Name: Um Modelo Ex Vivo Porcino para Testes Hidrodinâmicos de Procedimentos Experimentais de Valva Aórtica e Novos Dispositivos Médicos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-08-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 56 s
Description: Aprenda a montar uma válvula aórtica porcina em um duplicador de pulso para testes hidrodinâmicos. Este método preserva as propriedades da válvula e permite avaliar materiais de substituição de folhetos para reparo valvar.

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Gostaríamos de agradecer ao laboratório da Dra. Gordana Vunjak-Novakovic, incluindo Julie Van Hassel, Mohamed Diane e Panpan Chen, por nos permitir usar o tecido de resíduos cardíacos de seus experimentos. Este trabalho foi apoiado pela Congenital Heart Defect Coalition em Butler, NJ, e pelo National Institutes of Health em Bethesda, MD (5T32HL007854-27).

Todas as pesquisas foram realizadas de acordo com as diretrizes institucionais para o cuidado com os animais.
1. Considerações e preparativos para a experiência
<ol><li>Utilizar um duplicador de pulso (DP) adequado para a simulação do débito cardíaco através da AV. O PD precisará ser capaz de acomodar materiais biológicos e ser capaz de ser limpo.<ol><li>Utilizar configurações de DP apropriadas para testar a VA: volume de deslocamento de 70 mL e 70 batimentos por minuto (débito cardíaco de 5 L/min), 35% do ciclo cardíaco em sístole, gradiente de pressão transvalvar médio de 100 mmHg, gradiente de pressão máximo de 120 e gradiente de pressão mínimo de 80.</li>
		<li>Utilizar soro fisiológico à temperatura ambiente (TR) (NaCl 0,9%) como meio fluido.</li>
	</ol></li>
	<li>Localize ou crie (usando impressão 3D ou um método semelhante) luminárias adequadas para montar o AV suíno para teste no PD.<ol><li>Utilize luminárias modeladas nas luminárias fornecidas com o duplicador de pulso com as seguintes especificações: certifique-se de que o diâmetro interno da luminária seja semelhante ao diâmetro da AV em estudo, o comprimento da fixação seja de pelo menos 2 cm e a largura útil da fixação seja de pelo menos 4 cm (Figura 1).</li>
		<li>Use O-rings de borracha como juntas nas extremidades das luminárias.</li>
	</ol></li>
	<li>Obter uma peça de coração após a cardioectomia (Figura 2A).<ol><li>Use espécimes cardíacos suínos do matadouro ou resíduos de tecidos de animais saudáveis e que não fizeram parte de nenhum protocolo experimental que afetará seus corações.</li>
		<li>Obter espécime após a cardiectomia ou realizar cardiectomia post-mortem, incluindo transecção da veia cava superior, veia cava inferior, tronco da artéria pulmonar (AP), todas as veias pulmonares e aorta na face distal do arco aórtico. OBS: Espécimes frescos, com menos de 6 h post-mortem ou armazenados em soro fisiológico estéril com solução antibiótica a 1% (penicilina e estreptomicina) em refrigerador a 4 oC por até 7 dias, devem ser utilizados para este experimento. Tecidos fixados em formalina ou glutaraldeído produzirão resultados hidrodinâmicos alterados devido ao aumento da rigidez.</li>
	</ol></li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig01v2.jpg"> Figura 1: Dispositivos personalizados impressos em 3D para montagem das válvulas aórticas porcinas no duplicador de pulso. Conforme observado no protocolo, o comprimento do acessório deve ser de pelo menos 2 cm e a largura útil do acessório deve ser de pelo menos 4 cm. Clique <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig01large.jpg" target="_blank">aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
2. Ressecção de estruturas do lado direito
<ol><li>Dissecar a AP da aorta com tesoura de Metzenbaum até que o tecido ventricular seja visível (Figura 2B).</li>
	<li>Dissectar e ligar com seda amarra ambas as artérias coronárias em sua origem dos seios aórticos, tomando cuidado para não estreitar os seios.</li>
	<li>Transeccionar as artérias coronárias distais aos laços de seda.</li>
	<li>Incisar o ventrículo direito (VD) entre a aorta e o AP na base da valva pulmonar com tesoura de Metzenbaum (Figura 2C).</li>
	<li>Iniciando anteriormente, continuar a incisão circunferencialmente ao longo do septo interventricular para remover a parede livre do VD (Figura 2D, E).</li>
	<li>Continuar a incisão posteriormente através do anel da valva tricúspide ao longo do septo interatrial para remover todo o tecido atrial direito (Figura 2F).</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig02.jpg"> Figura 2: Peça de cardiectomia e ressecção de estruturas do lado direito. (A) Espécime de cardiectomia. (B) Artéria pulmonar principal dissecada da aorta até que o tecido ventricular seja visível. (C) Incisar o ventrículo direito (VD) na base da valva pulmonar. (D) Continuando a incisão ao longo do septo interventricular anteriormente. (E) Remoção da parede livre de VD continuando a incisão circunferencialmente ao longo do septo interventricular. (F) Espécime com estruturas do lado direito removidas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
3. Preparo da via de saída do ventrículo esquerdo (VSVE) para canulação com a prótese de PD
<ol><li>Incidir o átrio esquerdo (AE) através do óstio da veia pulmonar direita paralelo à aorta com tesoura de Metzenbaum (Figura 3A). NOTA: Embora exista variabilidade limitada, a anatomia da veia pulmonar porcina geralmente termina em dois óstios da veia pulmonar que entram no AE8.</li>
	<li>Continuar a incisão em direção à comissura anterolateral da valva mitral (VM), deixando pelo menos um manguito de 3 mm de tecido atrial no lado da aorta.</li>
	<li>Aparar o excesso de tecido AE, mantendo o manguito de 3 mm de tecido atrial na aorta e circunferencialmente o anel VM (Figura 3B).</li>
	<li>Estender a incisão sobre o ventrículo esquerdo (VE) através da comissura ântero-lateral da VM, tomando o cuidado de preservar o músculo papilar anterolateral (Figura 3C).</li>
	<li>Divida as cordas tendíneas do músculo papilar anterolateral até a cúspide posterior da VM, preservando as fixações à cúspide anterior da VM.</li>
	<li>Continue a incisão até o ápice do coração.</li>
	<li>Aparar o excesso de tecido do VE abaixo dos músculos papilares, preservando ambos os músculos papilares (Figura 3D).</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig03.jpg"> Figura 3: Preparo da via de saída do ventrículo esquerdo para canulação com o dispositivo duplicador de pulso. (A) Incisar o átrio esquerdo (AE) através do óstio da veia pulmonar direita. (B) Excesso de tecido do AE aparado, mantendo pelo menos um manguito de 3 mm de tecido atrial na aorta e mantendo o anel valvar mitral circunferencialmente. (C) Extensão da incisão sobre o ventrículo esquerdo (VE) através da comissura ântero-lateral da valva mitral. (D) Remoção do excesso de tecido do VE abaixo dos músculos papilares. A tesoura é visível no canto superior direito da imagem. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
4. Preparo da aorta para canulação com a fixação da DP
<ol><li>Cortar qualquer excesso de tecido linfático, conjuntivo ou da artéria pulmonar da aorta (Figura 4A).</li>
	<li>Incisar o aspecto superior do arco aórtico desde a aorta descendente até a artéria subclávia esquerda com tesoura de Metzenbaum (Figura 4B).</li>
	<li>Continuar a incisão na face superior do arco aórtico desde a artéria subclávia esquerda até o tronco braquiocefálico (Figura 4C, D). NOTA: Os ramos do arco aórtico porcino de distal para proximal incluem a artéria subclávia esquerda e o tronco braquiocefálico, que dá origem à artéria subclávia direita, artéria carótida direita e artéria carótidaesquerda9.</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig04.jpg"> Figura 4: Preparo da aorta para canulação com a fixação do duplicador de pulso. (A) Arco aórtico com excesso de tecido retirado. Observar os dois vasos do arco aórtico porcino, o tronco braquiocefálico e a artéria subclávia esquerda. (B) Início da incisão ao longo da face superior do arco aórtico desde a aorta descendente até a artéria subclávia esquerda. (C) Continuando a incisão ao longo da face superior do arco aórtico desde a artéria subclávia esquerda até o tronco braquiocefálico. (D) Incisão completa do arco aórtico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
5. Canulação da VSVE com o dispositivo PD
<ol><li>Testar o posicionamento do acessório na VSVE e aparar o excesso de tecido do VE.<ol><li>Insira o dispositivo na VSVE sob a cúspide anterior da VM.</li>
		<li>Enrole a parede livre de LV ao redor da luminária.</li>
		<li>Corte o excesso de tecido do VE para manter um envoltório apertado ao redor do aparelho.</li>
		<li>Remover metade da espessura da parede livre do VE a partir do septo interventricular, mantendo pelo menos 1 cm de epicárdio na borda livre para manter a integridade da linha de sutura (Figura 5A).</li>
		<li>Recorte 1 cm de tecido do canto superior do envoltório de parede livre do VE (Figura 5A).</li>
	</ol></li>
	<li>Posicione o acessório na VSVE com o orifício de fixação da haste de suporte 1 cm atrás da incisão do VE (Figura 5B).<ol><li>Tome cuidado para não inserir o acessório muito longe na VSVE, de modo que ele dilate o anel AV.</li>
	</ol></li>
	<li>Fixar a cúspide anterior do VM ao acessório com uma ou duas hastes de 6 polegadas posicionadas entre as cordas tendíneas da cúspide (Figura 5C).</li>
	<li>Sutura a parede livre do VE ao redor do acessório (Figura 5D).<ol><li>Comece suturando o manguito de tecido do AE na aorta ao anel MV usando uma sutura simples e contínua com uma agulha de ponto de cone.</li>
		<li>Continue o ponto de corrida no VE, não rasgando o tecido do VE.</li>
	</ol></li>
</ol><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig05.jpg"> Figura 5: Canulação da via de saída do ventrículo esquerdo com a fixação do duplicador de pulso. (A) Metade da espessura da parede livre do VE removida com 1 cm de epicárdio mantido na borda livre. A linha pontilhada indica a área de 1 cm a ser removida do canto superior do envoltório de parede livre de VE. (B) Orifício de fixação da haste de apoio posicionado 1 cm atrás da incisão na parede livre do VE. (C) Zip tie fixando a cúspide anterior da VM à luminária proximal. (D) Parede livre de VE suturada ao redor do acessório. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
6. Canulação da aorta com fixação em DP e preparo final para teste de DP
<ol><li>Medir o diâmetro da VA usando dilatadores Hegar para auxiliar na interpretação dos resultados do teste de DP.</li>
	<li>Identificar a posição neutra da aorta levantando o espécime da mesa segurando a aorta (Figura 6A).</li>
	<li>Insira o dispositivo de fixação PD na aorta, tendo o cuidado de alinhar os orifícios de fixação da haste na posição neutra da aorta.</li>
	<li>Verifique o comprimento do corpo de prova inserindo as hastes de suporte.</li>
	<li>Fixe o acessório DP na aorta usando uma ou duas gravatas de 6 polegadas (Figura 6B).</li>
	<li>Fixe a VSVE ao redor do acessório PD usando uma ou duas amarras de 8 polegadas.</li>
	<li>Fixe as hastes de apoio no lugar usando parafusos fornecidos com o conjunto PD.</li>
	<li>Coloque o corpo de prova em DP e inicie o ensaio (Figura 6C, Vídeo 1 e Vídeo 2).</li>
	<li>Sutura quaisquer vazamentos conforme necessário.</li>
</ol><img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65885/65885fig06.jpg"> Figura 6: Canulação da aorta e ensaio no duplicador de pulsos. (A) Levantar o espécime da mesa junto à aorta para identificar a posição neutra da aorta. (B) Fixação distal na aorta com zíperes. (C) Amostra montada no duplicador de pulsos para ensaios hidrodinâmicos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65885/65885fig06large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
7. Realizar procedimento experimental
OBS: Realizar procedimentos experimentais como o procedimento de Ozaki conforme descrito anteriormente 5,6,7 e repetir o teste de DP.
<ol><li>Se o tecido tiver ficado ressecado durante o procedimento, aperte os zíperes e reforce a linha de sutura conforme necessário.</li>
</ol>8. Armazenamento a longo prazo do espécime (se desejado)
<ol><li>Colocar o espécime em formalina a 10% por 168 h (1 semana)10,11.</li>
	<li>Após a fixação do tecido, lavar o espécime com água deionizada e colocá-lo em etanol 70% para armazenamento a longo prazo.</li>
</ol>

Avaliação das propriedades hidrodinâmicas em valvas aórticas suínas montadas

<ol><li>Aluru, J. S., Barsouk, A., Saginala, K., Rawla, P., Barsouk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valvular+heart+disease+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Valvular heart disease epidemiology.</a> Medical Science. 10 (2), Basel, Switzerland. 32(2022).</li>
<li>Herrmann, J. L., Brown, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seven+decades+of+valved+right+ventricular+outflow+tract+reconstruction%3A+The+most+common+heart+procedure+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Seven decades of valved right ventricular outflow tract reconstruction: The most common heart procedure in children.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 160 (5), 1284-1288 (2020).</li>
<li>Rotman, O. M., Bianchi, M., Ghosh, R. P., Kovarovic, B., Bluestein, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+TAVR+valve+design%2C+modelling%2C+and+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Medical+Devices%22%5BJournal%5D)">Principles of TAVR valve design, modelling, and testing.</a> Expert Review of Medical Devices. 15 (11), 771-791 (2018).</li>
<li>Pibarot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+for+predicting+and+assessing+prosthesis-patient+mismatch+after+aortic+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging for predicting and assessing prosthesis-patient mismatch after aortic valve replacement.</a> JACC Cardiovascular Imaging. 12 (1), 149-162 (2019).</li>
<li>Ozaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+valve+reconstruction+using+self-developed+aortic+valve+plasty+system+in+aortic+valve+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Interactive+Cardiovascular+and+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Aortic valve reconstruction using self-developed aortic valve plasty system in aortic valve disease.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 12 (4), 550-553 (2011).</li>
<li>Krane, M., Amabile, A., Ziegelmüller, J. A., Geirsson, A., Lange, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+valve+neocuspidization+%28the+Ozaki+procedure%29%5BTitle%5D)+AND+%22Multimedia+Manual+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Aortic valve neocuspidization (the Ozaki procedure).</a> Multimedia Manual of Cardiothoracic Surgery. , (2021).</li>
<li>Ozaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+total+of+404+cases+of+aortic+valve+reconstruction+with+glutaraldehyde-treated+autologous+pericardium%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">A total of 404 cases of aortic valve reconstruction with glutaraldehyde-treated autologous pericardium.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 147 (1), 301-306 (2014).</li>
<li>Vandecasteele, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pulmonary+veins+of+the+pig+as+an+anatomical+model+for+the+development+of+a+new+treatment+for+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia+Histollogia+Embryologia%22%5BJournal%5D)">The pulmonary veins of the pig as an anatomical model for the development of a new treatment for atrial fibrillation.</a> Anatomia Histollogia Embryologia. 44 (1), 1-12 (2015).</li>
<li>Góes, A. M. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+angiotomographic+study+of+swine+vascular+anatomy%3A+contributions+to+research+and+training+models+in+vascular+and+endovascular+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Vascular+Brasilerio%22%5BJournal%5D)">Comparative angiotomographic study of swine vascular anatomy: contributions to research and training models in vascular and endovascular surgery.</a> Journal Vascular Brasilerio. 20, 20200086(2021).</li>
<li>Hołda, M. K., Klimek-Piotrowska, W., Koziej, M., Piątek, K., Hołda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+different+fixation+protocols+on+the+preservation+and+dimensions+of+cardiac+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Influence of different fixation protocols on the preservation and dimensions of cardiac tissue.</a> Journal of Anatomy. 229 (2), 334-340 (2016).</li>
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<li>Spampinato, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grading+of+aortic+regurgitation+by+cardiovascular+magnetic+resonance+and+pulsed+Doppler+of+the+left+subclavian+artery%3A+harmonizing+grading+scales+between+imaging+modalities%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Grading of aortic regurgitation by cardiovascular magnetic resonance and pulsed Doppler of the left subclavian artery: harmonizing grading scales between imaging modalities.</a> International Journal of Cardiovascular Imaging. 36 (8), 1517-1526 (2020).</li>
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<li>Paulsen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+ex+vivo+comparison+of+5+clinically+used+conduit+configurations+for+valve-sparing+aortic+root+replacement+using+a+3-dimensional-printed+heart+simulator%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Comprehensive ex vivo comparison of 5 clinically used conduit configurations for valve-sparing aortic root replacement using a 3-dimensional-printed heart simulator.</a> Circulation. 142 (14), 1361-1373 (2020).</li>
<li>Al-Atassi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aortic+annular+geometry+on+aortic+valve+insufficiency%3A+Insights+from+a+preclinical%2C+ex+vivo%2C+porcine+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Impact of aortic annular geometry on aortic valve insufficiency: Insights from a preclinical, ex vivo, porcine model.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 150 (3), 656-664 (2015).</li>
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</ol>

Os autores não têm conflitos de interesse financeiros relevantes a declarar.

O método aqui apresentado fornece uma plataforma para testes hidrodinâmicos da AV, a fim de examinar o efeito de um procedimento experimental ou de um novo dispositivo médico. Através da montagem da válvula aórtica nativa em uma máquina duplicadora de pulsos, podemos determinar o efeito do procedimento experimental sobre todos os parâmetros hidrodinâmicos utilizados na investigação e aprovação de novas próteses valvares (ISO 5840). Isso oferece uma oportunidade de ajustar procedimentos e próteses antes do uso em um model...

A valvopatia aórtica representa um importante ônus para a saúde pública, particularmente a estenose aórtica, que afeta 9 milhões de pessoas em todo omundo1. As estratégias para abordar essa doença estão evoluindo atualmente e incluem o reparo da valva aórtica e a troca valvar aórtica. Na população pediátrica, especialmente, há um incentivo significativo para o reparo em vez da substituição da valva, uma vez que as próteses atualmente disponíveis são propensas à degeneração estrutural valvar (DVS) e não são tolerantes ao crescimento, necessitando de reoperação para reposição à medida que o paciente cresce. Mesmo a cirurgia de Ross, que substitui a valva aórtica (AV) doente pela valva pulmonar nativa (VP), requer uma prótese ou enxerto em posição pulmonar, que também está sujeito à DVS e, muitas vezes, à tolerância limitada ao crescimento2. Novas abordagens para a doença valvar aórtica estão sendo desenvolvidas, e há necessidade de testes em um contexto biologicamente relevante antes da aplicação em um modelo animal de grande porte.
Desenvolvemos um método para testar um AV suíno que pode fornecer informações sobre a função da válvula antes e depois de um procedimento experimental ou aplicação de um novo dispositivo médico. Ao montar a AV porcina em uma máquina duplicadora de pulsos comercialmente disponível, podemos comparar as características hidrodinâmicas que são comumente usadas na investigação e, finalmente, aprovação de próteses valvares, incluindo fração de regurgitação (FR), área de orifício efetivo (EOA) e diferença de pressão positiva média (PPD)3,4. A intervenção pode então ser ajustada em um contexto biologicamente relevante antes do uso em um modelo animal de grande porte, limitando assim o número de animais necessários para produzir um procedimento ou prótese que possa ser usada em humanos. Os corações utilizados para este experimento podem ser obtidos do matadouro local ou resíduos de tecidos de outros experimentos, portanto, não é necessário sacrificar um animal apenas para os fins deste experimento.
Em nosso trabalho, usamos este método para desenvolver um novo material de remendo para reparo e substituição valvar. Testamos a função hidrodinâmica de uma variedade de materiais de remendo realizando um procedimento de neocuspidização da valva aórtica (procedimento de Ozaki 5,6,7) em AVs porcinos e testando-os no duplicador de pulso antes e após o procedimento. Isso nos permitiu ajustar o material com base em seu desempenho hidrodinâmico. Assim, este método fornece uma plataforma para testes hidrodinâmicos de procedimentos experimentais e novos dispositivos médicos para uso na AV antes da aplicação em um modelo animal de grande porte.

<table><tbody><tr><td>Impressora 3D</td><td>Ultimaker Ultimaker</td><td>S5</td><td>Usado para imprimir acessórios personalizados para testes hidrodinâmicos</td></tr><tr><td>Crile-Wood Needle Driver</td><td>Emerald Instruments</td><td>2.0638.15</td><td>Usado para suturar ventrículo</td></tr><tr><td>Debakey Fórceps</td><td>Jarit</td><td>320-110</td><td>Usado para dissecação e preparação de amostras (pode usar vários se estiver trabalhando com um assistente)</td></tr> <tr><td>Etanol 200 prova</td><td>Decon Labs Inc. </td><td>DSP-MD.43</td><td>Usado para armazenamento fixo de tecidos</td></tr><tr><td>Formalina 10%</td> <td>Epredia</td><td>5701</td><td>Usado para fixação de tecidos</td></tr><tr><td>Gerald Forceps</td><td>Jarit</td><td>285-126</td><td>Usado para dissecação e preparação de amostras</td></tr><tr><td>Frascos de vidro</td><td>QAPPDA</td><td>B07QCP54Z3</td><td>Usado para armazenamento</td></tr><tr><td>de tecidos Glutaraldeído 25%</td> <td>Microscopia Eletrônica Ciências</td><td>16400</td><td>Usado para tecidos solução</td></tr><tr><td>tampão HEPES 1 M</td><td>Fisher</td><td>BP299-100</td><td>Usado para fazer glutaraldeído 0,6%</td></tr> <tr><td>Mayo Tesoura</td><td>Jarit</td><td>099-200</td><td>Usado para cortar sutura</td></tr><tr><td>Metzenbaum Tesoura</td><td>Jarit</td><td>099-262</td><td>Usado para dissecção e preparação de amostras</td></tr><tr><td>O-ring</td><td>Sterling Seal & Fornecimento Inc.</td><td>AS568-117</td><td>Usado como uma junta na extremidade dos acessórios impressos em 3D</td></tr><tr><td>Resina de ácido polilático</td><td>Ultimaker</td><td>1609</td><td>Usado para acessórios de impressão 3D</td></tr><tr><td>Sutura de polipropileno</td><td>Covidien</td><td>VP-762-X</td><td>Usado para sutura de ventrículo, agulha cônica</td></tr><tr><td>Duplicador de pulso</td><td>BDC Laboratories</td><td>HDTi-6000</td><td>Usado para testes hidrodinâmicos</td></tr><tr><td>Laços de seda</td><td>Covidien</td><td>S-193</td><td>Usado para ligar artérias coronárias</td></tr><tr><td>Braçadeira de amígdala</td><td>Aesculap</td><td>BH957R</td><td>Usado para dissecção de artéria coronária</td></tr><tr><td>Abraçadeiras (6 polegadas)</td> <td>Advanced Cable Ties, Inc.</td><td>AL-06-18-9-C</td><td>Usado para prender a amostra aos acessórios, 157,14 mm de comprimento (6 polegadas), 2,5 mm de largura</td></tr><tr><td>Braçadeiras (8 polegadas)</td><td>GTSE</td><td>GTSE-20025B.1000</td><td>Usado para prender a amostra aos acessórios, 203 mm de comprimento (8 polegadas), 2,5 mm de largura</td></tr></tbody></table>

um modelo ex vivo porcino para testes hidrodinâmicos de procedimentos experimentais de valva aórtica e novos dispositivos médicos

An Ex Vivo Porcine Model for Hydrodynamic Testing of Experimental Aortic Valve Procedures and Novel Medical Devices

As opções para testar novos procedimentos cardíacos e dispositivos médicos investigativos antes do uso em um modelo animal são limitadas. Neste estudo, apresentamos um método de montagem de uma valva aórtica porcina em um duplicador de pulsos para avaliar suas propriedades hidrodinâmicas. Essas propriedades podem então ser avaliadas antes e depois da realização do procedimento sob investigação e/ou da aplicação do dispositivo médico investigativo. A fixação do segmento de entrada apresenta certa dificuldade devido à ausência de miocárdio circunferencial na via de saída do ventrículo esquerdo. Esse método resolve essa questão fixando o segmento de influxo usando a cúspide anterior da valva mitral e, em seguida, suturando a parede livre do ventrículo esquerdo ao redor do dispositivo de influxo. O segmento de saída é fixado simplesmente inserindo o acessório em uma incisão na face superior do arco aórtico. Observamos que os espécimes apresentaram propriedades hidrodinâmicas significativamente diferentes antes e após a fixação tecidual. Esse achado nos induziu a utilizar espécimes frescos em nossos testes e deve ser considerado ao utilizar este método. Em nosso trabalho, usamos esse método para testar novos materiais de remendo intracardíaco para uso na posição valvar, realizando um procedimento de neocuspidização da valva aórtica (procedimento de Ozaki) nas valvas aórticas porcinas montadas. Essas válvulas foram testadas antes e após o procedimento para avaliar a mudança nas propriedades hidrodinâmicas em comparação com a valva nativa. Neste trabalho, relatamos uma plataforma para testes hidrodinâmicos de procedimentos experimentais da valva aórtica que permite a comparação com a valva nativa e entre diferentes dispositivos e técnicas utilizadas para o procedimento sob investigação.

Os dados representativos coletados do duplicador de pulso incluem fração de regurgitação (FR), área de orifício efetivo (EOA) e diferença de pressão positiva média (PPD). A RF e EOA, em particular, são usadas nas normas ISO para válvulas protéticas (ISO 5840) e serão importantes para coletar se produtos de válvulas protéticas estiverem sob investigação. O PPD oferece informações sobre quanta pressão é necessária para abrir a válvula e é comumente referenciado quando se discute a substituição de prótese valvar<sup class="...

Apresentamos um método de montagem de uma valva aórtica porcina em um duplicador de pulso para testar suas propriedades hidrodinâmicas. Este método pode ser usado para determinar a mudança na hidrodinâmica após a aplicação de um procedimento experimental ou novo dispositivo médico antes do uso em um modelo animal de grande porte.

Um Modelo Ex Vivo Porcino para Testes Hidrodinâmicos de Procedimentos Experimentais de Valva Aórtica e Novos Dispositivos Médicos

The options for testing new cardiac procedures and investigative medical devices prior to use in an animal model are limited. In this study, we present a ...

Existem opções limitadas para testar novos procedimentos cardíacos e dispositivos médicos investigativos antes do uso em um modelo animal de grande porte. Nosso protocolo oferece a oportunidade de ajustar tais procedimentos e dispositivos em um contexto biologicamente e anatomicamente relevante antes de embarcar em estudos com grandes animais. Outras técnicas para a montagem de uma válvula aórtica em um duplicador de pulso requerem a inserção ou fixação de uma estrutura rígida no anel valvar aórtico, distorcendo as propriedades hidrodinâmicas da valva.Nosso protocolo oferece uma maneira inovadora de canular a VSVE para que todas as propriedades hidrodinâmicas medidas sejam válidas. Este método é projetado para avaliar a viabilidade de materiais de substituição de folhetos para uso como adesivo ou prótese de reparo valvar. É uma ferramenta fundamental para nossas pesquisas futuras, nas quais estamos desenvolvendo materiais poliméricos biomiméticos para uso como substitutivos valvares duráveis com tecido nativo, como propriedades mecânicas e hidrodinâmicas.

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Um biorreator pressão cíclica capaz de submeter o tecido de válvula cardíaca em condições de pressão fisiológicos e patológicos tem sido projetado. Um programa LabVIEW permite aos usuários controlar a pressão magnitude amplitude e frequência. Este dispositivo pode ser usado para estudar a mechanobiology do tecido cardíaco válvula ou células isoladas.

Projeto de um biorreator de pressão cíclica para o Ex Vivo Estudo de válvulas cardíacas Aórtica

Neste vídeo, demonstramos um procedimento para a remoção cirúrgica da aorta de porcos em miniatura. As células endoteliais colhidas dessas aortas isoladas podem ser cultivadas em condições in vitro para estudar a coagulação e as respostas imunes.

Isolamento da aorta suína: um procedimento cirúrgico para extirpar a aorta torácica de porcos em miniatura para análise a jusante

Tem havido um interesse renovado no desenvolvimento de válvulas de polímeros. Aqui, os objetivos são demonstrar a viabilidade de modificação de um duplicador de pulso comercial para acomodar geometrias tri-folheto e definir um protocolo para apresentar polímero dados hidrodinâmicos de válvulas em relação aos dados de válvulas nativas e protéticas, recolhidos em condições quase idênticas.

Protocolo Relativo Avaliação hidrodinâmica de Tri-folheto polímero Válvulas

Descrevemos uma técnica nova, econômica e eficiente para a entrega percutânea de implantes coronários impressos tridimensionalmente para criar modelos suínos de peito fechado de doenças cardíacas isquêmicas. Os implantes foram fixados no local usando um cateter de extensão mãe e filho com alta taxa de sucesso.

Nova abordagem percutânea para implantação de implantes de estenose coronária impressa 3D em modelos suínos de doença cardíaca isquêmica

Regurgitação aórtica é uma doença cardíaca da válvula aórtica. Este manuscrito demonstra como a ressonância magnética de fluxo quadridimensional pode avaliar a regurgitação aórtica usando válvulas cardíacas in vitro imitando regurgitação aórtica.

In vitro Avaliação da Regurgitação Aórtica usando ressonância magnética de fluxo quadridimensional

Este protocolo descreve um procedimento cirúrgico minimamente invasivo para bandagem da aorta ascendente em suínos.

Modelo Minimamente Invasivo de Estenose Aórtica em Suínos

Este estudo apresenta um modelo suíno para avaliação de enxertos de pequeno diâmetro em artérias femorais. O modelo imita a dinâmica vascular humana e avalia de forma abrangente a permeabilidade do enxerto, a hemodinâmica e a remodelação vascular. Ele oferece uma plataforma valiosa para testar enxertos vasculares e monitorá-los com ultrassom Doppler e angiografia.

Implante de enxerto vascular femoral em modelo suíno para teste de enxertos vasculares de pequeno diâmetro

Este estudo apresenta um método cirúrgico para intervenção na estrutura da válvula aórtica subvalvular utilizando corte de tecido direcionado via abordagem transaórtica em porcos Bama normais.

Um método cirúrgico para intervenção na estrutura subvalvular por meio de abordagem transaórtica em porcos Bama normais

Um método para semeadura de titânio de sangue entrar em contato com biomateriais com células autólogas e biocompatibilidade teste é descrito. Este método utiliza células progenitoras endoteliais e tubos de titânio, semeadas em poucos minutos de implante cirúrgico em suínos as cavas. Esta técnica é adaptável a muitas outras implantáveis ​​dispositivos biomédicos.

Autólogas progenitoras endoteliais Cell Technology Semear e Teste de biocompatibilidade para dispositivos Cardiovascular em Modelo Animal Grande

Um dispositivo simples de microfluidos foi desenvolvido para realizar anestésico...

Simples dispositivos microfluídicos para<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging de<em&gt; C. elegans</em&gt;,<em&gt; Drosophila</em&gt; E Zebrafish

Aprenda a montar uma válvula aórtica porcina em um duplicador de pulso para testes hidrodinâmicos. Este método preserva as propriedades da válvula e permite avaliar materiais de substituição de folhetos para reparo valvar.

Um Modelo Ex Vivo Porcino para Testes Hidrodinâmicos de Procedimentos Experimentais de Valva Aórtica e Novos Dispositivos Médicos (Vídeo) | JoVE Journal

Um Modelo Ex Vivo Porcino para Testes Hidrodinâmicos de Procedimentos Experimentais de Valva Aórtica e Novos Dispositivos Médicos

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