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October 06, 2023
DOI:
10.3791/65338-v
我们正试图为研究人员找到简单且低成本的方法,以低于衍射极限的分辨率对他们的生物标本进行成像,特别是在神经科学和临床病理学领域。许多最近的扩增显微镜发展涉及修改凝胶化学以进一步扩增样品,改变锚定分子以可视化不同的靶标,并利用加热改变来保存蛋白质表位。通过创新的放大倍率,一种强大的扩展显微镜方法,可以对各种生物或临床标本进行纳米级成像。
它通过消除专用设备需求来简化超分辨率显微镜,同时保留高达 15 纳米分辨率的复杂生物学特征,从而提高全球实验室的可及性和实用性。以前,用户必须尝试不同的扩增显微镜技术,具体取决于他们想要成像的组织和生物分子。放大镜可实现各种生物分子和组织类型的高分辨率成像,而无需特定的锚定步骤或专用设备,从而弥合了纳米级成像的重大差距。
放大倍增将更坚硬的临床样本扩展四倍以上,同时保留蛋白质表位,从而更准确地研究排队疾病。它的化学锚还保留了广泛的生物分子,使其可用于动物模型的基础研究 放大简化了生物分子和完整标本的纳米级成像,无需复杂的光学器件或专用设备。它适用于各种成像模式和扩展显微镜策略,允许获得具有成本效益的纳米级成像,从而加速药物治疗和疾病研究,同时可能改变组织图谱的生成。
放大为研究提供了无限的可能性。目前的重点领域包括扩大组织部位,研究纳米级的病理人类样本,以及研究学习和疾病期间大脑的最小尺度变化。
这里展示的是新版本的扩增显微镜(ExM),放大,经过修改可扩展高达11倍,保留全面的生物分子类别,并与多种组织类型兼容。它能够使用传统的衍射极限显微镜询问生物分子的纳米级构型。
06:18
Imaging of Podocytic Proteins Nephrin, Actin, and Podocin with Expansion Microscopy
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Cite this Article
Gallagher, B. R., Klimas, A., Cheng, Z., Zhao, Y. Universal Molecular Retention with 11-Fold Expansion Microscopy. J. Vis. Exp. (200), e65338, doi:10.3791/65338 (2023).
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