Name: 一种用于肾同种异体排斥的大鼠原位肾移植模型 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: 了解大鼠原位肾移植模型的手术技术，用于研究肾同种异体排斥机制和移植肾损伤。该方法通过端端血管吻合和输尿管隧道法提高受体存活率，为临床移植研究提供可靠框架。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

本工作由国家自然科学基金（81870304）资助李俊，以及由Else Kröner-Fresenius-Stiftung基金会（编号：2017_A28）资助Marcus Groettrup。

购自商业渠道的近交系雄性F344和Lewis大鼠，年龄为8-10周，体重200 g至250 g。在雄性F344与Lewis大鼠之间进行同种异体左侧肾移植手术。F344大鼠作为供体及同基因型受体，Lewis大鼠则作为同种异体受体。所有动物操作程序均遵循美国国立卫生研究院（NIH）发布的《实验动物护理和使用指南》的要求，所有动物实验方案均经重庆大学附属肿瘤医院动物护理与使用委员会批准。手术期间使用的所有&#160;物品，包括手术器械和溶液，均为无菌。本实验方案的示意图见图1。
1. 供体操作步骤
<ol>
	<li>使用诱导舱通过5%异氟烷吸入法对大鼠实施全身麻醉。随后，皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡，以进行同步的预先镇痛。</li>
	<li>将大鼠仰卧放置，并通过覆盖其口鼻的面罩以2%异氟烷吸入维持麻醉。在眼睛上涂抹眼用润滑剂，以防止角膜干燥。呼吸频率和节律变慢、角膜反射消失以及对足趾夹捏无反应，表明麻醉有效。</li>
	<li>使用电动剃刀剃除腹部毛发，并用0.5%碘溶液和70%酒精对皮肤进行消毒。</li>
	<li>沿中线从耻骨联合至剑突下皮下注射0.5%利多卡因，以实现局部镇痛，随后切开腹部，并使用牵开器拉开切口。</li>
	<li>从切口右侧取出肠管，并用湿润的纱布包裹，以防干燥。然后暴露左侧肾脏。</li>
	<li>使用棉签分离左侧肾脏和输尿管周围的脂肪组织，随后在20倍放大的手术显微镜下用显微镊子分离左肾动脉和静脉。必要时使用电凝止血。</li>
	<li>在左肾动脉上方约5 mm处，使用4-0单丝聚酰胺缝线结扎腹主动脉。然后，在左生殖静脉与肾上腺静脉汇合处远端横断左肾静脉。</li>
	<li>从左肾动脉下方的腹主动脉处，使用24 G头皮针注入含肝素（100 U/mL）的冰冻UW溶液冲洗肾脏，直至流出液颜色变淡。平均热缺血时间为5分钟。</li>
	<li>在紧邻腹主动脉处约2 mm位置横断左肾动脉后，在显微镊子辅助下分离肾脏和输尿管（保留周围结缔组织以确保输尿管血供）。随后在靠近膀胱处横断输尿管，并将供体左肾保存于冰冻UW溶液中。</li>
	<li>通过横断腹主动脉放血处死供体大鼠，随后将其放入CO2箱中以确保死亡。</li>
</ol>
2. 受体操作步骤
<ol>
	<li>对受体大鼠重复步骤 1.1–1.5 中所述的操作。</li>
	<li>在 20 倍放大倍率的手术显微镜下，使用棉签和显微镊子分离受体大鼠的左肾和输尿管，以及左肾动脉和肾静脉。</li>
	<li>使用无创性微血管夹夹闭左肾动脉和肾静脉根部。在距肾脏下方约 2–3 cm 处，用 8-0 聚酰胺单丝缝线结扎左输尿管，并在结扎处将其切断。</li>
	<li>在距离微血管夹 2 mm 处切断左肾动脉，在左生殖静脉与肾上腺静脉汇合处近端切断肾静脉，切除受体大鼠原有的左肾。必要时使用电凝法凝固肾上腺静脉。</li>
	<li>将供体肾脏植入受体大鼠的左侧肾窝，并在移植的供体肾脏周围放置冰屑。在 45 倍放大倍率的手术显微镜下，使用 10-0 聚酰胺单丝缝线以端对端方式将供体肾动脉和肾静脉分别与受体肾动脉和肾静脉吻合，具体如下。</li>
	<li>采用间断缝合法吻合肾动脉。
	<ol>
		<li>分别在吻合口的 12 点和 6 点位置放置固定缝线。在两个固定缝线之间，沿一侧均匀缝合 2–3 针，使用 10-0 聚酰胺单丝缝线完成。</li>
		<li>翻转固定缝线，以相同方式在另一侧的两个固定缝线之间缝合 2–3 针。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>采用连续缝合法吻合肾静脉。
	<ol>
		<li>分别在吻合口的 6 点和 12 点位置放置固定缝线。从 12 点位置开始，使用连续缝合沿一侧缝合 4–5 针，然后将连续缝线与 6 点位置的固定缝线打结，使用 10-0 聚酰胺单丝缝线完成。</li>
		<li>翻转固定缝线，从 6 点位置开始以相同方式缝合另一侧，最后将连续缝线与 12 点位置的固定缝线打结。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>先松开肾静脉上的无创性微血管夹，恢复供体肾脏的灌注；随后观察出血部位并加针缝合止血。</li>
	<li>松开肾动脉上的无创性微血管夹，观察出血部位并加针缝合止血。冷缺血时间平均为 45 分钟。</li>
	<li>在 20 倍放大倍率的手术显微镜下，使用 4-0 聚酰胺单丝缝线缝合供体输尿管末端作为牵引线，将末端拉过受体膀胱的&#34;隧道&#34;。随后，在受体膀胱外侧剪断带有缝线的供体输尿管末端，使供体输尿管自然回缩至受体膀胱内。</li>
	<li>在 45 倍放大倍率的手术显微镜下，使用 8-0 聚酰胺单丝缝线在四个等距位置，将供体输尿管外膜与受体膀胱肌层外侧缝合固定，以完成输尿管与膀胱的固定。</li>
	<li>将肠管复位至腹腔，先用 4-0 聚酰胺单丝缝线连续缝合肌肉层，再缝合皮肤层，关闭腹部切口。</li>
	<li>将受体大鼠置于干燥洁净笼盒内的 37°C 加热垫上，直至其从麻醉中恢复。</li>
	<li>术后 48 小时内，每 6 小时皮下注射一次布托啡诺（0.05 mg/kg），用于镇痛；连续 3 天每日肌肉注射一次青霉素（50,000 U/kg），用于预防感染。移植术后 10 周，将受体大鼠放入 CO2 箱中处死，以观察肾异体移植物的慢性排斥反应。</li>
</ol>

<ol><li>Cooper, J. E., Wiseman, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+immunosuppressive+agents+in+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Novel immunosuppressive agents in kidney transplantation.</a> Clinical Nephrology. 73 (5), 333-343 (2010).</li>
<li>Colaneri, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+transplant+immunosuppression--history%2C+principles%2C+and+current+practices+in+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Nursing+Journal%22%5BJournal%5D)">An overview of transplant immunosuppression--history, principles, and current practices in kidney transplantation.</a> Nephrology Nursing Journal. 41 (6), 549-560 (2014).</li>
<li>Colvin, R. B., Smith, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody-mediated+organ-allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Immunology%22%5BJournal%5D)">Antibody-mediated organ-allograft rejection.</a> Nature Reviews Immunology. 5 (10), 807-817 (2005).</li>
<li>Joosten, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+response+against+perlecan+and+collagen+types+IV+and+VI+in+chronic+renal+allograft+rejection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Antibody response against perlecan and collagen types IV and VI in chronic renal allograft rejection in the rat.</a> American Journal of Pathology. 160 (4), 1301-1310 (2002).</li>
<li>Joosten, S. A., van Ham, V., Borrias, M. C., van Kooten, C., Paul, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+against+mesangial+cells+in+a+rat+model+of+chronic+renal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Antibodies against mesangial cells in a rat model of chronic renal allograft rejection.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 20 (4), 692-698 (2005).</li>
<li>Yamanaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression+of+complement+regulatory+factors+in+rat+and+human+renal+grafts+is+associated+with+the+progress+of+acute+T-cell+mediated+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Depression of complement regulatory factors in rat and human renal grafts is associated with the progress of acute T-cell mediated rejection.</a> PLoS One. 11 (2), 0148881(2016).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoproteasome+inhibition+prevents+chronic+antibody-mediated+allograft+rejection+in+renal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Immunoproteasome inhibition prevents chronic antibody-mediated allograft rejection in renal transplantation.</a> Kidney International. 93 (3), 670-680 (2018).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoproteasome+inhibition+induces+plasma+cell+apoptosis+and+preserves+kidney+allografts+by+activating+the+unfolded+protein+response+and+suppressing+plasma+cell+survival+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Immunoproteasome inhibition induces plasma cell apoptosis and preserves kidney allografts by activating the unfolded protein response and suppressing plasma cell survival factors.</a> Kidney International. 95 (3), 611-623 (2019).</li>
<li>Miller, B. F., Gonzalez, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Kidney transplantation in the rat.</a> Nature. 194, 309-310 (1962).</li>
<li>Tillou, X., Howden, B. O., Kanellis, J., Nikolic-Paterson, D. J., Ma, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+in+renal+research%3A+kidney+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology%22%5BJournal%5D)">Methods in renal research: kidney transplantation in the rat.</a> Nephrology. 21 (6), 451-456 (2016).</li>
<li>Daniller, A., Buchholz, R., Chase, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+transplantation+in+rats+with+the+use+of+microsurgical+techniques%3A+a+new+method%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Renal transplantation in rats with the use of microsurgical techniques: a new method.</a> Surgery. 63 (6), 956-961 (1968).</li>
<li>Ahmadi, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+rat+kidney+transplantation%3A+A+novel+and+simplified+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Orthotopic rat kidney transplantation: A novel and simplified surgical approach.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (147), e59403(2019).</li>
<li>Günther, E., Walter, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+major+histocompatibility+complex+of+the+rat+%28Rattus+norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Immunogenetics%22%5BJournal%5D)">The major histocompatibility complex of the rat (Rattus norvegicus).</a> Immunogenetics. 53 (7), 520-542 (2001).</li>
<li>Loupy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Banff+2015+Kidney+Meeting+Report%3A+Current+challenges+in+rejection+classification+and+prospects+for+adopting+molecular+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The Banff 2015 Kidney Meeting Report: Current challenges in rejection classification and prospects for adopting molecular pathology.</a> American Journal of Transplantation. 17 (1), 28-41 (2017).</li>
<li>Fisher, B., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+surgical+techniques+in+research%2C+with+special+reference+to+renal+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Microvascular surgical techniques in research, with special reference to renal transplantation in the rat.</a> Surgery. 58 (5), 904-914 (1965).</li>
<li>Kamada, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+description+of+cuff+techniques+for+renal+transplantation+in+the+rat.+Use+in+studies+of+tolerance+induction+during+combined+liver+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A description of cuff techniques for renal transplantation in the rat. Use in studies of tolerance induction during combined liver grafting.</a> Transplantation. 39 (1), 93-95 (1985).</li>
<li>Grabner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+imaging+of+acute+allograft+rejection+after+rat+renal+transplantation+using+18F-FDG+PET%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Non-invasive imaging of acute allograft rejection after rat renal transplantation using 18F-FDG PET.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (74), e4240(2013).</li>
</ol>

作者声明无利益冲突。

大鼠肾移植是一项具有挑战性的工作，需要高水平的显微外科技术，其手术方法已多次优化。最初，Gonzalez 等人将供体肾脏植入受体颈部，并将供体输尿管与皮肤进行吻合9。然而，由于供体输尿管发生尿路感染和狭窄的概率较高，该术式很快被弃用。随后，供体右肾的移植术式得到改进，包括将供体肾动脉和肾静脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉吻合15，或与受体肾动脉和下腔静脉吻合11。然而，右肾动脉和肾静脉本身较细且短，增加了手术难度和失败率。此外，该术式需要阻断受体的腹主动脉和下腔静脉，导致受体动物下半身缺血以及下腔静脉血栓形成，致残率和死亡率较高。其他改进的移植术式包括采用套管法将供体主动脉和肾静脉分别与受体肾动脉和肾静脉吻合16，或采用套管法吻合输尿管12。然而，肾动脉和输尿管管径较细，使得套管制作和吻合操作困难，限制了这些移植术式的应用。
目前常用的啮齿类动物原...

肾移植已成为治疗终末期肾功能衰竭患者最有效的治疗手段。然而，T细胞介导的急性排斥反应以及同种抗体介导的体液免疫排斥反应会导致肾移植器官的病理损伤，限制肾移植术后患者的短期和长期生存1,2,3。遗憾的是，目前仍缺乏有效预防肾移植排斥反应的药物，因为肾移植排斥中免疫与病理机制尚未完全明确。因此，阐明肾移植免疫与病理排斥机制的临床前研究有助于发现新的治疗靶点，开发相应的有效药物，以预防肾移植排斥反应，最终延长患者的生存时间。
近年来，在大鼠原位肾移植模型研究中提出了许多关于肾移植排斥反应的潜在免疫学和病理生理学机制4,5,6,7,8。这些研究结果提出了多个新颖的治疗靶点及相关干预策略，有望用于抑制肾移植排斥反应，例如补体调节因子和抗CD59抗体6、免疫蛋白酶体以及环氧酮类抑制剂7,8。因此，大鼠原位肾移植是一种理想的临床前模型，可用于研究肾移植后肾移植排斥的免疫机制及移植物的病理损伤过程。
大鼠肾移植已逐渐从供体肾脏的异位移植9 采用端侧吻合法进行血管吻合，或采用套管法进行输尿管端端吻合的原位肾移植10,11,12本研究详细描述了采用端对端吻合受体肾动脉和肾静脉、以及端对侧吻合输尿管的同种原位大鼠肾移植手术方案。 &#34;隧道&#34; 输尿管-膀胱吻合方法，可避免下肢缺血和下腔静脉血栓形成，减少术后尿漏及输尿管扭曲。

<table><tbody><tr><td>&amp;nbsp;10-0 聚酰胺单丝缝合线</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td>G0090781</td><td></td></tr><tr><td>&amp;nbsp;4-0 聚酰胺单丝缝合线</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td>C1048451</td><td></td></tr><tr><td>&amp;nbsp;8-0 聚酰胺单丝缝合线</td><td>B.Braun Medical Inc.</td><td>C2090880</td><td></td></tr><tr><td>丁丙诺啡</td><td>US Biological Life Sciences</td><td>352004</td><td></td></tr><tr><td>电凝器</td><td>Electrocoagulator</td><td>ZJ1099</td><td></td></tr><tr><td>F344 和 Lewis 大鼠</td><td>实验动物中心（中国武汉，华中科技大学同济医学院）</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>纱布</td><td>河南飘安集团有限公司</td><td>10210402</td><td></td></tr><tr><td>加热垫</td><td>广州德威生物科技有限公司</td><td>DK0032</td><td></td></tr><tr><td>肝素</td><td>华北制药股份有限公司</td><td>2101131-2</td><td></td></tr><tr><td>注射器（1 ml 和 10 ml）</td><td>山东威高集团医用高分子制品股份有限公司</td><td>20211001</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>RWD 生命科学有限公司</td><td>21070201</td><td></td></tr><tr><td>青霉素G钠</td><td>武汉弘德悦欣医药科技有限公司</td><td>69-57-8</td><td></td></tr><tr><td>头皮针（24 G）</td><td>宏宇医疗集团</td><td>20183150210</td><td></td></tr><tr><td>剃毛器</td><td>Beyotime</td><td>FS600</td><td></td></tr><tr><td>小动物麻醉机</td><td>RWD 生命科学</td><td>R500</td><td></td></tr><tr><td>小动物手术器械包</td><td>Beyotime</td><td>FS500</td><td></td></tr><tr><td>氯化钠注射液</td><td>西南药业股份有限公司</td><td>H50021610</td><td></td></tr><tr><td>手术显微镜</td><td>北京天诺翔科学仪器有限公司，中国</td><td>SZX-6745</td><td></td></tr><tr><td>棉签</td><td>渝北医疗器械材料有限公司</td><td>21080274</td><td></td></tr><tr><td>胶带</td><td>明尼苏达矿业制造（上海）医疗器械有限公司</td><td>1911N68</td><td></td></tr><tr><td>UW 溶液</td><td>Bristol-Myers Squibb Company</td><td>17HB0002</td><td></td></tr></tbody></table>

一种用于肾移植排斥反应研究的大鼠原位肾移植模型

A Rat Orthotopic Renal Transplantation Model for Renal Allograft Rejection

肾移植排斥反应限制了肾移植术后患者的长期生存。大鼠原位肾移植是临床前研究中探讨肾移植排斥反应机制的重要模型，有助于开发改善肾移植长期存活的新方法。在大鼠原位肾移植中，供体肾脏的植入通常通过将血管与受体的主动脉和下腔静脉进行端-侧吻合来完成。在此模型中，供体肾脏通过端-端吻合方式连接至受体的肾动脉和肾静脉。供体输尿管则采用端-侧“隧道”法与受体膀胱进行吻合。该模型有利于输尿管-膀胱吻合口的愈合，并通过避免对下肢血供及静脉回流的干扰，提高受体的存活率。该模型可用于研究肾移植急性与慢性免疫性及病理性排斥反应的机制。本文详细描述了大鼠之间原位肾移植的具体操作步骤。

在此大鼠原位肾移植模型中，受体大鼠术后活动正常。为观察肾移植后的慢性排斥反应，受体大鼠在移植术后饲养10周，此时受体大鼠的总体存活率约为90%。死亡的主要原因为术后出血和尿液渗漏。其他主要并发症包括术中出血、肾血管血栓形成和肾积水，其发生率分别约为15%、25%和20%。大多数术中出血可通过处理止血，且不影响受体大鼠的存活。对于出现血管栓塞或肾积水的肾移植器官，应在后续研究中予以剔除。
在此模型中，F344 大鼠属于大鼠主要组织相容性复合体（MHC，RT1）单倍型 RT1lv1，而 Lewis 大鼠属于单倍型 RT1l。这两个品系在 MHC I b 类基因座 C/E/M13 上存在差异，该差异不会引起急性T细胞介导的排斥反应，但会导致后续的慢性抗体介导的排斥反应4,5。慢性移植肾病的特征包括肾小球硬化、间质纤维化、肾小管萎缩以及间质性小动脉硬化<sup class="xref...

大鼠原位肾移植模型有助于研究肾同种异体移植物排斥反应的机制。本模型采用肾植入的端对端吻合以及输尿管-膀胱的端对侧“隧道”法吻合技术，在不影响下肢血液供应和静脉回流的前提下，提高了受体的存活率。

肾移植排斥反应限制了肾移植术后患者的长期生存。大鼠原位肾移植是研究移植排斥反应机制及评估新型免疫抑制策略的一项关键且经典的实验模型。该技术能够模拟人类肾移植的解剖结构与生理环境，为深入探究缺血-再灌注损伤、急性与慢性排斥反应、免疫耐受诱导等关键科学问题提供了可靠的平台。通过显微外科技术实施肾动静脉及输尿管的端端吻合，可实现移植肾的解剖复位与功能恢复。该模型广泛应用于移植免疫学、器官保存、生物材料及再生医学等研究领域，对于推动临床肾移植的进步具有重要意义。

大鼠原位肾移植是临床前研究中用于探讨肾移植排斥反应机制的重要模型，有助于开发新的方法以提高肾移植物的长期存活率。该手术中采用肾血管端-端吻合，可避免下肢缺血和下腔静脉血栓形成；而输尿管采用端-侧隧道法吻合，可减少术后尿漏及输尿管扭曲。该方法为研究肾移植后免疫排斥反应及移植物损伤机制提供了重要手段。首先使用手术剪从耻骨联合沿中线向剑突下方切开腹部。然后用牵开器撑开切口。从切口右侧取出肠管，并用湿润的纱布包裹，以防干燥。然后暴露左侧肾脏。在20倍放大镜下使用显微镊子和棉签分离左侧肾动脉和肾静脉。必要时结扎并横断肾上腺静脉和生殖静脉。借助显微镊分离输尿管，保留周围结缔组织以确保输尿管的血液供应。使用血管夹或4-0聚酰胺单丝缝线，在左肾动脉上方约五毫米处分离并夹闭或结扎主动脉。随后，在左生殖静脉与肾上腺静脉汇合处远端横断左肾静脉。使用24号手术刀针头，从左肾动脉下方的主动脉用添加了每毫升100单位肝素的冰冷UW溶液灌注肾脏，直至血液颜色变淡。在靠近主动脉处横断左肾动脉，然后在靠近膀胱处横断输尿管，并借助显微镊子和剪刀分离肾脏。将供体左肾保存在冰冷的UW溶液中。在20倍放大倍数下，使用棉签和显微镊子分离受体大鼠的左肾动脉和肾静脉。必要时结扎肾上腺静脉和生殖静脉。使用显微血管夹在根部夹闭左肾动脉和肾静脉，然后在距离显微血管夹3毫米处横断肾动脉和肾静脉。使用8-0聚酰胺单丝缝线在左输尿管距离肾脏约2至3厘米处进行游离并结扎，并在结扎处横断输尿管。借助显微镊子和剪刀游离受体大鼠的左侧原生肾脏并将其切除。将供体肾脏植入受体大鼠的左侧肾窝，并在移植的供体肾脏周围放置冰屑。切换至45倍放大倍数，然后使用10-0聚酰胺单丝缝线，将供体的肾动脉和肾静脉与受体的肾动脉和肾静脉以端对端方式吻合。采用间断缝合法吻合肾动脉时，先在吻合口的12点和6点位置放置固定缝线。在两个固定缝线之间，等距离地对吻合口的一侧缝合两到三针。翻转固定缝线，同样在两个固定缝线之间用两到三针缝合吻合口的另一侧。使用连续缝合方法吻合肾静脉时，将固定缝线置于吻合口的6点和12点位置。从12点位置开始，用连续缝合法以四到五针缝合吻合口的一侧。翻转固定缝线，同样从六点钟位置开始缝合吻合口的另一侧。通过松开肾静脉上的无创微血管夹，恢复供体肾脏的血流，观察出血部位，必要时加缝针线。接着，松开肾动脉上的无创微血管夹，确认出血部位，必要时加缝针线。在20倍放大倍数下，使用4-0单丝聚酰胺缝线将供体输尿管末端结扎或缝合，作为牵引线以将末端穿过受体膀胱的隧道。使用8-0单丝聚酰胺缝线，在四个等距位置将供体输尿管的外膜与受体膀胱的肌层外部缝合，从而将供体输尿管固定于受体膀胱。随后，在受体膀胱外侧剪断带有缝线的供体输尿管末端，使供体输尿管回缩进入受体膀胱内。将肠道复位至腹腔内，使用4-0聚酰胺单丝缝线连续缝合肌肉层，随后缝合皮肤层。移植术

a-rat-orthotopic-renal-transplantation-model-for-renal-allograft

Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

一种用于肾同种异体排斥的大鼠原位肾移植模型

本视频展示了大鼠原位主动脉移植模型，作为一种研究移植血管病变（TVP）发生的简单模型。...

原位主动脉移植：一种研究慢性血管病变发生的大鼠模型

本文介绍一种大鼠肾移植模型，通过使用18F-氟脱氧葡萄糖的正电子发射断层扫描技术，无创评估急性同种移植排斥反应。...

使用18F-FDG PET对大鼠肾移植后急性移植物排斥反应进行无创成像

本文介绍了一种研究排斥反应免疫学机制的实验方案。所采用的手术模型具有手术时间短、操作步骤简洁的特点。根据供体与受体小鼠品系的组合不同，移植肾脏可能出现急性细胞排斥反应或慢性移植物损伤，后者以间质纤维化和肾小管萎缩为特征。...

小鼠肾移植：同种异体移植物排斥模型

本文及实验方案旨在详细说明并演示大鼠原位肾移植手术的操作过程。该方法通过采用静脉和输尿管套管吻合技术，简化了手术步骤，以实现供体肾脏的正确灌注，并缩短再灌注时间。...

大鼠原位肾移植：一种新颖且简化的手术方法

我们描述了一种大鼠异位腹腔心脏移植模型，该模型对现有策略进行了改进，从而简化了手术操作。此外，我们还介绍了一种通过耳部注射活体心肌细胞建立的新型排斥反应模型，可在大鼠中进一步开展移植免疫学分析。...

大鼠异位心脏与心肌细胞移植的免疫学模型

本文所述的大鼠异位辅助性肝移植方案为研究肝同种异体移植物排斥反应的机制提供了一种实用的实验工具。该模型有助于减轻大鼠原位肝移植过程中的手术难度和动物应激反应。...

利用输尿管肝管吻合术的异位辅助性全肝大鼠移植模型用于同种异体移植物排斥研究

本方案描述了一种基于大鼠的带有回肠造口的肠道移植模型，用于评估药物干预对移植物排斥反应的时间进程影响。...

带外置回肠造口的大鼠小肠移植排斥反应模型用于纵向预后评估

大鼠原位肝移植是生物医学研究中不可或缺的实验模型。本文介绍了我们采用50%部分移植物并进行肝动脉重建的大鼠原位肝移植手术操作步骤。...

部分原位肝移植伴肝动脉重建的大鼠手术操作

本文所述的肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型包括右肾切除术以获取对照组织，以及夹闭左肾蒂以诱导缺血，从而导致急性肾损伤。该模型采用经腹正中切口，所有操作均通过单一手术切口完成。...

肾缺血再灌注损伤：一种小鼠损伤与再生模型

本文的目的是描述在小鼠中进行肾移植手术所需的操作步骤，特别关注动脉吻合的细节。...

小鼠肾脏移植技术

了解大鼠原位肾移植模型的手术技术，用于研究肾同种异体排斥机制和移植肾损伤。该方法通过端端血管吻合和输尿管隧道法提高受体存活率，为临床移植研究提供可靠框架。

一种用于肾移植排斥反应研究的大鼠原位肾移植模型

探索更多视频