June 21st, 2024
这里描述的是一种可用于通过免疫荧光显微镜对五个或更多荧光参数进行成像的方法。概述了从这些图像中提取单细胞并通过类似流式细胞术的门控策略进行单细胞分析的分析管道,该管道可以识别组织切片中的细胞亚群。
我们的首要目标是研究免疫系统细胞和中枢神经系统内的神经胶质细胞如何促进多发性硬化症等神经系统疾病的发展和进展。免疫荧光显微镜检查是生物学科中广泛使用的标准技术,对神经科学和免疫学研究至关重要。困扰研究人员的主要问题之一是,由于传统显微镜的限制,免疫荧光显微镜通常受限于一次可以成像的探针数量。
在该协议中,我们描述了一种扩展许多显微镜一次可以成像的探针数量的方法,并提供了一个分析管道来处理信息密集的图像。该协议的优点是它可以适应许多广泛使用的显微镜并且易于执行,这将使更多的实验室可以使用多重组织学分析。
本研究概述了一种使用免疫荧光显微镜成像多重荧光参数的方法,以及用于分析单细胞数据的流程。该方法增强了传统成像功能,允许识别与神经系统疾病中的免疫和胶质细胞功能相关的细胞子集。