小鼠眼模型中视网膜缺血再灌注损伤的诱导

该方案通过前房插管和眼压升高诱导视网膜缺血，然后眼压正常化以启动再灌注，从而模拟小鼠眼中的视网膜缺血再灌注损伤。

我们的研究重点是了解眼睛如何自然地预防炎症。我们的研究表明，髓鞘通路对于抑制眼睛炎症和促进应激视网膜中的细胞存活至关重要。这表明灭活 myecorn 通路可能有利于治疗视网膜生成性疾病。

该方案使针头拔出前的眼压正常化，减少对眼结构的创伤并限制对缺血再灌注成分的损伤。这种改进最大限度地减少了物理作引起的实验变异性，从而提高了该模型的准确性。我们的研究提倡独特的疗法概念，而不是中和分子来减轻症状，希望细胞能够存活并恢复正常。

我们专注于改变与疾病有关的细胞的行为。这种方法具有很强的潜力，可以提供长期益处和抵抗慢性疾病的复发，因为会诱导正常的细胞活动。我们的模型提供了一种精细的技术来研究小鼠眼的缺血再灌注损伤。

这可能更准确地表示眼内结构如何应对长时间眼压或再灌注损伤造成的损伤。首先，准备连接到输液管线的无菌 0.9% 氯化钠盐水溶液注射器和一根旋塞阀，该旋塞阀带有连接到管线末端的 30 号针头，每只小鼠一个，并将它们放置在工作台表面上方 120 厘米处。然后，冲洗掉管路上的所有气泡。

接下来，通过在海绵上切出大约 6 x 3 厘米的凹陷并将其牢固地放入聚苯乙烯泡沫塑料井或其他扁平容器中，创建一个床来稳定老鼠。麻醉小鼠后，用一滴 1% 托吡卡胺扩张虹膜，并等待 5 分钟进行扩张。然后，将鼠标牢固地放在显微镜下的海绵床上。

将盐水溶液涂抹在眼睛上，以冲洗掉眼睛表面的任何碎屑或皮毛。使用无齿镊子，轻轻握住其中一只眼睛。然后，在输液管闭合的情况下，用针头在距离角膜缘约 2 毫米的地方插管前房。

确保针头垂直于外周弯曲的角膜表面刺穿角膜，然后平行于虹膜平面略微变平。转动旋塞阀以运行输液管路，并确认角膜伤口没有渗漏。确保角膜随着眼压的增加而逐渐膨胀。

使用眼压计检查眼压是否已升高至 90 至 100 毫米汞柱。用胶带固定输液管路，确保针头不会改变位置并开始渗漏。现在，将杆菌肽等眼药膏涂抹在眼睛上以防止干燥。

将鼠标放在远离显微镜的位置，放在加热灯下，以保持正常体温 60 分钟。60 分钟后，将鼠标放回显微镜。将盐水溶液注射器降低到小鼠的水平，以使眼压正常化。

用眼压计测量眼压，检查它是否接近正常，约为 20 毫米汞柱。归一化后，小心地取下针头，以免损坏镜头或光圈。用眼科抗菌软膏涂在小鼠眼睛上，例如杆菌肽兽用眼药膏。

在加热的表面上监测鼠标一到两个小时，直到它从麻醉中完全恢复。完全恢复后，将鼠标放回笼子里。与第 2 天相比，第 7 天的视网膜显示出更大的细胞损伤和损失，表明缺血和再灌注后随着时间的推移，视网膜变性更严重。

与第 2 天相比，第 7 天视网膜大部分层的个体组织病理学评分更高，显示病理变化随时间增加。第 7 天的总组织学评分显著高于第 2 天，表明视网膜损伤明显进展。