅胶支撑膜上呈仰卧位，并将其连接到ESLP装置。在气管靠近支气管的位置放置第二个管夹。移除更远端的夹子后，使用气管插管对气管进行插管，并用两条扎带将其固定到位。然后使用管夹夹闭通气管路，再松开气管近端的夹子。将肺动脉适配器连接到肺动脉管路上。当主肺动脉排尽空气后，开始计算灌注时间。在设置页面，点击启动加热器，并将温度设定为 38 摄氏度。输入猪的体重以计算心输出量流速。在主页面上，将持续气道正压设为 20 厘米水柱，然后点击启动持续气道正压。通气开始后，松开通气管路的夹子。动脉压传感器归零后，使用管夹夹闭压力传感器上方的肺动脉管路。打开传感器，在设置页面点击“归零肺动脉压力”和“归零血流”，并在主页面确认读数已归零。关闭压力传感器的止血阀以读取管路压力。打开管路与肺动脉插管的通路。在主页面选择10%的心输出量。点击返回PA手动模式并松开肺动脉管路的夹子。在将顶盖固定到机器前，先更换顶盖内的灌注液，以防止ESLP期间冷凝液的形成。抽取10毫升灌注液用于离心分析，并采集零时动脉血气样本。在离心前将样本置于冰上。肺脏灌注10分钟后，将灌注流量增加至心输出量的20%。当灌注液温度达到32摄氏度时，使用夹具将灌注室盖子固定到位，以形成密闭的密封环境。确保肺组织处于最佳位置，并修复所有漏气部位。盖子固定后，在关闭持续气道正压之前，夹闭通气管路。在设置页面，选择胸内压、气道压和气流均为零。然后在主页面确认读数已归零。在松开通气管路夹子前，点击启动 CPAP。设定文本稿件中提到的通气参数，然后点击“press”以启动通气，激活负压通气。将侧端口通气管路连接至腔室。在接下来的几次呼吸中，维持文本稿件中所述的通气参数。灌注10分钟后，将流速增加至心输出量的20%；灌注20分钟后，将流速增加至心输出量的30%。向系统中加入右旋糖酐和胰岛素。根据论文中的说明，使用心输出量的50%以及混合脱氧扫气，持续5分钟，评估肺功能。在灌注保存模式下，每隔奇数小时采集10毫升灌注液样本，以备后续分析。每小时采集1毫升动脉血气样本（采集自氧合器前），并在评估模式开始5分钟后，分别从氧合器前和氧合器后端口采集样本。12小时灌注与通气期间肺动脉平均压、动态顺应性及肺血管阻力的变化趋势可能受到所采用的特定ESLP实验方案的影响。在体外肺灌注期间采用负压通气时，动脉血氧分压与吸入氧浓度比值在5小时和11小时评估时间点的典型变化趋势如图所示。肺水肿形成是反映内皮通透性相关炎症的另一重要指标，在12小时负压通气体外肺灌注结束时，肺组织重量通常增加30%。灌注液可作为评估肺整体状态的替代性指标。因此，灌注液的血气分析可提供关于肺脏代谢状态的大量信息。在12小时运行期间的ESLP评估模型中（分别于3、5、7、9和11小时进行），可观察到左心房氧分压呈上升趋势。在手术切除肺脏时，务必尽可能轻柔操作，同时也要迅速而高效地完成。该设备、方案及实验室的建立已促成一项成功的临床试验，并取得多项发现，这些发现延长了供体肺的保存和再调节时间。

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非原位负压通气肺灌注:肺功能和代谢的评估

本视频展示了一种用于离体肺灌注的离体技术。该技术是肺部研究的工具，有助于研究肺移植过程中涉及的各种生理和病理机制。...

离体肺灌注：一种用于兔模型肺部研究的技术

离体肺灌注（EVLP）通过实现对器官的评估并扩大供体来源，使人类肺移植变得更加可行。本文中，我们描述了大鼠EVLP模型的建立过程以及相关优化，这些改进为未来的进一步拓展提供了可重复的实验模型。...

分离方法 离体 大鼠模型中的肺灌注：建立大鼠离体肺灌注（EVLP）项目的经验总结

常温离体心脏灌注（ESHP）可使心脏维持在跳动的、接近生理状态的条件下保存。当以工作模式进行时，ESHP 提供了对供体心脏功能和器官活力进行复杂评估的机会。本文中，我们描述了在 ESHP...

常温离体心脏灌注的工作模式：心脏功能与代谢评估

离体兔肺制备是肺部研究中的金标准工具。本文旨在描述该技术，该技术已开发用于研究气道反应性、肺保存以及肺移植和肺水肿的临床前研究中涉及的生理和病理机制。...

兔模型中的离体肺灌注系统

Ex Vivo 猪肺实验模型用于肺力学研究与教学

本文描述了建立大鼠离体肺灌注（EVLP）模型所需的必要步骤，并展示了灌注肺组织相关的炎症特征。目的是传播有关大鼠EVLP模型的知识与经验，促进对这一革命性技术所涉及的生物学反应的全面理解。...

建立一种 离体 用于肺移植转化研究的大鼠肺灌注模型

在此，我们描述了一种基于聚合人血红蛋白（PolyhHb）的氧载体作为灌注液的应用，以及该灌注溶液在大鼠模型中进行测试的实验方案 离体...

利用新一代聚合血红蛋白氧载体在大鼠离体肺灌注模型中探索替代性灌注液

电阻抗断层成像是一种无创、无辐射、可实时监测肺通气的工具。通过测量胸腔内阻抗的变化，能够以逐次呼吸为基础可视化空气分布情况。电阻抗断层成像最初用于通气监测，但也可通过静脉注射生理盐水来测量灌注。...

在重症监护病房中利用电阻抗断层成像监测肺功能

目标是开发一种新的 离体 大鼠离体肺灌注（EVLP）模型，可在4小时内维持稳定的肺功能，并为行业提供具体实施细节，从而为将EVLP技术应用于啮齿类动物模型建立一种可靠的方法。...

建立一种用于循环死亡后大鼠肺脏的新型离体肺灌注系统

热预处理期间 离体 移植前修复受损肺移植物的肺灌注技术

了解非原位负压通气肺灌注技术用于评估猪肺功能和代谢状态的方法。该方案通过定制设备减少肺损伤，延长供肺安全保存时间，为肺移植研究提供可靠的操作流程和故障排除策略。

常温负压通气离体肺灌注：ex situ 肺功能与代谢评估

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