2024年5月24日
本方案介绍了一种用于在非血栓性、血栓性和血栓后深静脉中测试静脉成形术球囊(VB)干预的存活啮齿动物模型。
在安德里亚·T·奥比博士领导的实验室中,我们研究一种称为静脉血栓形成的异常血液凝固疾病。事实上,我们是全球极少数致力于这一具有前景的发现领域的实验室之一。我们的目标是将研究成果转化为治疗静脉血栓形成的新方法,这些方法将更加安全、有效。
我们的研究促使我们更加深入地探讨免疫系统在血栓形成中的作用,包括感染在血栓形成中的存在,以及导致血块溶解、静脉纤维化(包括静脉壁瘢痕形成)和血栓后综合征的相关通路。以往的动物模型均未能复制人类静脉血栓栓塞中发生的复杂免疫相互作用。此外,尚无模型能够表征接受血管内治疗后继以超声检查的反应。
我们正在为理解不同类型的免疫细胞如何与血凝块周围的环境相互作用,以及这些相互作用如何导致细胞基因表达的改变(这一过程称为表观遗传调控)做出重要贡献。我们认为,下腔静脉球囊扩张模型将加速新型球囊血管成形术原型的开发,用于治疗静脉血栓,并有望预防血栓后综合征。首先,将麻醉后的大鼠摆位,以便对下腔静脉(IVC)进行超声扫描。
在腹部涂抹导电凝胶,并将探头置于腹部横断面位置。使用二维成像模式(B模式),将10兆赫线性探头置于腹部中央。当腹腔血管显影后,通过观察可压缩性及血流情况,区分下腔静脉与腹主动脉。
确定下腔静脉(IVC)位置后,识别位于肾静脉下方、IVC分叉上方的中段三分之一部分。在横断面视图下,利用B模式横断面图像测量该中段下腔静脉的壁对壁直径,记录血管最宽处的直径。使用光盘以DICOM文件格式存储数据。
用浸有氯己定擦洗液和氯己定溶液的纱布清洁腹部三次。将灭菌保鲜膜作为手术敷料覆盖大鼠胸腹部区域。使用虹膜剪,在剑突下方约两厘米处沿腹正中线做一切口,切开皮肤和腹壁,切口长约三厘米。
用无菌生理盐水浸湿的纱布将肠管推向动物右侧。在切口处放置金属拉钩以暴露下腔静脉。然后使用无菌棉签进行钝性分离。
使用低温精细尖端电凝器,从肾静脉至髂动脉分叉处电凝下腔静脉的所有腰支,并用7-0不可吸收聚丙烯缝线结扎侧支。在下腔静脉近端放置一个弧形血管微夹,该位置需将下腔静脉与主动脉分离,并位于肾静脉下方。在髂动脉分叉上方的下腔静脉远端放置一个直形微夹。
将一根8O尼龙UIT缝线套环置于左侧肾静脉,在下腔静脉前表面中央位置固定。将一根0.014毫米的尖端导丝沿球囊血管成形术导管逆行插入血流方向,经肾下段下腔静脉套环到达弯曲的微型夹。采用塞丁格技术将球囊推进至下腔静脉中段。
移除已磨尖的导丝,使用20毫升注气注射器将静脉成形术球囊充气三分钟,使下腔静脉扩张10%至15%。在下腔静脉插管前,用无菌生理盐水冲洗所有系统,以避免空气栓塞。当下腔静脉成形术球囊放气并取出后,收紧U形缝线。
然后移除微型夹子,以两层缝合方式关闭剖腹手术切口。使用3-0号聚乳酸-羟基乙酸可吸收合成缝线,连续缝合腹壁和皮肤。将大鼠置于单独的笼子中恢复,并在距离笼子24英寸的加热灯下观察30分钟,之后将其送回原有的饲养单元。
在大鼠下腔静脉放置夹子后,其下腔静脉的平均脉冲波多普勒血流速度显著降低。
本研究提出了一种用于在多种深静脉病变类型(包括非血栓性、血栓性和血栓后情况)中测试静脉成形术球囊(VB)干预措施的存活啮齿动物模型。该研究旨在加深对静脉血栓形成机制的理解,并改进治疗策略。
啮齿类动物下腔静脉成形术球囊模型(VBM)为评估非血栓性和血栓后静脉病变的成形术干预措施提供了一种可重复的体内系统。该模型可用于针对血栓形成、纤维化及静脉壁重塑等新型疗法的机制性风险降低和靶点验证。其具备良好的转化一致性,可在血管介入项目临床前关键节点提供可靠的预测依据。
体素形态学分析(VBM)贯穿了血管治疗药物从早期发现到先导物识别及临床前验证的整个过程。