November 10th, 2023
该协议描述了使用单细胞分选方法对人间充质干细胞进行荧光激活细胞分选的使用。具体而言,当与基于多参数流式细胞术的方法相结合时,使用单细胞分选可以实现来自异质群体的免疫表型细胞的 99% 纯度。
该协议详细介绍了在单个平台上准确表征和纯化人类间充质干细胞的关键方法,从而实现干细胞移植等高效的下游应用。对于通过对工程干细胞或天然干细胞进行精确的单细胞分选来增强分子和细胞遗传学检测的临床实验室来说,这一点尤为重要。分离纯化干细胞群的常用方法包括免疫磁分离、密度梯度或微流控细胞分选等技术。
像索引分选这样的技术允许它与单细胞RNA谱联系起来,该分析可以提取每个分选细胞的转录组信息。关键挑战包括保持样品质量、优化细胞培养条件,包括分选期间和分选后的细胞密度和活力。此外,还将考虑为仪器选择合适的喷嘴尺寸,并确保及时接触分选机。
该协议说明了用于免疫表型和分选所需细胞群的精确染色panel。它确保了标准化的样品质量、最佳的细胞活力、细胞群分选的密度,并在 FACSDiva 软件上定义了分选实验参数。该方法能够对表达特定生物标志物的干细胞群进行直接选择和免疫表型分析。
这个简单的平台允许根据目标人群进行高效分选,帮助和获得纯化的样品,用于后续的下游应用。
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该协议概述了一种使用荧光活化细胞分选(FACS)精确分离和表征人类间充质干细胞(MSCs)的方法。该协议将干细胞群体的纯度提高到99%,促进其在干细胞移植等进一步应用中的使用。